糖粉中(淀粉类)抗结剂的鉴定研究

糖粉由白砂糖粉碎加工而成,在糕点等烘焙食品中有广泛的应用,但糖粉颗粒细小,易吸潮结块。本文通过测定糖粉产品的蔗糖、还原糖含量和浊度、电导率等理化指标,观测其水溶及其碘色反应特性,分离富集抗结剂试样,进行热重曲线、显微观测、红外光谱、X-射线荧光光谱和X-射线衍射等多种仪器的比较分析,开展糖粉中的抗结剂的结构及其成分的定性研究,综合结果发现所添加的抗结剂为玉米原淀粉,建立了一套适用于糖粉中抗结剂的定性检测的体系方法。

辅酶Q10抑制过氧化氢诱导的血小板线粒体功能紊乱

【目的】探究辅酶Q_(10)(CoQ_(10))对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的血小板线粒体功能紊乱的影响并探讨相关机制。【方法】采集健康志愿者外周静脉血,制备纯化血小板悬液。用100μmol/L CoQ_(10)与纯化血小板在体外共孵育50min,再与1 mmol/L H_(2)O_(2)孵育30 min后(实验重复3次以上),用流式细胞术测定线粒体膜电位、磷脂酰丝氨酸(PS)外翻阳性率、线粒体活性氧簇(mtROS)水平,用酶标仪测定总ROS和ATP浓度,用Western Blot检测血小板p53蛋白磷酸化水平和Bcl-2家族蛋白水平。【结果】在静息血小板中,CoQ_(10)对线粒体功能无影响(线粒体膜电位、PS外翻阳性率、胞内ROS、mtROS、ATP水平,P>0.05)。在氧化应激模型中,H_(2)O_(2)使血小板线粒体膜电位下降、PS外翻增加,而CoQ_(10)可以显著逆转H_(2)O_(2)诱导的血小板线粒体膜电位下降[(35.76%±3.94)%vs.(21.04%±1.69)%,P<0.05],但对PS外翻无抑制作用(P>0.05)。进一步的机制研究发现,CoQ_(10)可以直接抑制H_(2)O_(2)诱导的胞内ROS、mtROS生成(P<0.05),降低p53磷酸化水平、升高Bcl-2和Bcl-xL表达水平(P<0.05)且不改变ATP含量(P>0.05)。【结论】CoQ_(10)抑制H_(2)O_(2)诱导的血小板线粒体功能紊乱,并且抑制p53磷酸化及升高Bcl-2家族抗凋亡蛋白表达。

糖粉产品中淀粉抗结剂的含量测定

国家食品标准中测定淀粉的方法主要是酶水解法和酸水解法,都不适于测定糖粉中作为抗结剂使用的淀粉含量。本文采用碘显色可见分光光度法测定糖粉中抗结剂含量,将糖粉直接溶解、加热糊化、碘液显色,采用标准曲线法,基于在590 nm波长处的吸光度测定计算出抗结剂的含量。由于糖粉抗结剂淀粉和用来制作标准曲线的淀粉标样是不同来源的玉米淀粉,分子结构有所差别,其碘复合物的吸收光谱虽形状变化相同,但存在差异。本文利用它们的淀粉-碘复合物的最大吸光值之比值作为校正系数,解决待测样品与标准品的玉米淀粉不同所产生的系统偏差,测得样品抗结剂含量为3.96%。

水溶性番茄浓缩物经自噬途径调控血小板的氧化损伤

【目的】过度氧化应激可促进血小板氧化损伤,从而加快心血管疾病的发生发展。水溶性番茄浓缩物(Fruitflow)具有抑制血小板聚集、活化的作用,但是否通过自噬减轻血小板氧化损伤仍未见报道。本研究拟通过体外实验探讨Fruitflow对过氧化氢(H_(2)O_(2))导致的血小板氧化损伤的影响及其潜在机制。【方法】用不同剂量的Fruitflow(0、20、40、80 mg/L)与纯化血小板预孵育30 min,随后加入H_(2)O_(2)共孵育60 min。用流式细胞术测定线粒体膜电位(ΔΨm)去极化的水平;用酶标仪测定活性氧(ROS)生成水平;用Western blot测定p53、phospho-p53、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62的表达水平。【结果】Fruitflow显著减轻H_(2)O_(2)导致的血小板ΔΨm去极化(P<0.05),ROS生成和p53磷酸化(P<0.05)。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)可以显著逆转Fruitflow对H_(2)O_(2)处理血小板ROS生成的抑制作用(P<0.05)。Fruitflow可以降低静息血小板p62的表达、升高LC3Ⅱ/Ⅰ的比例(P<0.05),也显著升高H_(2)O_(2)处理的血小板LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平(P<0.05)。此外,3-MA显著逆转Fruitflow降低H_(2)O_(2)处理的血小板ΔΨm去极化的作用(P<0.05)。【结论】Fruitflow可在体外通过促进血小板自噬,显著减轻H_(2)O_(2)导致的血小板氧化损伤。

辅酶Q10通过调控糖蛋白Ⅵ信号通路抑制血小板聚集和活化

目的 血小板过度活化在血栓以及动脉粥样硬化(AS)的发生发展中发挥重要的作用,糖蛋白Ⅵ(GPⅥ)是血小板表面重要的受体,在血管损伤处通过与胶原结合介导血小板活化参与血栓以及AS的形成。辅酶Q10(CoQ10)作为膳食补充剂通过抗炎、抗氧化等发挥预防心血管疾病的功能,尤其是抗AS作用。但是CoQ10是否影响血小板功能尚未见报道,因此本研究通过体外实验探讨CoQ10对血小板活化的影响及其对GPⅥ信号通路调控作用。方法 用不同浓度CoQ10(0、1、10、100μmol/L)与健康人纯化血小板在体外共同孵育50 min,采用血小板聚集仪测定胶原诱导的血小板聚集率;用流式细胞术测定血小板表面CD62P、CD63、αⅡbβ3的活化和纤维蛋白原结合率(Fibrinogen binding);用West-ern blot检测胶原诱导的血小板GPⅥ信号通路相关蛋白磷酸化水平。结果 CoQ10可以显著降低胶原诱导的血小板聚集率,抑制血小板表面CD62P和CD63的表达,并能显著抑制αⅡbβ3的活化以及降低Fibrinogen binding百分率。CoQ10下调胶原诱导的GPⅥ信号通路中Syk、LAT、SLP76、PLCγ2以及PKC的磷酸化水平。结论 CoQ10抑制胶原诱导的血小板活化可能是通过下调GPⅥ信号通路来实现。