白术内酯Ⅰ通过SGLT1/NHE3通路治疗腹泻的机制研究

目的:探讨白术内酯Ⅰ通过SGLT1/NHE3通路治疗腹泻的机制。方法:Caco-2细胞建立体外肠道吸收模型,将细胞分别设为空白对照组、抑制剂(SGLT1抑制剂根皮苷、P38MAPK抑制剂SB203580、Ezrin抑制剂NSC668394)组、白术内酯Ⅰ组、白术内酯Ⅰ+抑制剂组,采用2-NBDG测定白术内酯Ⅰ对Caco-2细胞葡萄糖摄取的影响;Western Blot法检测SGLT1、p-P38MAPK、p-MAPKAPK2、p-AKT2、p-Ezrin、MLCK、p-MLC、NHE3等蛋白表达,荧光定量PCR检测SGLT1、MLCK、NHE3 mRNA表达。结果:白术内酯Ⅰ促进Caco-2细胞葡萄糖摄取,上调SGLT1、NHE3、MLCK的表达;此外,白术内酯Ⅰ增加了MLCK和P38MAPK/Ezrin信号通路中的蛋白磷酸化。结论:白术内酯Ⅰ可激活SGLT1促进Caco-2细胞葡萄糖摄取,通过P38MAPK/Ezrin信号通路上调其下游靶点NHE3和MLCK促进水钠吸收是其治疗腹泻的机制之一。

虎金方对MAFLD小鼠脂质代谢相关因子的影响

目的:探讨虎金方对MAFLD模型小鼠脂质代谢相关因子的影响及治疗作用。方法:将50只SPF级健康雄性C57/BL6J小鼠随机分为5组:正常对照组、模型组及虎金方高(21.24 g/kg)、中(10.62 g/kg)、低(5.31 g/kg)剂量组,每组10只。正常对照组予低脂饲料进行喂养,其余各组予高脂饲料进行喂养。造模成功后,虎金方各剂量组灌胃相应浓度药液,其余各组灌胃相应体积生理盐水,1次/d,共4 w。末次给药后,采血用于检测血脂及肝功能。分离适量肝组织投入4%多聚甲醛溶液内用于制作病理切片,其他肝组织用于检测脂质代谢相关因子的基因表达。结果:与正常对照组比较,模型组中TC、TG、ALT、AST水平显著升高(P<0.01);HE及油红O染色观察结果显示,在小鼠的肝组织内可见分布较多脂肪空泡,肝细胞体积增大,部分组织细胞呈气球样病变,红色脂滴分布广泛;RT-PCR结果显示肝组织mTOR、S6K1、LXRα、FAS、SCD1 mRNA表达显著升高,ACC mRNA表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,虎金方各剂量组TC、TG、ALT、AST水平显著降低(P<0.05或P<0.01),肝组织内脂肪空泡明显减少,仅部分仍可见散在脂滴,其中以高剂量组改善尤为明显;虎金方各剂量组肝组织mTOR、S6K1、LXRα、FAS、SCD1 mRNA表达显著降低,ACC mRNA表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:虎金方对MAFLD小鼠有一定治疗作用,其机制可能与调控脂质代谢相关因子,抑制脂质积累,促进脂质代谢有关。

白藜芦醇和姜黄素联用对油酸诱导HepG_(2)细胞脂肪变性的抑制作用

目的:探讨白藜芦醇和姜黄素联用对HepG_(2)细胞脂肪变性的抑制作用及可能机制。方法:以油酸钠体外诱导HepG_(2)细胞产生脂肪变性,并分别以白藜芦醇单体、白藜芦醇-姜黄素联用、姜黄素单体进行干预,采用CCK-8法测定细胞活力;油红O染色法观察脂滴分布;生物试剂盒测定细胞内TG、HDL-C、LDL-C含量;ELISA法测定各组细胞SIRT1含量。结果:以400μmol/L油酸钠诱导HepG_(2)细胞时,细胞活力不受抑制且细胞内TG含量和脂滴分布均显著高于正常细胞。白藜芦醇-姜黄素(12∶1)联用可显著降低油酸钠诱导HepG_(2)细胞引起的脂滴分布增加及TG、LDL-C含量升高,并可上调其SIRT1蛋白表达水平。结论:白藜芦醇-姜黄素联用可显著抑制油酸钠诱导的HepG_(2)细胞脂肪变性,其抑制作用优于白藜芦醇单体或姜黄素单体,其作用机制可能与上调SIRT1蛋白表达有关。

补中益气汤“益气升阳”配伍对脾虚小鼠作用的研究

目的:研究补中益气汤及"益气升阳"配伍对脾虚小鼠药理效应的影响。方法:造模成功后将动物随机分成补中益气汤组、益气升阳组、原方去益气升阳组、脾虚模型组和正常对照组,分别在给药1周后进行耐寒冷及抗疲劳机能试验,观察不同组别药物对小鼠胸腺指数、脾指数及胃肠推进的影响。结果:补中益气汤组、益气升阳组、原方去益气升阳组小鼠抗疲劳机能、脾指数、胸腺指数及胃肠推进率均呈显著性升高,与脾虚模型组比有统计学意义(P<0.01)。而益气升阳组和原方去益气升阳组对小鼠耐寒冷能力影响不大,与脾虚模型组相比并无显著性差异(P>0.05)。结论:补中益气汤及"益气升阳"配伍能有效改善脾虚小鼠的相关药理指标,但拆分使用作用弱于全方。

乌头汤及其配伍对AA大鼠血清IL-1β、TNF-α的影响

目的:探讨乌头汤及其各配伍组对佐剂性关节炎大鼠血清中IL-1β、TNF-α含量的影响。方法:用完全弗氏佐剂诱导大鼠关节炎模型,并用乌头汤及其不同配伍的各组药物进行干预,采用放射免疫法测定大鼠血清中IL-1β、TNF-α的含量。结果:与正常组相比,模型组大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-浕的水平明显升高;与模型组相比,经过乌头汤及其配伍各组、MTX组治疗干预后,大鼠血清中IL-1β、TNF-浕的水平明显下降;上述作用以乌头汤为强,各个配伍组与之相较有明显的差异。结论:乌头汤及其配伍各组对佐剂性关节炎大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-浕有抑制作用。

黄芪桂枝五物汤及其配伍对佐剂性关节炎大鼠的抗炎、抗氧化作用研究

目的:探讨黄芪桂枝五物汤和方中不同药对对佐剂性关节炎大鼠的影响。方法:将黄芪桂枝五物汤按药对研究法拆方分组,观察全方及方中不同药对对佐剂性关节炎大鼠原发性、继发性关节炎的预防治疗作用,以及对红细胞超氧化物歧化酶(SOD)、全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、血浆丙二醛(MDA)、血清一氧化氮(NO)含量的影响。结果:全方及方中各药对均能显著抑制关节炎大鼠的原发性关节炎、继发性关节炎,使佐剂性关节炎(AA)大鼠过高的MDA、NO降低,使已降低的SOD、GSH-PX升高。结论:黄芪桂枝五物汤对大鼠佐剂性关节炎有治疗作用,此作用可能与其降低制脂质过氧化,恢复抗氧化酶活性,抑制致炎因子NO的合成等有关;全方疗效明显优于任何一组药对配伍,方中其他药均能增强黄芪的作用。

HPLC测定黄芪桂枝五物汤及方中药对的黄芪甲苷含量

目的:测定黄芪桂枝五物汤不同配伍情况下黄芪甲苷的溶出量。方法:采用高效液相色谱法,色谱条件:色谱柱:Hypersil ODSC18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:甲醇-水(20∶80)为流动相;检测波长:201nm;流速:1.0mL/min。结果:不同配伍组黄芪甲苷的溶出量也不同,全方组为0.079%,黄桂组、黄姜组、黄白组、黄枣组、黄芪组分别为0.079、0.069、0.061、0.055、0.062%。结论:方中不同药味与黄芪配伍后,对黄芪甲苷的煎出量有不同程度的影响。

虎金颗粒对免疫性肝纤维化大鼠肝功能和肝纤指标的影响

[目的]探讨虎金颗粒对免疫性肝纤维化模型大鼠肝功能和血清中肝纤指标的变化的影响。[方法]用猪血清腹腔注射诱导免疫性肝纤维化模型,并用不同剂量的虎金颗粒进行干预,用全自动生化分析仪测定肝功能,用放射免疫分析法测定血清肝纤指标。[结果]猪血清诱导的肝纤维化大鼠血清中AST、ALT、HA、LN、IV-C和PCⅢ含量均明显升高,虎金颗粒对上述指标有一定的逆转作用,并能升高血清中白蛋白含量。[结论]虎金颗粒对免疫性肝纤维化有一定的防治作用,能降低肝纤维化程度,同时有效减轻肝细胞损伤,改善肝功能。

白虎追风丸对佐剂性关节炎大鼠血液中氧自由基的影响

目的:探讨白虎追风丸对佐剂性关节炎(AA)大鼠的治疗作用及其作用机理。方法:随机对照观察白虎追风丸组、对照组大鼠关节肿胀情况及血液中脂质过氧化物(LPO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量和活性。结果:白虎追风丸不仅抑制足跖肿胀,而且降低AA大鼠过高的LPO水平,同时还使其过低SOD和GSH-PX活性增高或恢复正常。结论:白虎追风丸对AA大鼠有抗炎和抗氧化作用。

补中益气汤不同黄芪药量对脾气虚大鼠糖代谢酶的影响

目的:研究补中益气汤不同黄芪药量对脾气虚证大鼠糖代谢相关酶的影响。方法:采用"五味偏食+游泳力竭+控制饮食"多因素法建立脾气虚证大鼠模型,并随机分为补中益气汤组、2倍黄芪组、1/2倍黄芪组和脾气虚模型组,分别给予相应的药物治疗。观察各组大鼠生物学体征变化,比较各组大鼠肝组织GK酶及血清LDH、SDH和IDH酶活性差异。结果:与模型组比较,补中益气汤组大鼠血清LDH水平有所提高(P<0.05),肝组织GK活力有所降低(P<0.05),2倍黄芪组在LDH、GK活力方面亦有所改善,但没有补中益气汤明显,而1/2倍黄芪组则变化不大(P>0.05);各组大鼠血清SDH和IDH活性无统计学差异(P>0.05)。结论:补中益气汤能有效改善脾气虚证的无氧化代谢状况并调节机体葡萄糖水平。

白虎追风丸对大鼠佐剂性关节炎滑膜细胞分泌IL-1β的影响

目的 :研究白虎追风丸对佐剂性关节炎 (AA)大鼠滑膜细胞分泌白细胞介素 1 β(IL 1β)的影响。 方法 :采用消化分离的方法获得滑膜细胞 ,采用放射免疫分析法检测原代大鼠滑膜细胞培养上清液中IL 1β的水平。 结果 :白虎追风丸可以明显下降AA大鼠滑膜细胞分泌IL 1β的水平。 结论 :提示白虑追风丸是通过下调IL

白虎追风丸对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞分泌TNF-α的影响

目的 :研究白虎追风丸对佐剂性关节炎 (AA)大鼠滑膜细胞分泌肿瘤坏死因子 α(TNF α)的影响。方法 :采用消化分离的方法获得滑膜细胞 ,放免法检测原代大鼠滑膜细胞培养上清液中TNF α的水平。结果 :白虎追风丸可明显下调AA大鼠滑膜细胞分泌TNF α的水平。

白虎追风胶囊的抗炎作用机理

为揭示白虎追风胶囊的抗炎作用机理 ,研究了白虎追风胶囊对佐剂性关节炎 (AA)大鼠滑膜白细胞介素 - 1(IL - 1)、肿瘤坏死因子α (TNF -α)和前列腺素E2 (PGE2 )的影响 ,以及对AA大鼠血液中氧自由基和NO的影响。结果显示 :白虎追风胶囊能下调AA大鼠滑膜过度分泌的IL - 1、TNF -α和PGE2 ;能降低AA大鼠过高的LPO和NO水平 ,使过低的SOD和GSH -Px增高。提示白虎追风胶囊的作用机制可能与其抑制滑膜分泌细胞因子和炎症介质 ,以及抗氧化作用有关。

补中益气汤及其配伍对脾虚大鼠胃黏膜保护作用机制研究

目的研究补中益气汤及配伍对脾虚大鼠胃粘膜TFF1蛋白表达的影响,探讨其对胃黏膜保护相关作用机制。方法以大黄法、游泳力竭法、饥饿法三因素复合的方法复制脾虚大鼠模型,造模成功后,将SD大鼠随机分成正常对照组、脾虚模型组、补中益气汤组、"黄芪-升麻、柴胡"配伍组和原方去"黄芪-升麻、柴胡"配伍组;运用HE染色观察胃粘膜组织病理形态变化,免疫组化法检测TFF1蛋白表达的变化,分析胃黏膜组织结构的变化。结果与脾虚模型组相比,补中益气汤组能有效改善脾虚大鼠TFF1的表达(P<0.01)和保护胃黏膜,而"黄芪-升麻、柴胡"配伍组和原方去"黄芪-升麻、柴胡"配伍组对其影响不大(P>0.05)。结论补中益气汤能显著改善TFF1的表达,改善脾虚证胃粘膜组织的病理变化,可能通过改善TFF1的表达来修复胃黏膜从而改善脾虚,"黄芪-升麻、柴胡"是方中不可或缺的重要组成部分。

补中益气汤的现代研究进展

补中益气汤由金元时期著名医家李东垣创立,首载于《内外伤辨惑论》,由李氏根据《内经》中＂损者益之＂之旨而制定,全方由黄芪、炙甘草、人参、当归、橘皮、升麻、柴胡、白术组成。该方是李东垣研究脾胃学说的代表之作,体现了治劳倦内伤之法,也是补中益气法、甘温除热法、益气升阳法的代表方。

非线性回归分析不同剂量配伍对乌头汤中主要化学成分的影响

目的探讨不同剂量配伍对乌头汤中主要化学成分次乌头碱、(伪)麻黄碱、芍药苷、甘草次酸煎出率的影响,以揭示不同剂量配伍导致乌头汤化学成分变化的内涵。方法采用均匀设计法设计实验,以高效液相色谱法测定不同剂量配伍乌头汤中主要化学成分次乌头碱、(伪)麻黄碱、芍药苷、甘草次酸的含量,计算煎出率,对实验数据进行非线性逐步回归,建立数学模型,根据数学模型对实验结果进行分析,最后以各主要化学成分的煎出率为优化指标,进行优化运算,求出乌头汤各药物的最优化剂量组合。结果复方中各药物间存在交互作用,各药物及药物间的交互作用对所考察的化学成分的煎出率有一定的影响,其中制川乌与炙甘草间的交互作用对次乌头碱和甘草酸的煎出存在较大的影响。根据各指标的检测结果,优化的乌头汤不同剂量组合并不一致。结论非线性回归建模分析能够获得较丰富的配伍内涵信息,适合于方剂的配伍内涵研究;应结合不同剂量配伍的药理效应结果进行优化剂量组合。