快速测定人血浆中洛匹那韦/利托那韦浓度的LC-MS/MS方法建立

目的建立LC-MS/MS方法快速测定人血浆中洛匹那韦（lopinavir,LPV）/利托那韦（ritonavir,RTV）（克力芝）的含量。方法血浆样品采用蛋白沉淀法处理后,以甲醇-水（0.1%甲酸）为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2 ml/min,色谱柱采用Thermo Hypersil GOLD柱（2.1 mm×100 mm,5 mm）,柱温为25℃,采用ESI源以选择反应监测（SRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子对为LPV（m/z 629.3→155.0）、RTV（m/z 721.3→268.0）,内标MS275（m/z 377.1→359.2）。结果两药在人血浆中浓度在20~1000 ng/ml时,线性关系良好（r〉0.994）。日内、日间精密度,低浓度〈20%,中高浓度〈15%,回收率为86.5%~96.3%。结论该检测方法简单、快速、灵敏、准确,适用于两药的临床血药浓度监测及其药物代谢动力学研究。

1,5-二咖啡酰奎宁酸与其四乙酰化物相对生物利用度的研究

目的比较1,5-二咖啡酰奎宁酸与其四乙酰化物在大鼠体内的生物利用度,为目标化合物的筛选和结构优化提供参考依据。方法 Wistar大鼠随机分两组,分别灌胃给予等摩尔数的1,5-二咖啡酰奎宁酸（100 mg/kg）和四乙酰化物（133 mg/kg）。血浆样品经乙酸乙酯萃取后,以乙腈-水（5 mmol/L乙酸铵,pH5.0）为流动相,用Ultimate C18色谱柱（50 mm×2.1 mm,5μm）分离,采用液相色谱串联质谱法同时监测两个化合物。结果两个化合物均在5~1000 ng/ml范围内呈良好线性关系,精密度、准确度、基质效应、提取回收率等各项指标都满足生物样品测定的要求。四乙酰化物在大鼠体内迅速转化成活性代谢产物1,5-二咖啡酰奎宁酸,血浆中没有检测到四乙酰化物和可能的三乙酰化、二乙酰化和单乙酰化物。以1,5-二咖啡酰奎宁酸的量计算,大鼠口服四乙酰化物与口服1,5-二咖啡酰奎宁酸的相对生物利用度为64%。结论四乙酰化物的生物利用度低于1,5-二咖啡酰奎宁酸,开发口服制剂时1,5-二咖啡酰奎宁酸优于四乙酰化物。

水凝胶作为载体的口服胰岛素制剂的药代动力学及药效学研究

目的对以载糖蛋白-水凝胶为载体的口服胰岛素制剂进行药代动力学及药效学评价。方法建立糖尿病大鼠模型,实验分空白组、皮下给药组(2 U/kg),以及两个口服胶囊组,口服胶囊组给药剂量分别是50 U/kg和100 U/kg(制剂胰岛素含量依次为200和800 U/g)。建立酶联免疫法(ELISA)对胰岛素的吸收进行检测,并采用血糖仪监测血糖水平的变化情况。结果皮下组给药后血糖变化及胰岛素吸收情况均较好,口服组给药后未检测到胰岛素的吸收,血糖基本维持稳定状态。结论以载糖蛋白-水凝胶作为载体的口服胶囊没有起到降血糖作用,整个实验的设计与思路为从事相关研究的学者提供了参考,有利于对水凝胶或其他生物材料作进一步的修饰改善。

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中forsklin的浓度及其药代动力学(英文)

目的建立了测定大鼠血浆中forsklin的液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）。方法血浆样品经叔丁基甲醚萃取后,以水（0.1%甲酸）-乙腈为流动相梯度洗脱,BetaBasic-C18柱分离。通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 411→375.3（forsklin）和285→193（地西泮）。结果在本实验条件下,forsklin血浆浓度测定方法的线性范围为0.5~1000 ng/ml,定量下限为0.5 ng/ml。日内、日间精密度（相对标准差RSD）均小于14.4%;准确度（相对误差RE）在-3.5%和3.8%之间。方法的专属性,绝对回收率,稳定性和基质效应均符合要求。结论该法快速、灵敏、准确,可用于forsklin的药代动力学研究。

HPLC内标法测定南方红豆杉不同部位中紫杉醇的含量

目的建立HPLC内标法测定南方红豆杉不同部位中紫杉醇的含量。方法以地西泮作为内标,色谱柱采用Hypersil ODS2(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,流动相为乙腈-甲醇-水(27:36.5:36.5),流速:0.8 ml/min,检测波长:277 nm,柱温:30℃。结果紫杉醇的质量浓度在3.125～100μg/ml(r=0.9995)时,线性关系良好。平均回收率为97.4%(RSD=0.85%)。南方红豆杉根中紫杉醇含量最高,其次为皮,叶和木质含量较少。结论使用内标法进行定量,科学合理、准确可靠,可作为红豆杉原药材或含有红豆杉的中成药进行紫杉醇含量测定的分析方法。