AT1R/miR-26a通路在高血压血管重塑中的调控机制

目的阐明AT1R/miR-26a通路在高血压血管重塑中的重要作用及分子机制。方法①将24只8周龄雄性自发性高血压大鼠(SHRs)分为(n=8):氯沙坦干预组[氯沙坦20 mg/(kg·d)灌胃]、哌唑嗪干预组[哌唑嗪5 mg/(kg·d)灌胃]、SHR模型对照组[纯水10 mL/(kg·d)灌胃];雄性WKY大鼠作为正常对照组[纯水10 mL/(kg·d)灌胃](n=6),干预8周;干预前后3~5 d测定鼠尾动脉收缩压(SBP),直至干预期满。②将各组大鼠麻醉取胸主动脉,qPCR检测大鼠胸主动脉miR-26a的表达水平。③剩余组织石蜡包埋行HE、Masson染色,α-actin和PCNA免疫组化染色。④Western blot检测大鼠胸主动脉AT1R、TGFβ1、p-smad3、CTGF表达情况。⑤将培养传至3~9代的大鼠胸主动脉平滑肌细胞(VSMC)分为AngⅡ处理组(VSMC+AngⅡ,AngⅡ10-7 mol/L,作用24 h处理细胞)和对照组(VSMC+Ctrl)(n=6),qPCR检测miR-26a的表达水平,Western blot检测smad3和p-smad3表达情况。结果①干预期满时,氯沙坦组、哌唑嗪组SBP明显低于模型对照组,但均高于正常对照组(P<0.05),氯沙坦组、哌唑嗪组间SBP差异无统计学意义(P>0.05)。②氯沙坦组、哌唑嗪组胸主动脉miR-26a相对表达高于模型对照组(P<0.05),且氯沙坦组高于哌唑嗪组(P<0.05),但均较正常对照组表达低(P<0.05)。③氯沙坦组、哌唑嗪组中膜厚度/管腔内经(MT/LD)、胶原体积分数(CVF)及平滑肌细胞增值指数均低于模型对照组(P<0.05),且氯沙坦组低于哌唑嗪组;正常对照组血管管壁未见明显增厚,平滑肌分布均匀且动脉内膜完整,无显著的胶原纤维沉积现象,平滑肌细胞排列整齐,胞核形态规则。④氯沙坦组、哌唑嗪组胸主动脉AT1R、p-smad3、TGFβ1、CTGF相对表达低于模型对照组(P<0.05),且氯沙坦组低于哌唑嗪组(P<0.05),但均高于正常对照组(P<0.05)。⑤VSMC+AngⅡ组细胞miR-26a表达显著低于对照组,且p-smad3表达显著高于VSMC+Ctrl组(P<0.05)。结论 miR-26a可阻止血压升高,且在高血压血管重塑进程中具有保护性作用;阻断AT1受体可通过上调miR-26a改善高血压血管重塑。