基因工程表达甜味蛋白的研究进展

甜味蛋白作为一种天然甜味剂,热量低,甜度大,食用安全。但其由于受到原材料生长条件还有保质期等诸多限制,导致其生产成本较高。基因工程表达生产甜味蛋白可以提高其稳定性,扩大生产规模,降低其生产成本,并且更有针对性的改良其性能。但在应用基因工程生产甜味蛋白的研究中,也遇到了很多问题,包括甜味蛋白无法正确折叠及缺乏翻译后修饰导致的甜味丧失,还有因非植物提取导致的缺少食品安全认证,无法得到大众认可等。本文首次系统地分析了基因工程在生产甜味蛋白的应用及相关热点问题,为未来基因工程改造甜味蛋白提供理论资料。

长白落叶松群体4CL基因单核苷酸多态性分析

以黑龙江省林口县青山林场21年生长白落叶松(Larix olgensis Henry)异地保存种为材料,利用SNP标记方法和DNAMAN软件分析白刀山种源子代林的单核甘酸多态性情况。从分子水平证明长白落叶松具有丰富的遗传多样性,用4CL-A引物检测到178个SNP多态位点。共测序240条EST序列,测序成功193条,测序成功率为80.42%。本研究178个SNP变异中,有126个属于转换类型,占总变异的70.79%;有52个属于颠换类型,占总变异的29.21%,变异类型符合,转换∶颠换=7∶3。在转换类型中,A/G和C/T转换分别占37.08%和33.71%;颠换类型中G/C、A/C、A/T、和G/T分别在占7.87%、8.99%、7.87%和4.99%。但每个家系内的转换和颠换的比例相差较大,没有规律。转换和颠换的比例最大的是554号家系,其比值为7∶1,最小的家系是855号家系,其比值为3∶4。

杨树PtBBE9a基因异源过表达功能分析

小檗碱桥酶(berberine bridge enzyme,简称BBE)是一类典型的黄素双共价氧化酶家族,参与植物生长发育的多个生物过程。PtBBE9a是笔者所在课题组前期从杨树发育木质部分离、鉴定的糖蛋白。PtBBE9a基因表达在杨树木质部呈现高丰度水平,并且随着茎木质化程度的增强而升高。组织β-葡萄糖苷酸酶(GUS)活性染色结果显示,PtBBE9a启动子活性集中在ProPtBBE9a::GUS转基因拟南芥幼苗的顶端分生组织、成熟果荚皮及根组织。通过构建PtBBE9a-GFP过表达载体发现,PtBBE9a过表达拟南芥比野生型拟南芥早开花。进一步研究发现,转基因拟南芥的叶片数少于野生型拟南芥,而其茎木质素含量高于野生型拟南芥。推测PtBBE9a可能通过调控拟南芥生长发育周期而产生早花表型。