刺山柑对类风湿关节炎大鼠滑膜组织自噬相关蛋白表达的影响

目的:观察刺山柑果风湿止痛贴对类风湿关节炎大鼠滑膜组织自噬相关蛋白表达的影响,并探究刺山柑治疗类风湿关节炎(RA)的可能作用机制。方法:将40只无特定病原体(SPF)级SD大鼠采用随机数字法分为正常组,模型组,阳性药组和刺山柑组,每组10只,对造模的大鼠在足跖底部注射0.1 mL完全弗氏佐剂。模型组、阳性药组和刺山柑组分别于大鼠左后足跖部外敷空白凝胶、伤湿止痛膏以及刺山柑果风湿止痛贴,每组持续干预21 d。观测关节炎(AI)指数和足爪容积的指标,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白质印迹法检测滑膜组织中微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、Beclin蛋白复合物-1(Beclin-1)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组和阳性药组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达均上升(P<0.05,P<0.01),刺山柑组LC3-Ⅱ蛋白表达降低(P<0.01),Beclin-1蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,阳性药组Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达差异无统计学意义,刺山柑组LC3-Ⅱ蛋白表达降低(P<0.01),Beclin-1蛋白表达升高(P<0.01)。结论:刺山柑果风湿止痛贴治疗AA大鼠比伤湿止痛膏疗效更加显著,从而为刺山柑治疗RA提供一定的科学依据,其相关机制可能与蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1表达有关。

刺山柑风湿止痛贴联合温和灸对佐剂型类风湿关节炎大鼠滑膜组织VEGF及slCAM-1表达的影响

目的 观察刺山柑风湿止痛贴联合温和灸对佐剂型类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)大鼠血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平以及滑膜组织可溶性细胞间黏附分子-1(solub leinter cellular adhesion molecule slCAM-1)表达的影响,探究其对佐剂型RA大鼠免疫调节的作用机制。方法 随机将60只大鼠分成空白组、模型组、对照组、刺山柑组、灸疗组和综合组,每组10只。除空白组外,将0.1 mL弗氏完全佐剂于大鼠足跖皮下注射用于建模。模型成功后,分别外敷伤湿止痛膏予对照组、刺山柑风湿止痛贴予刺山柑组、空白凝胶膏予模型组;温和灸肾俞、足三里予灸疗组,空白组不变;综合组以刺山柑联合艾灸治疗,每组持续干预3周(6 d为1疗程),对RA指数评分、足爪容积进行监测,同时用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测大鼠血清VEGF水平及滑膜组织中slCAM-1水平,蛋白印迹(western blot)法检测大鼠滑膜组织中VEGF蛋白表达。结果 模型组与对照组相比AI指数评分上升;血清及踝关节滑膜中VEGF及slCAM-1蛋白表达水平均明显提高,而灸疗组、刺山柑组比模型组下降(P<0.05),综合组更为显著(P<0.05)。结论 刺山柑风湿止痛贴联合温和灸对佐剂型RA疗效较为显著,其机制可能与下调VEGF、slCAM-1表达相关。

刺山柑果风湿止痛贴和温和灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织HSP70和PPARγ蛋白表达的影响

目的观察和比较刺山柑果风湿止痛贴和温和灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织免疫蛋白HSP70和PPARγ表达的影响,探讨其可能的免疫调节作用机制。方法50只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组、刺山柑组和艾灸组。采用足跖皮下注射弗氏完全佐剂建立佐剂性关节炎大鼠模型。阳性药组和刺山柑组分别用伤湿止痛膏和刺山柑果风湿止痛贴外敷,艾灸组进行温和悬灸肾俞、足三里。观察大鼠AI指数和足爪容积、血清TNF-α和IL-1β水平、滑膜组织HSP70和PPARγ蛋白表达。结果造模后各组大鼠关节肿胀明显,TNF-α、IL-1β水平和滑膜组织HSP 70、PPARγ蛋白表达均显著升高(P<0.05或0.01)。治疗3个疗程后,刺山柑组和艾灸组大鼠血清中TNF-α、IL-1β水平均明显降低(P<0.05);艾灸组大鼠HSP70表达明显升高(P<0.05)并明显高于刺山柑组(P<0.01);刺山柑组PPARγ蛋白表达明显升高(P<0.01)并高于艾灸组(P<0.05)。结论刺山柑和艾灸疗法均可下调抗炎因子TNF-α、IL-1β水平,其作用机制可能是刺山柑上调PPARγ的表达、艾灸上调HSP70的表达而发挥抗炎消肿止痛作用。

针灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织自噬相关蛋白表达的影响

目的:观察针刺、艾灸对类风湿关节炎(RA)大鼠滑膜组织自噬相关蛋白表达的影响,探究针灸治疗RA的可能作用机制。方法:将50只大鼠随机分为正常组、造模组、阳性对照组、针刺组与艾灸组,每组10只,将正常组以外的4组大鼠足跖底部注射0.1 mL完全弗氏佐剂造模,阳性对照组按照0.1 mg/100 g的剂量进行甲氨蝶呤灌胃,1次/3 d(每周2次);针刺组针刺肾俞、足三里,每穴20 min;艾灸组艾条温和悬灸针刺相同穴位,每穴20 min;每组治疗21 d;正常组和造模组不予治疗。分别在造模成功后、治疗结束后测量AI指数和足爪容积的指标,ELISA法检测大鼠血清TNF-α、IL-1β水平,Western blot法检测滑膜组织中LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达。结果:造模后大鼠关节均明显肿胀,治疗后的大鼠关节肿胀度均有改善;与正常组比较,造模组LC3-Ⅱ蛋白表达上升,差异具有统计学意义(P<0.05),Beclin1蛋白表达明显上升,差异具有统计学意义(P<0.01),阳性对照组和针刺组Beclin-1蛋白表达上升显著,差异具有统计学意义(P<0.01);与造模组相比,针刺组LC3-Ⅱ蛋白表达明显下降,差异具有统计学意义(P<0.01),Beclin-1蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05),艾灸组LC3-Ⅱ蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05),Beclin-1蛋白表达显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:针刺、艾灸均对类风湿关节炎有治疗效果,其机制可能与抑制自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达有关。

针灸调节自噬的研究进展

针灸作为传统医学的重要组成部分,在治疗疾病方面有其独特的优势。自噬是维持细胞内环境稳态的生命现象,经过大量的研究证实自噬广泛存在于各类疾病的发病机制中。有相关研究报道,针灸能够调节自噬,可能为针灸治病的临床应用与基础研究提供新的方向。

灸药结合的研究进展

艾灸手法在祖国医学几千年的发展历史中,被人们看作是治疗疾病的主要手法之一,是中医针灸学的紧要组成部分。灸法有温经通络、祛风散寒、健脾祛湿、滋补肾阳、消肿散结、回阳救逆等作用,能够调理脏器功能,加强机体免疫力[1]。艾灸燃烧时,通过产生热辐射和光辐射等物理刺激并将其转化为生物信息,从而发挥抗炎、免疫调节及止痛等作用[2];大量的诊疗文献表明艾灸对机体免疫系统、循环系统、神经系统、呼吸系统等均有增进和调理作用[3]。