某品牌灵芝破壁孢子粉的安全性评价

目的研究某品牌灵芝破壁孢子粉的安全性。方法采用急性毒性试验、3项遗传毒性试验和30 d喂养试验评价灵芝破壁孢子粉的安全性。结果该品牌灵芝破壁孢子粉对小鼠急性经口MTD值>15000 mg/kg b.wt,属无毒级;3项遗传毒性试验均为阴性结果;30 d喂养期间,不同剂量的灵芝破壁孢子粉对大鼠的体重、食物利用率、主要脏体、血液学和血生化指标均产生显著影响(P值均<0.05);试验动物组织病理学均未见显著改变。结论试验条件下,该品牌灵芝破壁孢子粉的安全性良好。

复合氨基酸片对四氯化碳肝损伤保护作用的实验研究

目的:探讨复合氨基酸片(谷氨酰胺、精氨酸、甘氨酸和L-半胱氨酸)对四氯化碳(CCl4)肝损伤的保护作用。方法:将40只ICR小鼠随机分成阴性对照组、CCl4模型组及490 mg、980mg/(kg b.w)两个剂量组,剂量组每天灌胃给予复合氨基酸片,阴性对照组和CCl4模型组给予双蒸水。30 d后,CCl4模型组及剂量组以5 ml/(kg b.w)的剂量一次性经口给予色拉油配置的0.5%CCl4,24 h后处死所有小鼠,测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,取肝脏左叶进行组织病理学检查。结果:980 mg/(kg b.w)剂量组的ALT、AST水平降低,与CCl4模型组比较,有极显著性差异(P<0.01);980 mg/(kg b.w)剂量组发生肝细胞坏死的病变程度减轻,肝细胞坏死评分降低,与CCl4模型组比较,有极显著性差异(P<0.01)。结论:复合氨基酸片对CCl4肝损伤具有辅助保护作用。

可控细胞膜孔形成蛋白基因的克隆与表达

根据Wood 4 6株金黄色葡萄球菌α溶血素 (α HL)基因序列设计了引物 ,用高保真PCR从 180 0株金黄色葡萄球菌基因组DNA中扩增出了 0 .9kb的α HL基因 ,序列测定结果显示 ,两菌株α HL基因的核苷酸序列有 6个碱基差异 ,但仅引起 1个氨基酸替换。用PCR分段克隆和定点突变技术将大肠埃希氏菌外膜蛋白A信号肽序列与α HL编码区融合 ,并将其第 130～ 134位氨基酸替换为 5个连续的组氨酸 ,获得的融合基因命名为H5基因。将其克隆入 pET 30a质粒 ,用获得的重组质粒pET H5转化感受态大肠埃希氏菌 ,获得分泌性表达H5的重组菌。经IPTG诱导后 ,重组菌表达出分子质量为 35ku的H5蛋白。经镍柱亲和层析纯化的H5对兔红细胞的半数溶血值为 180ng/mL ,能使鼠成纤维细胞PA317获得对台盼蓝和海藻糖的通透性 ,且能被Zn2 + 抑制。提示 ,表达的H5蛋白为可控细胞膜孔形成蛋白 。

人溶菌酶cDNA的克隆及其在小鼠体内的表达

根据已发表的人溶菌酶 (human lysozyme,h L YZ) m RNA序列设计引物 ,以人乳腺第 1链 c DNA为模板 ,用 PCR扩增出 1.5 kb h L YZ双链 c DNA,其推导的氨基酸序列与国外发表的从胎盘、巨噬细胞和结肠中克隆的 h L YZ氨基酸序列同源性为 10 0 % ,与从人组织细胞中克隆的 h L YZ仅有 1个氨基酸差异 ,但与从中国人胎盘中克隆的 h L YZ具有6个氨基酸差异。将此 c DNA克隆入乳腺特异表达载体 ,用所获得的基因构件注射哺乳期小鼠 ,经 RT- PCR和微球菌溶解试验证明 ,上述基因构件能有效地驱动目的基因在小鼠乳腺中表达 ,表达量为 6 9.3mg/ L,表达具有较好的组织特异性。这些试验结果表明 ,本研究构建的表达 h L YZ c DNA的基因构件可以用于乳腺生物反应器的研制。

复方蛹虫草改善DSS联合高脂饮食诱导的溃疡性结肠炎的作用和机制

目的探究复方蛹虫草(CCM)对葡聚糖硫酸钠(DSS)联合高脂诱导的溃疡性结肠炎(UC)的改善作用及初步机制。方法C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组、巴柳氮钠组及CCM 90、180和540 mg·kg^(-1)·d^(-1)组。采用DSS联合高脂饮食建立UC小鼠模型。造模同时ig给药,每天1次,连续8周,每周称量各组小鼠体质量,联苯胺法检测粪便隐血水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清细胞炎性因子TNF-α、IL-1β。HE染色法比较各组结肠组织病理改变,蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测结肠组织中IκB-α、NF-κBp65、TNF-α的表达。结果与正常组相比,模型组粪便隐血分数在第1、3、5、6周显著增加(P<0.05);小鼠结肠组织发生明显炎性细胞浸润(P<0.05);血清炎性因子TNF-α、IL-1β含量显著增高(P<0.01);结肠组织TNF-α、NF-κBp65表达显著增高(P<0.01),IκB-α表达显著降低(P<0.01)。与模型组相比,CCM组小鼠体质量均显著降低(P<0.05,P<0.01);CCM组小鼠粪便隐血显著减少(P<0.05);CCM高剂量组小鼠血清TNF-α显著降低(P<0.05),CCM中剂量组小鼠血清IL-1β显著降低(P<0.05);CCM中剂量组小鼠结肠组织炎性细胞浸润显著减少(P<0.05);CCM给药各组小鼠结肠组织TNF-α、NF-κBp65表达显著降低(P<0.01),IκB-α表达显著增高(P<0.01)。结论 CCM可以改善DSS联合高脂诱导的溃疡性结肠炎,其机制可能与其抑制NF-κB通路的激活有关。

黄芪甲苷乳膏对光老化小鼠皮肤组织MDA含量及SOD、GSH-px活力的影响

目的研究皮肤外用黄芪甲苷对紫外线照射引起的小鼠光老化皮肤的影响。方法BACB/C小鼠随机分成6组:正常对照组(A)、模型组(B)、模型+基质组(C)、模型+黄芪甲苷低剂量组(D)、模型+黄芪甲苷中剂量组(E)、模型+黄芪甲苷高剂量组(F)。模拟UV长期照射,造成皮肤光老化小鼠模型。给药组照射同时外用黄芪甲苷乳膏。用组织切片HE染色观察皮肤结构改变;以生化分析方法测定MDA含量及SOD、GSH-px活性;测定UVB最小红斑量,计算日光防护系数(SPF)值。结果模型组小鼠皮肤组织MDA含量明显增加,SOD、GSH-px活性明显降低(P<0.01),病理切片呈现光老化状态;与模型组比较,黄芪甲苷高剂量组可显著降低MDA含量,提高SOD、GSH-px活性,(P<0.01);随着外用黄芪甲苷乳膏时间延长,最小红斑量不断增高,90d时SPF=25。结论黄芪甲苷乳膏对紫外线照射引起的小鼠皮肤光老化具有保护作用。其机制可能一方面是黄芪甲苷本身具有清除自由基的作用;另一方面黄芪甲苷可以通过提高SOD、GSH-px活力来达到抗氧化的目的。

复方芦荟口服液的毒理学安全性与通便功效研究

目的评价一种以低聚果糖、水苏糖、芦荟、黑木耳为原料的复方口服液的毒理学安全性和通便功效。方法依据《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》,进行急性/短期经口毒性、遗传毒性以及动物通便功效等试验。结果该样品小鼠急性经口最大耐受剂量(maximum tolerable dose,MTD)>15.00 g/(kg·BW);鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验(Salmonella typhimurium/mammalian microsomal enzyme test,Ames试验):不论加S9与否,样品各剂量组标准测试菌株TA97a、TA98、TA100和TA102的回变菌落数均未超过相应溶剂对照值的两倍;小鼠骨髓细胞微核试验和精子畸形试验:与溶剂对照相比,样品各剂量组小鼠微核细胞率、精子畸变率未见显著性差异(P>0.05);大鼠30 d灌胃毒性试验:样品各剂量组雌、雄大鼠均活动、生长正常,体质量、进食量、食物利用率以及肝、肾、脾、睾丸等脏器湿重及脏体比均无显著变化(P>0.05),血液学、血生化指标检测值均在本实验室历史参考值范围内,未发现与样品明显有关的组织病理学改变;小鼠通便功效试验:与便秘模型对照组相比,样品各剂量组5 h内排便粒数均无显著性差异(P>0.05),首次排黑便时间均提前(P<0.05或P<0.01),1.0和3.0 mL/(kg·BW)剂量组墨汁推进率均提高(P<0.01),3.0 mL/(kg·BW)剂量组5 h内粪便重量增加(P<0.05)。结论该样品具有通便功效,未见其急性毒性,在以5μL/皿和10.0 mL/(kg·BW)为最高剂量时,未见其致突变性或遗传毒性,其雌、雄大鼠短期经口毒性无可见有害作用剂量(noobserved adverse effect level,NOAEL)值均为10.0 mL/(kg·BW)(相当于成人推荐摄入量的100倍)。

银杏叶聚戊烯醇的亚慢性毒性研究

[目的]研究银杏叶聚戊烯醇亚慢性染毒后可能产生的健康危害;提供有关靶器官、蓄积作用与无作用剂量的资料。[方法]SD大鼠80只,雌雄各半,随机分为833、1667和2500mg/kg3个剂量组和1个对照组,将银杏叶聚戊烯醇均匀地混入基础饲料喂饲90d,对照组给予基础饲料。观察大鼠一般状况,试验中期采尾血测定血液学指标1次;试验结束时,摘眼球取血测血液学指标和血生化指标,处死动物后测定脏器湿重计算系数及进行组织病理学检查,分析对脏器的损害情况。[结果]①一般状况:各剂量组雌雄大鼠90d总增重、总进食量和总食物利用率与对照组值比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。②血液和生化指标:各染毒组红、白细胞总数及血红蛋白含量与对照组比差异均无统计学意义(P﹥0.05);部分剂量组AST、ALT、GLU、CR和BUN发生改变,但无剂量-反应关系,且数值均在正常波动范围。此外,雄性低、高剂量组TG和高剂量组CHO低于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05),推测银杏叶聚戊烯醇可能具有一定的调节血脂作用。③脏器系数:各剂量组脏器系数与对照组相比,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。④病理组织学检查:各染毒组动物组织与对照组比较均无明显差异。[结论]大鼠连续90d摄入2500mg/kg剂量的银杏叶聚戊烯醇未见该受试物明显毒性,没有引发有生物学意义的体征表现,可以初步认为银杏叶聚戊烯醇作为医用和保健食品使用是安全可靠的。

桂哌齐特注射液不良反应回顾性研究

目的:调查马来酸桂哌齐特注射液不良反应的临床表现和诱发因素,为药物的安全应用提供参考。方法:采用病历回顾性研究方法,对我院503份使用马来酸桂哌齐特注射液的完整住院病历进行调查,用SPSS11.0进行统计分析。结果:503例使用马来酸桂哌齐特注射液的不良事件27例(5.4%),其中药物不良反应11例(2.2%).主要表现为神经系统、胃肠道系统及皮肤反应,不良反应与性别无关,而与年龄和合并用药有关(P<0.05)。结论:掌握马来酸桂哌齐特注射液发生不良反应的临床表现和诱发因素,使其应用更为安全。

葛根提取物对小鼠酒精性肝损伤的辅助保护效果

目的探讨葛根提取物对酒精性肝损伤的辅助保护功能。方法将雄性SPF级ICR小鼠60只,随机分成3个剂量组(500、166.7、83.4mg/kg BW/d)和溶剂、模型对照组,共5组。剂量组经口灌胃给予葛根提取物,溶剂和模型对照组给予纯净水,灌胃量均为20ml/kg b.wt.。连续30d后。剂量组和模型对照组一次灌胃给予50%乙醇14ml/kg b.wt.,溶剂对照组给予纯净水进行造模。造模后禁食16h,进行丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)含量测定及组织病理学检查。结果各剂量组、模型对照组与溶剂对照组,灌胃前后小鼠初始体重、终末体重差异均无统计学意义(P值均>0.05)。与溶剂组相比:模型组小鼠肝匀浆中MDA、TG含量增高,GSH含量降低,肝细胞脂肪变性差异均有统计学意义(P值均<0.05),表明肝损伤模型建模成功。与模型组相比,样品各剂量组小鼠肝匀浆中MDA值差异均无统计学意义(F=1.320,P>0.05);高剂量组小鼠肝匀浆中GSH含量[(6.63±1.80)mg/g蛋白]升高(t=2.626,P<0.05);各剂量组肝损伤小鼠肝匀浆中TG含量[高、中、低剂量组分别为(12.1±3.1)、(12.3±4.4)、(12.6±2.6)μmol/g肝]均降低(P值均<0.05);低剂量组小鼠肝细胞脂肪变性程度与模型对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论试验条件下,葛根提取物对一次性大剂量摄入乙醇引起的小鼠肝损伤具有一定的辅助保护作用。

L-阿拉伯糖大鼠28 d重复剂量经口毒性研究

目的研究L-阿拉伯糖对大鼠的亚急性经口毒性。方法根据GB 15193.22—2014《食品安全国家标准28天经口毒性试验》,选取无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级健康SD (Sprague-Dawley)大鼠,依体质量随机分成4组,将L-阿拉伯糖分别按照0.00、2.50、5.00、10.00 g/kg掺入基础饲料,连续饲喂28d,同时加设对照组和高剂量组2个卫星组,恢复期为14 d。主试验和恢复期结束时,称量空腹体质量和主要脏器湿重,采集血样,进行血液学、血清生化和组织病理学检测。结果与对照组相比,L-阿拉伯糖可有效降低雌、雄大鼠的摄食量和体质量,且正常饮食后可恢复正常;未见L-阿拉伯糖对大鼠一般状况、眼、食物利用率、尿常规、血液学、血生化、脏器湿重、脏器系数、大体解剖及组织病理学产生有毒理学意义的影响。结论在本研究条件下,L-阿拉伯糖对雌、雄大鼠28 d经口毒性无可见有害作用剂量(no observed adverse effect level,NOAEL)值分别为13.67和13.92 g/kg(分别相当于15 g/d推荐摄入量的55和56倍)。

驼奶对急性酒精肝损伤的辅助保护作用

目的探讨驼奶对小鼠急性酒精性肝损伤的辅助保护作用。方法60只雄性ICR小鼠随机分为5组,即500、1 000、3 000mg/kg b.wt.等3个剂量组、模型对照组和空白对照组。剂量组分别经口给予相应剂量的驼奶水溶液,模型对照组和空白对照组给予纯净水。连续灌胃30d后,空白对照组继续给予纯净水,其余各组于实验结束时1次给予50%的乙醇(14mL/kg b.wt.)灌胃,禁食16h,以建立小鼠急性肝损伤模型,分别检测各组肝匀浆中甘油三酯(TG)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和血清中极低密度脂蛋白(VLDL)的含量,观察肝脏病变情况并比较。结果灌胃30d后,各剂量组与对照组小鼠体重差异均无统计学意义(P>0.05);模型对照组肝匀浆MDA和TG含量高于空白对照组,肝匀浆GSH和血清中的VLDL含量低于空白对照组(P值均<0.01),急性酒精肝损伤模型成功建立。各剂量组小鼠肝匀浆中MDA含量低于模型对照组,GSH含量高于模型对照组,其中500、1 000mg/kg b.wt.剂量组小鼠肝匀浆MDA、GSH含量,与模型对照组差异均有统计学意义(P值均<0.05);各剂量组小鼠肝匀浆中TG含量低于模型组,差异均有统计学意义(P值均<0.01);各剂量组血清VLDL含量高于模型对照组,3 000mg/kg b.wt.剂量组与模型对照组差异有统计学意义(P<0.05)。与模型对照组相比,各剂量组小鼠肝细胞脂肪变性不同程度减轻,其中1 000mg/kg b.wt.剂量组病变程度与模型对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论实验条件下,驼奶对小鼠急性酒精肝损伤有一定的辅助保护作用。

SPF级SD大鼠血液学指标95%参考区间的建立及性别差异探讨

目的建立8周龄SPF级SD大鼠血液学指标95%参考区间,并探讨性别因素的影响。方法在严格质量控制的条件下,选取本实验室近3年30d喂养试验终点阴性对照组SD大鼠,雌雄各160只,采用SIEMENS ADVIA 2120血液分析仪对其血液学指标进行检测,并制定95%参考区间。结果8周龄SPF级SD雌/雄大鼠血液学指标95%参考区间分别为:白细胞总数(WBC,×10^9/L):4.82~10.96/5.22~12.94;红细胞总数(RBC,×10^12/L):6.16~7.72/6.12~7.75;血红蛋白(HGB,g/L):111.40~143.46/114.00~143.00;血小板总数(PLT,×109/L):800.94~1456.33/862.21~1415.82;中性粒细胞百分比(NEUT%):4.94~24.58/6.78~24.94;淋巴细胞百分比(LYMPH%):69.83~91.48/69.59~89.73;单核细胞百分比(MONO%):0.96~4.12/1.20~4.80;嗜酸细胞百分比(EOS%):0.60~2.60/0.40~1.90;嗜碱细胞百分比(BASO%):0.10~0.30/0.10~0.30。WBC、NEUT%、MONO%雄鼠均高于雌鼠(t值分别为6.798、2.046、2.294,P值均<0.05),EOS%雄鼠低于雌鼠(t=-7.188,P<0.01),RBC、HGB、PLT、LYMPH%和BASO%雌雄之间无统计学差异(t值分别为-0.146、0.927、0.600、-1.662、0.779,P值均>0.05)。结论SD大鼠多项血液学指标存在雌雄差异,建立的95%参考区间可为保健食品毒理学安全性评价提供参考。

BALB/c和ICR小鼠用于局部淋巴结试验的研究

目的:探讨BALB/c和ICR小鼠是否可以替代CBA小鼠用于局部淋巴结试验。方法:采用中等强度的致敏物己基肉桂醛(HCA)和强致敏剂2,4-二硝基氯苯(DNCB)作为受试物,用3H-TdR法对BALB/c和ICR小鼠进行比较。结果:两种品系小鼠对溶剂AOO反应均较低,给予HCA和DNCB后BALB/c小鼠反应与CBA小鼠接近,ICR小鼠对DNCB的反应与BALB/c相似,但对HCA的反应低于BALB/c小鼠。EC3值分别为15.36%和7.41%。结论:两种小鼠均可以用于上述两种致敏物的LLNA试验,而以BALB/c小鼠为优。

番茄红素片的安全性研究

目的为番茄红素片安全性评价提供毒理学依据。方法按卫生部《保健食品检验与评价技术规范》,进行急性毒性试验、骨髓细胞微核试验、睾丸染色体畸变试验、Ames试验、30d喂养试验。结果番茄红素片雌、雄小鼠经口最大耐受剂量(MTD)均>15 000mg/kg。Ames、小鼠骨髓微核和睾丸染色体试验未发现潜在致突变作用。30d喂养体重、增重、摄食量、食物利用率、肝、肾、脾、睾丸重量及各脏体比、血细胞、血生化和病理学指标与对照组比较均无统计学差异。结论本次实验条件下,番茄红素片属无毒级,未显示潜在遗传毒性,雌、雄大鼠30d喂养试验未观察到有害作用最大剂量(NOAEL)分别为1 960、1 832mg/(kg.d)。

复方刺五加片毒理学安全性及缓解体力疲劳功效研究

目的评价一种以刺五加、肉苁蓉、西洋参、丹参为原料的复方保健食品毒理学安全性和缓解体力疲劳功效。方法依据《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》,进行急性经口毒性、遗传毒性、30d亚急性毒性以及缓解体力疲劳动物功能学等试验。结果该复方刺五加片对雌、雄ICR小鼠急性经口最大耐受剂量值均>15.00 g/(kg·BW);鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验,以5000μg/皿为最高剂量,不论加S9与否,该样品对TA97a、TA98、TA100和TA1024组标准测试菌株的回复突变数均未超过相应水对照组值的2倍;小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变试验,与溶剂对照相比,样品各剂量组骨髓细胞微核率、睾丸初级精母细胞性染色体单价体率、常染色体单价体率、细胞畸形率均无显著性差异(P>0.05);30 d亚急性毒性试验未发现该样品对SD大鼠生长、活动、体质量、摄食量、食物利用率、血液生理生化指标以及主要组织器官的毒理学病理学效应;小鼠缓解体力疲劳功效试验,该复方刺五加片0.46g/(kg·BW)组负重游泳时间显著延长(P<0.01),运动前后3个时间点血乳酸曲线下面积显著减少(P<0.01),0.46、1.38g/(kg·BW)组血清尿素氮显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论该复方刺五加片具有缓解体力疲劳功效,且未见明显急性毒性或遗传毒性,其对雌、雄SD大鼠30 d经口毒性未观察到有害作用的水平分别为5.29、5.14 g/(kg·BW)(相当于成人推荐摄入量的115和112倍)。

吡咯喹啉醌毒理学安全性评价

目的为吡咯喹啉醌(cpyrrologuinoline quinine,PQQ)安全性评价提供毒理学依据方法按《保健食品检验与评价技术规范的要求》,观察PQQ对实验动物的影响结果雌雄小鼠急性经口LD50值分别为3 690mg/kg和2 710mg/kg.BW,未见雌雄小鼠骨髓嗜多染红细胞的致微核作用,未显示雄性小鼠精子的诱变活性,无论加及不加S9未见对测试菌株的诱变活性;90天喂养体重、增重、摄食量、食物利用率、肝/体、肾/体、脾/体和睾/体比、血液、生化和病理组织学检查与对照组值比较均无显著性差异(P>0.05)。结论在本试验条件下,PQQ属低毒,未见明显致突变作用,大鼠90天喂养最大未观察到有害作用剂量(NOAEL)为15mg/kg.BW.。

芝麻素胶囊的毒理学安全性评价

目的 评价芝麻素胶囊的毒理学安全性。 方法 应用小鼠急性经口毒性试验评价芝麻素胶囊的急性毒性；通过Ames试验、骨髓细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变试验评价其遗传毒性；采用大鼠30 d喂养试验评价其亚急性毒性。 结果 雌、雄小鼠急性经口试验的最大耐受量＞15 g/kg ·b.wt.，毒性等级为无毒级。Ames试验为阴性，无致基因突变作用。与对照组比较，各剂量组小鼠细胞微核率、睾丸染色体畸变细胞率差异均无统计学意义（ P 值均＞0.05）。雌、雄大鼠经30 d喂养后总增重、总食物利用率、脏体比差异均无统计学意义（ P 值均＞0.05），大鼠血常规指标、血生化指标均在正常范围内，主要脏器无病变。 结论 在本实验条件下，该芝麻素胶囊无急性毒性、遗传毒性、亚急性毒性，具有较高安全性。