医学实验动物屏障环境内独立通气笼具的安放

目的探讨屏障系统内安放独立通气笼盒(Individually Ventilated Cages,IVC)双保险模式饲养实验啮齿类动物,力求动物饲养、实验的全过程达到SPF级;降低动物实验室硬件建造费和维持费(节能)。方法通过改建一间屏障环境动物实验室,对空气洁净度等相关项目数据按GB14925-2001方法检定,并在该实验室内安放SPC级IVC饲养动物;在超净工作台内做打针投药等动物实验。结果改建的屏障环境动物实验室和IVC,各项检测数据均达到新国标要求。结论医学实验动物屏障环境内安放IVC饲养啮齿类动物、做动物实验,这种双保险模式能全过程达到SPF级要求;饲养、实验人员操作较简便,节能。

IVC应用研究初报

通过IVC系统安装、相关数据测定、小鼠生长及生存试验,观察了IVC系统饲养实验动物的安全性、可行性。结果表明IVC系统饲养实验动物,符合新国标SPF级相关标准,动物生存、生长情况正常。提示IVC系统是动物饲养理想设备,用于动物实验是可行的,而且投入及维持费用比较低。

应用反向间接血凝抑制试验诊断猪囊虫病的研究

近年来,国内外学者对猪囊虫病的免疫学诊断方法作了大量的研究,有些方法已在国内外一定范围内推广应用。但因囊虫抗原成分复杂,这些诊断方法均存在不同程度的假阳性反应,假阳性率约为1～10%。有些方法在现场应用时发现假阳性率更高。为了减少假阳性反应,许多学者对囊虫抗原进行分离纯化,其主要技术途径包括凝胶过滤、亲和层析等电聚焦和离子交换技术等等。囊虫粗抗原经分离纯化后,其特异性明显提高。

浅谈医学实验动物与环境污染控制

医学实验动物虽然是经人工饲养、繁育、对其携带微生物及寄生虫、遗传背景明确应用医学科学研究、教学、生产和检验的动物,但是,我们考察动物和医学实验动物在人类传染病流行中的作用时候,不但要看到一般情况下的有害生物,还要看到特定情况下的“条件有害生物”,而成为“条件有害生物”的可能性对所有那些平时不是有害生物的动物种类来说都是普遍存在的,且一般是无法预测的。医学实验动物尽管不同于一般动物,但实验动物饲养与动物实验过程对外界环境的污染是肯定的。这个污染主要有三个方面,一是实验动物与人类传染病相互污染;二是做动物试验污染、实验动物与实验动物、野生动物与实验动物间相互的污染;三是实验动物对饲养室内外环境的废气污染。如何控制好这三个方面的污染,有很多问题值得进一步探讨研究。

反向间接血凝抑制试验诊断囊虫病

因囊虫抗原成分复杂,囊虫病的免疫诊断现仍未解决特异性问题。为了建立人体囊虫病特异诊断方法,我们以抗囊虫单克隆抗体(McAb),应用反向间接血凝抑制试验对囊虫病血清进行了诊断研究。一、材料与方法(一)囊虫抗原自囊虫病猪肉摘取囊虫,剪碎后研成糊状,加适量 pH7.4 PBS 置4℃浸提72h,每日振摇数次,3000r/min 离心30min,收集上清为抗原。(二)兔抗囊虫免疫血清用制备的抗原与福氏佐剂按常规程序免疫家兔制备。

光照对小鼠生长影响的初步观察

取２４只昆明小鼠、分成３个组，进行不同光照试验，定期对小鼠称体重，解剖后称心、肝、脾、肺、肾重量，结果表明：无光照组小鼠精神欠佳、生长速度缓慢。体重减轻，和其他两组比较差异显著（Ｐ＜０．０５）。解剖后各脏器重量均不同程度减轻。

东亚钳蝎“神龙1号”选育初步研究

利用杂交优势 ,选育出新品种东亚钳蝎“神龙 1号” ,具有生长周期短、体大、产仔率高、产毒量高、生命力强、易饲养管理等特点。

水貂病毒性肠炎细胞培养灭活苗的研制

目前用于预防水貂病毒性肠炎的疫苗有脏器组织灭活苗和细胞培养灭活苗两种,前者因有传播阿留申病的危险已基本淘汰。细胞培养灭活苗安全、可靠,国内已有不少地区应用,但其生产的技术环节未作报道。为了进行生产技术开发,我们对生产水貂病毒性肠炎细胞培养灭活疫苗的各个技术环节作了研究。现报告如下。

传染性法氏囊病病毒的生态学与流行病学研究

血清学调查结果表明，麻雀、鸭、鹅等均可自然感染传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），其血清阳性率分别为７．４％（４／５４），９５．５％（３６３／３８０）和９．４％（１１／１１７）。从鸭和麻雀分离到的ＩＢＤＶ可适应于鸡胚和鸡胚成纤维细胞，并产生ＣＰＥ，对ＳＰＦ鸡有致病性。病毒核酸和结构蛋白的电泳分析结果表明，鸡源、鸭源和麻雀源ＩＢＤＶ均有２条核酸带，５条蛋白带，毒株间的病毒核酸及结构蛋白电泳迁移率无显著差异，但其结构蛋白的相对含量不尽一致。经鉴定，鸡源、鸭源和麻雀源ＩＢＤＶ均属血清Ⅰ型，为同源病毒。本研究结果提示，鸡并非是ＩＢＤＶ的唯一自然动物宿主，非鸡禽鸟类宿主的存在可引起ＩＢＤ的传播和续源流行，也为ＩＢＤＶ的变异提供了特殊的生态条件，成为诱导ＩＢＤＶ变异的另一重要因素。

全反式维甲酸对卵巢上皮性癌荷瘤鼠干预后肿瘤细胞的超微结构变化

探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对裸鼠卵巢上皮性癌细胞(CAOV3)荷瘤动物模型干预后肿瘤细胞超微结构的变化及意义。每只荷瘤裸鼠经胃管针给药ATRA剂量为2mg/kg 2d×4周,取新鲜肿瘤组织进行电镜制样观察。结果显示CAOV3荷瘤裸鼠经ATRA干预后,肿瘤细胞出现细胞表面微绒毛明显增多,细胞间常见桥粒和紧密连接,胞浆内粗面内质网、线粒体和糖原颗粒增加,还有发育良好的高尔基体,细胞核异染色质增加,常染色质减少,偶见被吞噬的凋亡细胞。上述超微结构变化提示ATRA可诱导和促进CAOV3细胞分化,抑制肿瘤生长。

弓形虫感染致大鼠雄性生殖损害及其调控机理的研究

目的研究弓形虫感染对大鼠的雄性生殖损害,探讨其可能的调控机理。方法以2×105/ml速殖子腹腔接种成年雄性SD清洁级大鼠,感染9周,进行大鼠血清性激素、精子数、精子活率、活力、精子质量、睾丸酶活性及睾丸组织的病理学检测。并应用流式细胞仪检测其睾丸组织细胞的凋亡及细胞周期。同时将弓形虫感染雄性组与正常成年雌性SD清洁级大鼠按1∶2合笼交配1周,于妊娠第21天解剖雌性大鼠,检查雌鼠的黄体数、胎鼠的性别、体重、身长和尾长。结果弓形虫感染9周,大鼠的睾丸和附睾的相对重量有所下降,精子数、活力、活率降低,血清性激素水平也降低,睾丸组织也有明显的形态学变化,睾丸组织细胞凋亡率显著高于正常对照组。与弓形虫感染雄性大鼠成功交配的雌性大鼠产仔数显著减少,但胎鼠的平均体重、身长、尾长和胎鼠的性别比例与对照组比较无显著性差异。结论弓形虫感染可诱导大鼠睾丸组织细胞发生凋亡,弓形虫感染对大鼠雄性生殖系统有一定程度的损害,对雄性生育功能也有一定影晌,其进一步的损伤及调控机理尚待更深入的研究。

对不同的卵巢上皮性腺癌细胞株建立裸鼠动物模型的实验研究

目的 :探讨卵巢上皮性腺癌细胞株建立裸鼠动物模型的最佳方案。 方法 :采用两种卵巢上皮性腺癌细胞株CAOV3(贴壁细胞 )、COC2 (悬浮细胞 )对裸鼠进行不同细胞密度皮下接种及不同方法的组织块接种。 结果 :在 5× 10 6/ (0 .2 0ml·只 )到 6× 10 7/ (0 .2 0ml·只 )细胞浓度内 ,两株细胞的成瘤率及肿瘤成形时间与接种细胞量无关。与COC2细胞株相比 ,CAOV3成瘤早 (以组织块接种者为甚 ) ,成瘤率高 ,成瘤后生长缓慢。而COC2细胞株一旦成瘤 ,则肿瘤生长速度极快 ,以至于实验尚未完成荷瘤鼠已死亡。 结论 :在建立卵巢上皮性腺癌裸鼠动物模型的实验中 ,以选用贴壁细胞株。

阿奇霉素对弓形虫病大鼠睾丸组织细胞凋亡影响的实验研究

目的 检测阿奇霉素对弓形虫病大鼠睾丸组织细胞凋亡的影响。方法 腹腔注射 2× 10 5/ml活的纯化弓形虫速殖子悬液 (CF- 11纤维素纯化 ) 2 m l于 SD大鼠 ,建立大鼠弓形虫病模型 ,用阿奇霉素 2 0 0 mg/ (kg.d)连喂 7d,治疗实验大鼠。 9周后解剖大鼠 ,取睾丸制成睾丸组织单细胞悬液 ,应用流式细胞仪检测其细胞凋亡。同时设有感染组和正常大鼠对照组。结果 感染组和治疗组大鼠睾丸组织细胞凋亡率显著高于正常对照组大鼠睾丸组织细胞凋亡率 (P<0 .0 5 )。治疗组大鼠睾丸组织细胞凋亡率明显低于感染组 (P<0 .0 5 )。结论 弓形虫感染可引起大鼠睾丸组织细胞发生凋亡。但阿奇霉素则可有效地抑制弓形虫感染大鼠睾丸组织细胞发生凋亡 ,可有效地治疗弓形虫感染对大鼠的雄性生殖损害。

传染性法氏囊病病毒检测系统的建立

为了建立传染性法氏囊病病毒(IBDV)检测系统,本试验在同一个试验技术平台上对9种IBDV检测方法进行了比较分析。IBDV野毒株盲传4~5代可适应于鸡胚和鸡胚成纤维细胞,死亡胚体水肿、出血,病变细胞圆缩、脱落。4个血清Ⅰ型IBDV毒株,用交叉中和试验可进一步分为3个血清亚型。用RT-PCR/SSCP技术分析4个毒株,扩增产物的电泳迁移率有差异。AGP、间接ELISA、夹心抑制ELISA以及中和试验等4种方法同时检测不同来源血清样品中的IBDV抗体,其他3种方法比AGP具有更高的敏感性,敏感度相差104倍。用AGP检测法氏囊组织样品,抗原效价可达到1∶10,而细胞培养物和病鸡粪便则没有出现沉淀线;3种样品用夹心ELISA、RT-PCR、cDNA探针斑点杂交、RT-PCR/SSCP检测以及病毒分离等5种方法检测,均为阳性。

全反式维甲酸及胆酸钠对卵巢上皮性癌荷瘤裸鼠干预的实验研究

目的 探讨全反式维甲酸及胆酸钠对裸鼠卵巢上皮性癌动物模型干预后的正、副作用。方法 以CAOV3细胞株皮下接种BALB/C裸鼠 ,分组后分别给予不同的全反式维甲酸及胆酸钠方案用灌胃针给药进行干预 ,统一处死后留取裸鼠血、肿瘤及各重要脏器组织进行光镜、电镜及免疫组织化学检查 ,并于给药期间观察裸鼠体重及瘤体变化。结果 接种肿瘤细胞后早期行全反式维甲酸及胆酸钠干预 ,裸鼠最终肿瘤成瘤率低 ,即使成瘤需时也延长 ,肿瘤生长速度明显减慢 ;接种肿瘤细胞待成瘤后给予裸鼠行全反式维甲酸及胆酸钠干预 ,两组药物也有抑制肿瘤生长、诱导肿瘤细胞分化作用 ,而对裸鼠血相无明显抑制作用 ,对重要脏器未见明显形态学改变。结论 全反式维甲酸及胆酸钠经灌胃针用药后对荷瘤裸鼠的肿瘤确有抑制作用 ,并以早期用药为佳 。

鸡、鸭体内传染性法氏囊病病毒的分离及理化性质比较

从疑似传染性法氏囊病（ＩＢＤ）病鸡及同群饲养的鸭体内各分离到１株病毒，用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ试验证明两病毒均为ＩＢＤＶ，病毒血清型为Ⅰ型。病毒可致死鸡胚，适应于鸡胚成纤维细胞并产生细胞病变（ＣＰＥ）。理化性质比较表明，两病毒为同源ＩＢＤＶ。研究表明，鸭可成为ＩＢＤＶ的携带者或传染源。

全反式维甲酸对人卵巢癌细胞糖原代谢影响的实验研究

目的 探讨全反式维甲酸干预后卵巢癌细胞株(体外)及裸鼠卵巢上皮性癌动物模型(体内)肿瘤细胞内糖原的变化及 意义。方法 以不同浓度及作用时间的全反式维甲酸对COC2细胞株进行体外干预后,测定细胞质糖原、乳酸脱氢酶含量,并行光 镜、电镜观察;以每只2mg/(kg·d)×4周剂量的全反式维甲酸对CAOV3细胞株荷瘤裸鼠经胃管针给药干预,收集肿瘤标本进行光 镜、电镜、组织化学及免疫组织化学检查。结果 COC2经5μmol/L及10μmol/L全反式维甲酸作用后细胞内糖原含量增加、乳酸脱 氢酶含量下降且均与时间呈正比,在30μmol/L全反式维甲酸作用后细胞则以凋亡为主;CAOV3荷瘤裸鼠经全反式维甲酸干预后,裸 鼠肿瘤细胞同样出现细胞内糖原增加的改变。结论 全反式维甲酸直接用于COC2细胞或经消化道给药间接作用于CAOV3荷瘤 裸鼠肿瘤后,均出现细胞内糖原含量增加、乳酸脱氢酶下降的改变,减缓了肿瘤细胞内的能量代谢,从而起到抑制肿瘤生长的作用。

应用酶联免疫吸附试验检测猪囊虫病的研究

在猪囊虫病的研究中发现在病、健猪血清中除存在着某些抗原性相同的成分引起交叉反应外,在病猪血清中还含有一种特异循环抗原成分。为了弄清囊虫病猪对此循环抗原的免疫应答状况。

应用酶联免疫吸附试验检测猪囊虫病特异抗体的研究

用猪囊虫粗抗原、B 抗原、等电聚焦技术分离的抗原组份和特异单克隆抗体亲和层析抗原,以ELSA间接法检测猪囊虫病血清抗体,结果特异性均不理想。应用单克隆抗体分析查明,在某些囊虫抗原分子上既有特异性抗原位点,又有非特异性位点。用特异单克隆抗体以ELISA抑制法检测猪囊虫病血清抗体,结果完全消除了假阳性反应,病猪血清检出率为86.41％(89/103)。