基于网络药理学和分子对接技术探讨金钗石斛生物碱抗后发性白内障的作用机制

目的:探讨金钗石斛生物碱抗后发性白内障的作用机制。方法:通过查阅国内外文献,收集金钗石斛生物碱类活性成分及其结构,利用网络药理学预测金钗石斛生物碱抗后发性白内障的潜在靶点,建立金钗石斛生物碱抗后发性白内障的蛋白互作关系网络(PPI),并对潜在靶点进行GO分析和KEGG通路富集分析,探索金钗石斛防治后发性白内障可能的生物进程及通路。通过分子对接验证金钗石斛生物碱与核心靶点的结合活性。结果:网络药理学分析表明,获得金钗石斛生物碱类活性成分27个,金钗石斛生物碱抗后发性白内障的核心靶点为STAT3、PIK3R1、AKT1等,GO富集分析结果表明,金钗石斛生物碱主要通过影响细胞凋亡、细胞迁移和激酶活性的双向调节等生物进程,发挥酶结合和蛋白质结合等分子结合,进而发挥抗后发性白内障的作用。金钗石斛抗后发性白内障可能与血管生成(HIF-1信号通路)、炎症反应(PI3K-Akt信号通路)等信号通路有关。分子对接结果显示金钗石斛生物碱与核心靶点均有较好的结合活性。结论:金钗石斛中石斛碱(dendrobine)、N-反式阿魏酸酰对羟基苯乙胺(N-trans-feruloyl tyramine)可能是通过STAT3、PIK3R1、AKT1等多靶点、多信号通路、多途径发挥对后发性白内障的防治作用,为后期的实验验证及金钗石斛药材的开发提供理论指导。

金钗石斛总生物碱的提取与分析

目的:探索金钗石斛总生物碱提取与分析的方法。方法:以金钗石斛饮片为实验原料,采用浸渍法制备金钗石斛提取液,减压浓缩得到石斛浸膏,通过酸提碱沉法进行纯化后,用柱层析法将金钗石斛总碱进行分离并制备成冻干粉。以50%乙腈为溶液制备对照品和供试品溶液,流动相为乙腈:0.1%三乙胺溶液(v∶v)=20∶80,柱温为30℃,检测波长为240 nm,进样量10μL,采用HPLC法测定金钗石斛冻干粉及其原药材提取液中石斛碱的含量,同时进行工作曲线、精密度、重复性、稳定性及加样回收率试验的方法学考察。结果:金钗石斛原药材中石斛碱的含量为6.81%,金钗石斛冻干粉中石斛碱的含量为52.68%,石斛碱的线性回归方程为Y=12.40X-4.381,相关系数r=0.9998,其精密度、重复性、稳定性的RSD分别为0.98%、0.86%、1.02%,平均回收率为100.49%,RSD值为1.57%。结论:本实验建立的提取方法及分析方法操作简单、重复性高、稳定可行。