北京某绿地蚊媒病毒的分离和鉴定

为了解北京某绿地蚊媒病毒的分布情况,本试验使用诱蚊灯捕蚊采集到蚊虫标本19000余只,利用蚊子细胞C6/36培养进行病毒分离,利用高通量测序和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)鉴定分离株;RT-PCR测定分离株病毒的序列,并与国内外相应病毒序列进行比对分析。结果显示,样本经病毒分离获得2株可引起明显细胞病变的分离株,分别命名为BJ2021/01和BJ2021/02。高通量测序和RT-PCR检测结果显示,BJ2021/01分离株含有版纳病毒(BAV)、忍者病毒(SHTV)、沙捞越病毒(SWKV)和库蚊源类芜菁黄花叶病毒科病毒(CuTLV),为4种病毒的混合物;BJ2021/02为BAV。基因序列分析结果显示,BAV分离株BJ2021/02的12个片段与国内外BAV分离株的核苷酸同源性为58.1%~98.7%,编码氨基酸的同源性为54.4%~98.9%。系统进化分析结果显示,BJ2021/02分离株属基因A型。本试验结果丰富了我国BAV的基因组序列,为开展北京市BAV的流行病学研究提供了参考,为虫媒病毒病的预防和控制提供了病原学依据。

2株公园湖水源非O1/O139群霍乱弧菌的分离鉴定和致病性分析

近年来,非O1/O139群霍乱弧菌(NOVC)引起人和动物感染时有报道。本试验于2021年3月—2022年4月连续采集圆明园遗址公园湖水样本进行细菌分离培养,经16S rRNA序列分析和溶血性检测对分离株进行鉴定,并通过细胞毒性试验和小鼠感染试验对分离株的致病性进行检测;采用PCR方法对分离株的毒力相关基因ctxA、ctxB、tcpA、hlyA、rtxA、rtxC和chxA进行检测;通过系统发育进化分析对分离株的chxA基因全长进行分析;通过药敏试验对分离株的药物敏感性进行检测。结果显示,共分离鉴定出2株NOVC,NOVC分离株在血琼脂培养基上生长呈现明显的溶血现象;经过滤除菌的细菌培养液上清有溶细胞作用,对体外培养的Vero细胞具有极强的毒性作用,可引起细胞萎缩和脱落;分离株培养物和培养液上清经腹腔注射均可致死小鼠,对小鼠的半数致死量(LD_(50))为10^(7.23)CFU。PCR检测结果显示,分离株hlyA、rtxA、rtxC和chxA基因呈阳性,提示细菌的致病性可能与毒力因子的表达相关。对chxA基因的全长分析结果显示,2株分离株均可编码II型ChxA毒素,其催化域与I型毒素高度同源,但在相应区域缺失1段5个氨基酸片段(^(619)AIAKE^(623))。药敏试验结果显示,2株分离株均对环丙沙星、恩诺沙星和阿米卡星敏感,均对复方新诺明耐药。结果表明,公园水源性NOVC分离株携带多种毒力相关基因,产生溶血素等溶细胞毒素,可致死小鼠,对抗菌药呈多重耐药,对水生动物和环境的公共卫生具有潜在的威胁。

热应激条件下荷斯坦牛血糖浓度特征及影响因素分析

为探究热应激条件下奶牛血糖浓度特征及其影响因素,本研究于2019年7月-2019年8月测定了北京地区2个规模化牧场的431头奶牛的血糖浓度,并收集了试验牛的生产性能测定记录,利用SAS 9.2软件的GLM过程分别分析环境温湿度指数、泌乳阶段、血液类型、胎次、妊娠状态及蹄病情况等因素对奶牛全血血糖和血浆血糖浓度的影响。结果表明,北京地区7-8月奶牛全血血糖和血浆血糖浓度分别为(3.78±0.33)mmol/L和(3.99±0.37)mmol/L;温湿度指数仅对全血血糖浓度有显著影响(P<0.05),泌乳阶段仅对血浆血糖浓度有显著影响(P<0.05),胎次和妊娠状态对两种血糖浓度均有显著影响(P<0.05),而瘤胃充盈度、血液类型、挤奶情况和蹄病情况等因素对两种血糖浓度均无显著影响;综上,奶牛血糖浓度对包括温湿度指数等在内的环境因素及生理因素的变化较为敏感,本研究可为牧场利用血糖浓度在一定条件下反映奶牛的热应激状况和提升牧场管理水平提供依据。

中国荷斯坦牛步态评分及其对生产性能和血常规指标的影响

为探究荷斯坦牛步态评分(locomotion score,LS)影响因素及其对生产性能和血常规指标的影响,本研究收集测定了北京地区2个规模化牧场1486头泌乳牛的体况评分(body condition score,BCS)、LS和DHI(dairy herd improvement)数据,并测定了101头泌乳牛的血常规指标。采用固定模型分析了牧场、胎次和泌乳阶段对LS的影响,以及LS和BCS等因素对日产奶量、体细胞评分、乳成分和血常规指标的影响。结果表明,试验牛的胎次和泌乳阶段均对LS有极显著影响,LS随胎次的升高而增加,从1胎至5胎及以上,LS升高了0.71分;泌乳阶段Ⅲ(100~199 d)、Ⅵ(350 d以后)的LS均显著高于阶段Ⅱ(45~99 d)(P<0.05),且均高于2分。LS对日产奶量、乳成分和体细胞评分均无显著影响(P>0.05),但LS≥4分的奶牛日产奶量最低,较LS=1分的奶牛日产奶量降低了2.29 kg。各项血常规指标中,LS对奶牛红细胞数、血红蛋白含量、红细胞平均血红蛋白浓度、淋巴细胞数均有显著影响(P<0.05),而对白细胞数无显著影响(P>0.05)。随LS升高,奶牛红细胞数、淋巴细胞数、血红蛋白含量和红细胞平均血红蛋白浓度均表现出不同程度的降低。LS较差的奶牛,其机体的免疫力和造血功能会受到不同程度的影响。在规模化牧场中,定期评估牛群的LS能及时发现牛群肢蹄管理的问题,对减少因肢蹄问题引起的生产性能损失和过早淘汰等具有重要意义。

荷斯坦母牛血钾浓度的影响因素分析

【目的】研究奶牛血钾浓度的影响因素。【方法】采用手持血钾仪在夏季和秋季分别测定北京地区222头和67头荷斯坦泌乳牛的血钾浓度,利用固定模型分析环境温湿度指数(Temperature and humidity index,THI)、直肠温度、胎次、泌乳阶段、血液类型和挤奶前后对血钾浓度的影响。【结果】手持血钾仪所测血钾浓度在正常范围内,荷斯坦牛泌乳牛血钾浓度为2.31~5.13 mmol/L;THI>72时的血钾浓度显著(P<0.05)高于THI<72时的血钾浓度;不同THI条件下,直肠温度对血钾浓度的影响程度不同,THI为55~60和77~78时,直肠温度每升高1℃血钾浓度分别上升0.7和0.32 mmol/L,THI为72~76和79~88时直肠温度与血钾浓度无回归关系(P>0.05);静脉血钾浓度(4.01±0.05)mmol/L极显著(P<0.01)高于动脉血钾浓度(3.81±0.05)mmol/L;奶牛挤奶后血钾浓度(4.06±0.05)mmol/L极显著(P<0.01)高于挤奶前血钾浓度(3.76±0.04)mmol/L;胎次和泌乳阶段对血钾浓度无显著(P>0.05)影响,但随着泌乳天数的增加血钾浓度有逐渐降低的趋势。【结论】手持血钾仪可以快速、准确地测定奶牛的血钾浓度;THI对血钾浓度有显著影响,THI的升高会引起血钾浓度的变化;挤奶和血液类型对血钾浓度有较大影响,研究血钾浓度时应注意排除这两项因素的影响,血钾浓度可作为判断奶牛健康状态的指标。

荷斯坦牛两类性情评定方法分析及其对日产奶量与体细胞评分的影响

为探究奶牛性情的影响因素及其对日产奶量和体细胞评分的影响,于2019年7月—8月对北京地区2个牛场1100头泌乳牛进行了挤奶性情评分和主观性情评分的收集,并通过Logistic回归模型分析奶牛各性情评分的影响因素,利用GLM过程分析各性情评分对日产奶量和体细胞评分的影响,此外,通过计算秩相关系数检验不同性情评分之间的相关性。结果表明:踏步速率评分与踢腿速率评分之间存在极显著相关(P<0.01),但其相关系数较小(r=0.2087),主观性情评分与2种挤奶性情评分均无显著相关(P>0.05);2个牛场之间的性情评分分布存在差异;不同性情评分方法的影响因素各不相同:对于踏步速率评分,3胎以上荷斯坦牛性情较温顺;对于踢腿速率评分,泌乳天数为306~500d的荷斯坦牛性情较暴躁;对于主观性情评分,随着泌乳阶段的增加,荷斯坦牛的性情更加温顺;踢腿速率评分对日产奶量具有极显著影响(P<0.01),且踢腿速率评分为2分的荷斯坦牛日产奶量最高,即性情适中的奶牛具有更高的日产奶量;2种奶牛性情评分对体细胞评分均无显著影响。综上,奶牛各性情评分间相关性较低,不同性情评分反映了奶牛在不同环境条件下的不同性情表现。奶牛挤奶性情与产奶量相关,因此改进挤奶性情有助于提高牛场生产管理和经济效益。本研究为将性情评分纳入中国奶牛选择指数,早日实现奶牛平衡育种提供了理论基础。