小鼠原始生殖细胞迁移过程中H2A.Z的表达

小鼠原始生殖细胞(PGCs)迁移、增殖、性别分化都受着基因组和DNA表观遗传修饰的调控,H2A.Z与转录激活有关,可能与表观遗传修饰存在联系,通过PGCs单细胞及组织石蜡切片的免疫荧光方法进行研究。结果表明,PGCs在迁移过程中,8.5 dpc时PGCs中不存在H2A.Z;迁移至生殖嵴时H2A.Z主要集中于细胞核,11.5dpc整个PGCs细胞核和细胞质都存在;13.5 dpc雌性的卵母细胞中H2A.Z主要集中于细胞质,而精原细胞中H2A.Z偏向集中于细胞核。综合基因组和DNA表观遗传修饰分析,H2A.Z的表达与其有密不可分的联系。

小鼠原始生殖细胞迁移过程中macroH2A的表达

通过单细胞及组织石蜡切片的免疫荧光方法,探讨了小鼠原始生殖细胞(PGCs)性别分化与macroH2A的关系。结果表明:PGCs在迁移过程中,macroH2A在细胞核中的表达越来越弱,而在细胞质中的表达越来越强;到达生殖嵴性别分化结束后,雄性PGCs中macroH2A在细胞核和细胞质中基本不表达,而在雌性PGCs细胞质中发现mac-roH2A大量表达。据此推断,macroH2A可能与后期的DNA印记快速擦除及性别分化后细胞分裂相关。

H2A.X在不同时期小鼠原始生殖细胞核质区分布

以小鼠为研究对象,研究H2A.X在不同时期原始生殖细胞(PGCs)核质区的分布。结果表明:PGCs在迁移过程中,8.5、10.5、11.5dpc时H2A.X在PGCs细胞核和细胞质中呈弥散分布;13.5dpc时H2A.X在PGCs细胞核和细胞质中均有分布,但雌性小鼠PGCs中H2A.X主要集中于细胞核,而雄性主要集中于细胞质。结果提示H2A.X在PGCs中的表达可能与其性别分化后精原细胞和卵母细胞的细胞周期维持密不可分。

H2A变体在小鼠不同时期雄性生殖细胞核质区的分布

【目的】了解小鼠雄性生殖细胞中macro H2A、H2A.Z和H2A.X 3种组蛋白变体变化与其发育特征间的联系,为揭示原始生殖细胞(PGCs)的发育机理及其分子调控机制奠定基础。【方法】以C57BL/6J小鼠胚胎的中肾和生殖嵴为试验材料,通过免疫荧光染色技术检测11.5dpc、12.5dpc和13.5dpc不同发育时期含有PGCs的组织石蜡切片及单细胞中macro H2A、H2A.X和H2A.Z变体的分布情况。【结果】macro H2A变体在11.5dpc胚胎时主要存在于细胞质中,12.5dpc时在细胞质中的表达增强,但进入生殖嵴后(13.5dpc)表达消失;H2A.X变体在11.5dpc和12.5dpc时存在于PGCs的核质区,13.5dpc时主要存于细胞质,且呈聚集分布;H2A.Z变体在11.5dpc时在PGCs的核质区均有存在,12.5dpc和13.5dpc时主要分布在细胞核,且表达明显增强。【结论】随着PGCs的不断迁移、增殖与分化,macro H2A、H2A.X和H2A.Z 3种组蛋白H2A变体在细胞核质区的分布及表达情况也发生变化,即H2A变体分布特征与PGCs的性别分化及其有丝分裂停止相关。

山楂天麻药膳对小鼠高脂血症的降脂作用研究

为了研究山楂天麻药膳的疗效,将昆明白雄性小鼠进行高脂血症造模,分空白对照组、模型对照组、药膳高浓度组、药膳低浓度组。对试验小鼠进行给药灌胃治疗,每周观察并记录小鼠试验前后状态、体重、饮水量等的变化,并且测定小鼠的血清总胆固醇(TC)含量、甘油三酯(TG)含量、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量、低密度脂蛋白胆固醇LDL-C含量等指标。经过4周的山楂天麻药膳的给药治疗后,药膳高浓度组和药膳低浓度组的TC含量、TG含量、LDL-C含量相对于模型对照组均有明显的下降,而HDL-C含量有所上升。以山楂、天麻、薏苡仁、皮肚等药物为主的纯天然药膳,对于调节高脂血症具有良好的疗效。

血管生长调节因子与卵巢发育的关系

旨在探讨血管内皮生长因子(VEGF-120)、促卵泡激素(FSH)、2-甲氧基雌二醇(2-ME2)、4-羟基雌二醇(4-OHE2)对卵泡生成的影响。通过对比试验,将试验组分别腹腔注射上述4种药品,一段时间后,HE染色统计分析卵巢中不同大小卵泡数量的变化、卵泡周围血管发育情况及定量分析VEGF、FLK-1表达情况。结果表明,VEGF-120组和FSH组大卵泡数增加,血管发育良好,VEGF和FLK-1基因表达增加;2-ME2和4-OHE2组大卵泡数减少,血管发育情况较差。综合分析发现,血管簇发育良好的卵泡生长状态良好,卵泡的生长与血管的发育存在一定关联。

天麻钩藤药膳对高血压鼠的疗效研究

应用天麻钩藤药膳对高血压病鼠进行干预,研究天麻钩藤药膳对肾性高血压病鼠的降压疗效。观察干预前后试验鼠状态、毛发色泽的变化,研究血压、血浆内血管紧张素II (AngII)、内皮素ET-1、NO、动脉组织一氧化氮合酶(eNOS)、尿液中mALB、β_2-MG含量的影响。结果表明,高剂量天麻钩藤药膳提高了试验鼠血清中一氧化氮含量,降低了血管紧张素II (AngII)、内皮素-1 (ET-1)、尿液中mALB与β_2-MG的含量,对于改善自发性肾性高血压具有很强的功效。该结果对于开发以天麻、钩藤为主的纯天然中药药膳,进一步探索调控机制,为临床高血压病的防治提供了理论依据。

哺乳动物胚胎发育极性的研究进展

哺乳动物胚胎的早期发育,可依据环境变化进行自我调控。胚胎是何时具有自我调控能力的,一直有两种说法:其一,胚胎刚形成时,细胞质成分空间分布均衡,胚胎具有发育全能性,经几次卵裂后,卵裂球间开始分化发育,另外一种观点认为,胚胎形成时就具有极性,具备了分化发育的特异性,随着不断卵裂、细胞质的分离,这种发育差异表现得更加明显。近年的研究多倾向于第二种观点,认为卵裂的顺序及方位,对着床前胚胎的极性发育有影响。

H2A变体在卵原细胞及其前体细胞核质区的分布

小鼠卵原细胞发育之前经历细胞的迁移、大量繁殖和性别分化,为了进一步了解分子调控机制,通过组织石蜡切片免疫荧光染色和单细胞免疫荧光染色技术,对配种时间为11.5d、12.5d和13.5d卵原细胞及其前体细胞,组蛋白H2A变体MacroH2A、H2A.Z、H2A.X的分布情况进行研究。结果表明,配种时间为12.5d细胞中3种组蛋白H2A变体荧光强度减弱,macroH2A在配种时间为11.5d、12.5d细胞质表达,有少量的沉积,13.5d细胞质中macroH2A沉积明显增多。H2A.X在配种时间为11.5d、12.5d细胞核和细胞质中弥散分布,13.5d主要集中于细胞核。H2A.Z在配种时间为11.5d整个细胞核和细胞质都有表达,12.5dH2A.Z在细胞质内表达减弱,细胞核出现部分沉积,13.5d细胞中H2A.Z主要集中分布于细胞质。组蛋白H2A变体的分布特征,可能与细胞的性别分化及细胞的减数分裂相关。

3种H2A变体在卵原及前体细胞中的分布研究

通过组织石蜡切片和单细胞免疫荧光染色及定量PCR技术,对卵原及前体细胞中组蛋白H2A变体macroH2A、H2A.Z、H2A.X的分布情况进行了研究。结果表明:12.5 dpc细胞中3种组蛋白H2A变体荧光强度减弱,macroH2A在11.5 dpc、12.5 dpc的细胞质中表达,有少量沉积,13.5 dpc细胞质中macroH2A沉积明显增多。H2A.X在11.5 dpc、12.5 dpc细胞核质中弥散分布,13.5 dpc时主要集中于细胞核表达。H2A.Z在11.5 dpc细胞核质区都有表达,在12.5 dpc细胞质内表达减弱的同时细胞核中表达增强,13.5 dpc时主要集中在细胞质中表达。不同时期组蛋白H2A 3种变异体定量PCR结果与免疫荧光技术分析结果一致。由此推断,组蛋白H2A变体的分布可能与细胞的性别分化及减数分裂相关。

小鼠卵母细胞和胚胎发育过程中组蛋白H4K20二甲基化的表达

运用单细胞免疫荧光技术,分析了小鼠卵母细胞和胚胎发育过程中组蛋白H4K20二甲基化的表达情况。结果表明:H4K20二甲基化在生长期的卵母细胞中呈逐渐增加的趋势;15 d时的小鼠卵母细胞没有H4K20二甲基化的表达,但在第20天和第25天重新被检测到信号;卵母细胞在生发泡期(GV)、生发泡破裂期(GVBD)和减数分裂中期(MⅡ)均没有H4K20二甲基化的表达;二细胞胚胎和四细胞胚胎中有H4K20二甲基化的表达,其他时期的胚胎中检测不到荧光信号。

混合式教学与PBL模式结合在高职生物化学教学中的研究

随着信息技术手段的不断发展,教学模式改革也呈现出越来越多的融合信息技术手段的趋势。在分析可行性和必要性的基础上,我们构建了线上线下混合式教学与PBL模式相结合,并在生物化学课程中进行了初步教学改革尝试,对改革的经验进行总结梳理,以期为其他高职院校提供借鉴参考。

进入生殖嵴前PGCs中H2A变体的分布

小鼠原始生殖细胞进入生殖嵴之前经历细胞迁移、大量繁殖。为进一步解分子调控机制，文章通过组织石蜡切片免疫荧光染色和单细胞免疫荧光染色技术，对8.5、10.5 dpcPGCs中组蛋白H2A变体MacroH2A、H2A.Z、H2A. X的分布情况进行研究。结果表明，8.5-10.5 dpc，H2A.Z在PGCs中的表达明显递增，10.5 dpc PGCs中H2A.Z的表达主要集中于细胞核；而MacroH2A和H2A.X在此过程中无明显变化，在细胞质和细胞核中弱表达。综合分析发现，8.5-10.5 dpc PGCs中H2A.Z可能是装配核小体的主要变体，PGCs大量繁殖可能有H2A.Z的参与。

肉制品中吲哚残留量的高效液相色谱分析

建立一种采用高效液相色谱法（HPLC）测定加工肉制品中吲哚残留量的新方法。样品经纯甲醇提取后,采用HLB固相萃取柱净化,用高效液相色谱C18柱分离,水-乙腈作为流动相,流速为1.0 m L/min,柱温为30℃,紫外检测波长为275 nm,外标法定量。吲哚的浓度在10~100μg/L内有较好的线性关系,R2大于0.99,回收率为93.5%~97.4%,RSD小于15%（n=10）。该法简单,灵敏度高,重复性好,适用于动物源性食品中吲哚残留量的测定。

高职生化分离技术课程建设的探索实践

经过两年多的精品课程建设,在对生化分离技术明确课程定位的基础上,对师资队伍重建、教学内容优化、教学方法实践等问题进行了有益探索实践。

颗粒细胞凋亡对卵泡闭锁的影响

99％的雌性生殖细胞都会在卵子发生的不同阶段发生凋亡。颗粒细胞凋亡是导致卵泡闭锁的重要原因。从激素、细胞因子和基因三方面研究颗粒细胞凋亡机理，是解释卵泡闭锁的根本途径。

利用湖羊生产人ApoB多抗血清免疫新方法

利用湖羊生产羊抗人ApoB,将人ApoB免疫原经湖羊皮下与皮内及淋巴结多点接种并进行多次加强免疫,建立利用湖羊生产人ApoB多抗血清免疫的新方法,获得高效价抗人ApoB抗体,并且采用琼脂扩散方法检测抗体效价。结果显示,5次免疫后的羊抗人ApoB多抗血清效价达210以上,试验结果达到预期,湖羊采用合适的免疫程序完全可以生产抗血清,经济效益可观。

脂质体转染对小鼠肠上皮细胞的影响

小鼠肠上皮细胞(IEC)是一种快速更新的细胞,脂质体转染法是哺乳动物细胞转基因常用的转染方法。以IEC为研究对象,从转染前后细胞形态、细胞周期及染色体倍性等方面的变化研究脂质体转染对IEC的影响。结果显示,脂质体转染后形态不正常的细胞增多;细胞周期中G0/G1期细胞比例显著增加(P<0.05),以3代的细胞转染为例,由对照的62.4%增加到73.4%;S期同转染前相比显著降低(P<0.05),由20.4%降低至13.2%;然而从染色体倍性看,统计分析表明转染前后没有显著差异。从以上几个方面可以看出,脂质体转染对IEC产生了一定的负面影响。

硫化物醌氧化还原酶定向表达载体的构建及细胞转染表达检测

为建立硫化物醌氧化还原酶(SQR)的肠道定向表达载体,同时通过转染小鼠肠道上皮细胞确定载体的有效性,本试验采用重叠PCR、中间载体法、酶切连接法获得重组载体,通过脂质体转染法将重组载体转入小鼠肠道上皮细胞,并鉴定重组载体的特异性表达。结果显示,成功构建了以肠脂肪酸结合蛋白质(IFABP)为启动子的SQR肠道定向表达载体pc DNA3.1(-)-IFABP-SQR-GFP,并在小鼠肠道上皮细胞中检测到表达的融合绿色荧光蛋白质(GFP)。表明IFABP启动子能够在肠道细胞中定向启动SQR的表达。

也谈大学生诚信缺失及教育策略

诚信教育是大学素质教育的重要组成部分，但是大学生的诚信品质令人担忧。本文从大学生诚信缺失的表现、诚信缺失的原因进行分析，同时探讨了减少学生诚信缺失的对策，以期提高学生的诚信意识，培养其诚信猜为，