褪黑素对青鱼生长、非特异性免疫、抗氧化能力、肠道消化酶活性以及肝脏胰岛素样生长因子Ⅰ和热休克蛋白70 mRNA表达的影响

本研究旨在探讨饲料中添加褪黑素对青鱼生长、非特异性免疫、抗氧化能力、肠道消化酶活性以及肝脏胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)和热休克蛋白70(HSP70)mRNA表达的影响。试验选取525尾初始体质量为(6.44±0.17)g的青鱼幼鱼,随机分成5个组,分别饲喂在基础饲料中添加0(对照组)、5、10、15和20 mg/kg褪黑素的5种饲料,每组3个重复,每个重复35尾鱼。试验期8周。结果表明:1)与对照组相比,饲料中添加10~20 mg/kg褪黑素可显著提高青鱼增重率(WGR)和特定生长率(SGR)(P<0.05),显著降低饲料系数(FCR)(P<0.05),但对存活率、肝体指数、内脏指数和肥满度无显著影响(P>0.05);通过折线模型推测,当饲料中褪黑素添加量为9.28 mg/kg时,青鱼幼鱼将获得最大WGR。2)与对照组相比,饲料中添加10和15 mg/kg褪黑素可显著提高青鱼血清总蛋白(TP)和补体3(C3)含量以及溶菌酶(LSZ)和碱性磷酸酶(ALP)活性(P<0.05),并显著降低青鱼感染嗜水气单胞菌后的累积死亡率(P<0.05);而饲料中添加15 mg/kg褪黑素则可显著提高血清补体4(C4)含量(P<0.05),显著降低血清谷丙转氨酶(ALT)活性(P<0.05);饲料中添加褪黑素对血清谷草转氨酶(AST)活性无显著影响(P>0.05)。3)与对照组相比,饲料中添加10和15 mg/kg褪黑素可显著提高青鱼肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)含量以及总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05),且饲料中添加10 mg/kg褪黑素还可显著提高肝脏过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05),但饲料中添加褪黑素对肝脏谷胱甘肽还原酶(GR)活性无显著影响(P>0.05)。4)与对照组相比,饲料中添加10 mg/kg褪黑素可显著提高青鱼肠道胰蛋白酶活性(P<0.05),饲料中添加褪黑素对肠道淀粉酶和脂肪酶活性无显著影响(P>0.05)。5)青鱼肝脏IGF-Ⅰ和HSP70mRNA表达水平随饲料中褪黑素添加量的增加而呈先升高后降低的变化趋势,当饲料中褪黑素添加量为10 mg/kg时,这2种基因的mRNA表达水平达到最高。由此可见,当饲料中添加适量褪黑素时可促进青鱼幼鱼的生长,提高其非特异性免疫力和抗氧化能力,并增强肠道胰蛋白酶活性;当饲料中褪黑素添加量为9.28 mg/kg时,体质量为6.41~34.83 g的青鱼幼鱼可获得最大WGR。

槲皮素对高脂饲料饲养青鱼生长性能、抗氧化能力、脂代谢和肠道菌群的影响

本试验旨在研究槲皮素对高脂饲料饲养青鱼生长性能、抗氧化能力、脂代谢和肠道菌群的影响。试验选取540尾初体质量为(10.57±0.41)g的青鱼幼鱼,随机分为6组,每组3个重复,每个重复30尾鱼。6组青鱼分别饲喂正常脂肪饲料(NFD组,5%粗脂肪)、高脂饲料(HFD组,15%粗脂肪)以及分别在高脂饲料中添加300、600、900和1200 mg/kg槲皮素的饲料。试验期8周。结果表明:1)与NFD组相比,高脂饲料降低青鱼生长性能,造成机体氧化应激损伤、脂质代谢紊乱、肝脏和肠道组织病理学异常以及肠道菌群失调。2)与HFD组相比,高脂饲料中添加600和900 mg/kg槲皮素显著提高青鱼增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和存活率(SR)(P<0.05),显著降低饲料系数(FCR)、肝体指数(HSI)和肥满度(CF)(P<0.05)。通过折线模型拟合得出,当高脂饲料中槲皮素添加量为597.13 mg/kg时,青鱼可获得最大WGR。3)与HFD组相比,高脂饲料中添加600 mg/kg槲皮素显著提高青鱼肝脏过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05),而且槲皮素添加组肝脏丙二醛(MDA)含量均显著降低(P<0.05)。4)与HFD组相比,高脂饲料中添加900 mg/kg槲皮素显著降低青鱼血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和游离脂肪酸(NEFA)含量(P<0.05)。5)与HFD组相比,高脂饲料中添加600~1200 mg/kg槲皮素可改善高脂诱导引起的肝细胞空泡化、细胞核溶解或消失等病理症状,同时显著提高肠道绒毛高度(P<0.05)。6)与HFD组相比,高脂饲料中添加600~900 mg/kg槲皮素可提高肠道菌群的alpha多样性,但各组间无显著差异(P>0.05)。在门和属水平上,高脂饲料中添加槲皮素提高了有益菌门(属)厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、乳球菌属(Lactococcus)和红杆菌属(Rhodobacter)的相对丰度,降低了有害或潜在有害菌门(属)变形菌门(Proteobacteria)、不动杆菌属(Acinetobacter)、邻单孢菌属(Plesiomonas)和气单胞菌属(Aeromonas)的相对丰度,但各组间无显著差异(P>0.05)。肠道菌群功能预测结果显示,高脂饲料中添加适量槲皮素可提高脂代谢等有关代谢类功能的通路丰度。综上可知,在高脂饲料中添加600~900 mg/kg槲皮素可促进青鱼幼鱼生长,增强机体抗氧化能力,促进脂代谢,降低鱼体脂肪的过度沉积,改善肠道菌群组成。

克氏原螯虾内源性纤维素酶糖苷水解酶9基因家族鉴定及其表达分析

本试验旨在分析鉴定克氏原螯虾内源性纤维素酶糖苷水解酶9(GH9)基因家族,研究其在投喂不同饲料时以及低氧-复氧胁迫下的表达特征,以期为克氏原螯虾对于植物性饲料的消化利用研究提供理论依据,同时为动物内源性纤维素酶高效利用研究积累数据资料。采用生物信息学与分子克隆相结合的策略,系统研究克氏原螯虾GH9基因家族的全基因组分布情况,获取克氏原螯虾GH9基因家族的结构特点、分布特征及其在投喂不同饲料(植物性饲料、动物性饲料、配合饲料)时以及低氧-复氧胁迫下的表达响应结果。结果显示:1)克氏原螯虾基因组中共有7个GH9基因家族成员(PcGH9-1、PcGH9-2、PcGH9-3、PcGH9-4、PcGH9-5、PcGH9-6、PcGH9-7),GH9基因家族成员的cDNA长度为1843~2354 bp,编码氨基酸残基数为510~585个,分布于LG23、LG39以及LG54等3条染色体上。克氏原螯虾GH9基因家族具有1个典型的Glyco hydro 9结构域,外显子数为7~14个,内含子数为6~13个。依据是否具有纤维素结合区(CBD),克氏原螯虾GH9基因家族可分为2个亚类,第Ⅰ亚类包括PcGH9-1、PcGH9-2和PcGH9-7,第Ⅱ亚类包括PcGH9-3、PcGH9-4、PcGH9-5、PcGH9-6。2)克氏原螯虾GH9基因家族主要在肝胰腺中高表达。3)克氏原螯虾肝胰腺中GH9基因家族表达量及β-1,4-内切葡聚糖酶活性在投喂植物性饲料时最高,在投喂动物性饲料时最低。4)低氧-复氧胁迫下,克氏原螯虾肝胰腺中PcGH9-1、PcGH9-2、PcGH9-3、PcGH9-4与PcGH9-5的表达量随着低氧胁迫时间延长而下降,PcGH9-6与PcGH9-7的表达量在低氧-复氧胁迫下变化较小;低氧-复氧胁迫下,β-1,4-内切葡聚糖酶活性随着低氧胁迫时间延长而显著下降(P<0.05)。综上可知,克氏原螯虾体内具有内源性纤维素酶GH9基因家族,GH9基因家族成员主要在肝胰腺中高表达。投喂植物性饲料可显著提升克氏原螯虾肝胰腺组织中GH9基因家族的表达及β-1,4-内切葡聚糖酶活性,低氧-复氧胁迫可显著抑制GH9基因家族表达及β-1,4-内切葡聚糖酶活性。

大黄素、维生素C及其配伍对团头鲂生长、生理生化指标、抗病原感染以及两种HSP70s mRNA表达的影响

选取1200尾健康的团头鲂,体重为(133.44±2.11)g,随机分成4组,其中1组为对照组,投喂基础日粮(含50.3mg/kg维生素C,以L-抗坏血酸-2-多聚磷酸酯为Vc源),另外3组为试验组,投喂饲料是在基础日粮中分别添加60mg/kg大黄素、700mg/kgVc、60mg/kg大黄素+700mg/kgVc。连续投喂60d后,检测团头鲂生长、肌肉成分、血液和肝脏生化指标以及两种热休克蛋白70s(HSP70s)mRNA的表达水平,并统计团头鲂感染嗜水气单胞菌后的成活率,以综合评价大黄素、高剂量Vc及其配伍对团头鲂的作用效果。结果表明,与对照组相比,大黄素、Vc组显著提高了鱼体增重率和特定生长率,血清中总蛋白(TP)、溶菌酶(LSZ)和碱性磷酸酶(AKP)的水平,肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和诱导型HSP70 mRNA的基础表达水平,降低了饵料系数、死亡率、血清中皮质醇(COR)、甘油三酯(TG)以及肝脏丙二醛(MDA)的含量(P<0.05);配伍组虽然血清中TP、LSZ的含量以及肝脏HSP70 mRNA水平显著升高,肝脏MDA的含量也显著降低(P<0.05),但均未表现出协同增效作用,其它指标与对照组相比差异均不显著(P>0.05)。此外,与对照组相比,大黄素组还显著提高了团头鲂肝脏过氧化氢酶(CAT)的活性(P<0.05),而Vc和配伍组的CAT活性与对照组的差异不显著(P>0.05);其它一些指标如血清中葡萄糖(GLU)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、胆固醇(CHOL)、肝脏组成型HSC70mRNA的表达水平、鱼体形体指标以及肌肉组成成分等各组间差异均不显著(P>0.05)。攻毒试验也表明,大黄素和高剂量Vc组能显著提高攻毒后鱼的成活率(P<0.05),而二者配伍后效果反而下降,其相互作用的机理还有待于进一步研究。

团头鲂HSP70 cDNA的克隆、序列分析以及热应激对其mRNA表达的影响

采用RT-PCR和cDNA末端快速扩增法(RACE)分离、克隆出团头鲂(Megalobrama amblycephala)肝脏热休克蛋白70(HSP70)基因全长cDNA序列,共2224bp,包括135bp5′非翻译区、1932bp阅读框以及157bp3′非翻译区[不包括Poly(A)]。阅读框共编码643个氨基酸,分子量计算值为70.53kD,理论等电点为5.25。该HSP70基因在翻译区不含内含子,符合诱导型HSP70的特征。团头鲂HSP70氨基酸序列中含有HSP70家族的3个签名序列以及细胞质特异性调控基序EEVD等。同源性分析表明,团头鲂HSP70氨基酸序列与斑马鱼等脊椎动物的相似性高达84.0%以上,与无脊椎动物果蝇的相似性也高达73.4%。生物信息学分析显示,团头鲂HSP70基因所编码的蛋白质以亲水性区域为主,具有丰富的B细胞抗原位点,无信号肽,无跨膜区域,为非分泌型蛋白;同时还含有众多的蛋白激酶C磷酸化位点、N-肉豆蔻酰化位点、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和N-糖基化位点,推测其可能在细胞信号转导与调控中发挥重要作用。该蛋白含有2个部分重叠的双向核定位序列,二级结构以α-螺旋和无规卷曲为主,空间结构包括N端ATPase功能域和C端多肽结合功能域。应用实时定量PCR研究高温(34℃)应激对团头鲂HSP70 mRNA表达的影响。结果表明,在热应激过程中肝脏HSP70 mRNA水平呈先升高后下降的变化趋势,说明该基因的表达受热应激调控,本实验克隆的序列为诱导型HSP70 cDNA。

大黄素、维生素C及其配伍对团头鲂感染嗜水气单胞菌后生理生化指标的影响

为综合评价大黄素、高剂量维生素C及其配伍对团头鲂(Megalobrama amblycephala Yih)抗嗜水气单胞菌感染能力的影响,选取1 200尾健康的团头鲂,体质量为(133.44±2.11)g,随机分成4组,其中1组为对照组,投喂基础日粮,另外3组在基础日粮中分别添加60 mg/kg大黄素、700 mg/kg维生素C、60 mg/kg大黄素+700 mg/kg维生素C(配伍组)。饲养60 d后,经腹腔注射感染嗜水气单胞菌,并在攻毒前后检测团头鲂血液和肝脏的生化指标以及肝脏2种热休克蛋白70s(HSP70s)mRNA的表达水平;另从各池中取10尾鱼进行同样的攻毒试验,统计攻毒后各时间点鱼的累积死亡率。结果表明,攻毒后,与对照组相比,大黄素、维生素C组不同程度地提高了血清总蛋白(TP)、溶菌酶(LSZ)和碱性磷酸酶(AKP)的水平,肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性以及HSC70和HSP70 mRNA的表达水平,降低了血清皮质醇(COR)、血糖(GLU)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、甘油三酯(TG)以及肝脏丙二醛(MDA)的水平;配伍组中,这些指标的变化趋势虽与上述类似,但大多与对照组的差异不显著(P>0.05),且未表现出协同增效作用。此外,各组鱼血清胆固醇(CHOL)的含量在攻毒前后的差异均不显著(P>0.05)。统计也表明,大黄素和维生素C组鱼的累积死亡率在攻毒后24 h、48 h均显著低于对照组(P<0.05),而配伍组试验鱼的累积死亡率与对照组差异均不显著(P>0.05)。由此可见,在基础日粮中添加大黄素60 mg/kg或维生素C 700 mg/kg,可提高鱼体的非特异性免疫力、抗氧化能力以及2种HSP70s mRNA的表达水平,增强鱼体抗病原菌感染的能力。二者配伍则效果不佳。

大黄素、维生素C及其配伍对团头鲂抗拥挤胁迫的影响

选取1200尾健康的团头鲂(Megalobrama amblycephala Yih),体重为(133.44±2.11)g,随机分成4组,其中1组为对照组,投喂基础日粮(含50.3 mg/kg维生素C,以L-抗坏血酸-2-多聚磷酸酯为Vc源),另外3组为试验组,投喂饲料是在基础日粮中分别添加60 mg/kg大黄素、700 mg/kg Vc、60 mg/kg大黄素+700 mg/kg Vc。饲养60d后,从各池中取25尾规格基本一致的鱼,进行连续48h的拥挤胁迫(100 g/L)实验,分别于0h、12h、24h、48h取样分析团头鲂血液和肝脏的生化指标以及肝脏两种HSP70s mRNA的表达水平,并统计各组鱼的累积死亡率。结果表明,在拥挤胁迫前,与对照组相比,大黄素、Vc组显著提高了团头鲂血清总蛋白(TP)、溶菌酶(LSZ)和碱性磷酸酶(AKP)的水平,肝脏超氧化物歧化酶(SOD)的活性和诱导型HSP70 mRNA的表达水平,降低了血清皮质醇(COR)、甘油三酯(TG)以及肝脏丙二醛(MDA)的含量(P<0.05),且大黄素组还显著提高了肝脏过氧化氢酶(CAT)的活性(P<0.05);配伍组虽然血清TP、LSZ以及肝脏HSP70 mRNA的水平显著升高,肝脏MDA的含量也显著降低(P<0.05),但均未表现出协同增效作用。在拥挤胁迫后,与对照组相比,大黄素、Vc组不同程度地提高了团头鲂血清TP和AKP的水平,肝脏SOD和CAT的活性以及HSC70和HSP70 mRNAs的表达水平,降低了血清COR、葡萄糖(GLU)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、TG以及肝脏MDA的水平,而LSZ活性表现为先下降后升高;在配伍组中,这些指标虽然有类似以上的变化趋势,但大多差异不显著(P>0.05),且同样未表现出协同增效作用。统计表明,大黄素和Vc组鱼的累积死亡率在拥挤胁迫24h、48h均显著低于对照组(P<0.05),而配伍组与对照组的差异均不显著(P>0.05)。由此可见,在基础日粮中添加大黄素60 mg/kg或Vc 700 mg/kg,可提高团头鲂的非特异性免疫力、抗氧化能力以及两种HSP70s mRNA的表达水平,增强鱼体的抗应激能力。二者配伍则效果不佳,其相互作用的机理还有待于进一步研究。

蝇蛆粉和L-肉碱对青鱼生长、免疫与抗氧化指标及抗病力的影响

研究蝇蛆粉和L-肉碱对青鱼(Mylopharyngodon piceus)生长、非特异性免疫和抗氧化能力的影响。选取初始体重(72.23±1.81)g的健康青鱼270尾,随机分成3组,分别饲喂3种等氮等能的饲料,其中对照组投喂基础日粮,另外2组分别投喂添加25 g/kg蝇蛆粉或150 mg/kg L-肉碱的试验饲料。连续投喂60d后,测定鱼体生长指标、肌肉成分、血液和肝脏的生化指标,并统计青鱼感染嗜水气单胞菌(Aeromonas hy-drophi1a)后的死亡率和相对保护率。结果表明,与对照组相比,蝇蛆粉和L-肉碱组显著提高鱼体增重率和特定生长率,血清总蛋白(TP)、溶菌酶(LSZ)、补体C3和C4、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平,以及肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、GSH-Px和过氧化氢酶(CAT)的活性,降低饲料系数,血清和肝脏丙二醛(MDA)的含量(P﹤0.05)。此外,蝇蛆粉组还较对照组显著提高青鱼血清碱性磷酸酶(AKP)、SOD和CAT的活性(P<0.05),而L-肉碱组的相应指标与对照组的差异不显著(P>0.05);其他一些指标如血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)、成活率、鱼体形体指标以及肌肉组成成分等各组间差异均不显著(P>0.05)。攻毒试验也表明,蝇蛆粉和L-肉碱组均降低青鱼的死亡率。因此,在饲料中添加蝇蛆粉25 g/kg或L-肉碱150mg/kg可促进青鱼的生长,提高鱼体的免疫力和抗氧化能力,增强鱼体的抗病力。

姜黄素对草鱼生长性能、抗氧化应激能力及核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件信号通路相关基因表达的影响

本试验旨在研究姜黄素对草鱼生长性能、抗氧化应激能力以及核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)信号通路相关基因表达的影响。选择初体质量为(5.11±0.08) g的草鱼幼鱼525尾,随机分为5组(每组3个重复,每个重复35尾),分别饲喂在基础饲料中添加0(对照)、200、400、600和800 mg/kg姜黄素的5种饲料。试验期60 d。饲养试验结束后,每重复取15尾规格基本一致的草鱼,每尾鱼腹腔注射10 mg/kg BW敌草快,进行急性氧化应激试验,在注射前(0 h)、注射后24 h时分别采样,检测草鱼血清和肝脏相关的生理生化指标,以及肝脏抗氧化相关基因的mRNA表达水平。结果表明:1)随着饲料中姜黄素添加量的增加,草鱼幼鱼的增重率、特定生长率和成活率均先升高后下降,而饲料系数和肝体指数则先下降后升高,当饲料中姜黄素添加量为400、600 mg/kg时草鱼的生长性能较佳,而脏体指数和肥满度在各组间的差异均不显著(P>0.05)。2)在草鱼注射敌草快前,其血清皮质醇(COR)、葡萄糖(GLU)含量及谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性在各组间均无显著差异(P>0.05);在注射敌草快24 h后,草鱼血清上述指标随着饲料中姜黄素添加量的增加呈先下降后升高的变化趋势,当饲料姜黄素添加量为400、600 mg/kg时达到较低水平,显著低于对照组(P<0.05)。3)在草鱼注射敌草快前、注射24 h后,随着饲料中姜黄素添加量的增加,草鱼肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,总抗氧化能力(T-AOC)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,Nrf2、铜与锌超氧化物歧化酶(Cu-ZnSOD)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、CAT、GSH-Px和诱导型热休克蛋白70(HSP70) mRNA表达水平均呈先升高后下降的变化趋势,而肝脏活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)mRNA表达水平均呈先下降后升高的变化趋势,当饲料姜黄素添加量为400、600 mg/kg时,这些指标分别达到较高或较低的水平。由此可见,饲料中添加姜黄素400、600 mg/kg可促进草鱼幼鱼的生长,降低饲料系数,提高鱼体抗氧化应激能力,对敌草快诱导的急性氧化应激损伤具有保护作用,并可激活Nrf2/ARE信号通路相关基因的表达。

青鱼对8种饲料原料中营养物质的表观消化率

本试验旨在研究青鱼(Mylopharyngodon piceus)对国产鱼粉、蝇蛆粉、玉米蛋白粉、大豆粕、花生粕、棉籽粕、菜籽粕和米糠8种饲料原料干物质、粗蛋白质、氨基酸、粗脂肪、总磷和总能的表观消化率。试验饲料由70%基础饲料和30%待测饲料原料组成,并以0.1%的三氧化二钇(Y2O3)为外源指示剂。选取平均体重为(60.17±1.28)g的青鱼270尾,随机分成9组,每组3个重复,每个重复10尾鱼。对照组试验鱼饲喂基础饲料,试验组试验鱼分别饲喂1种试验饲料。饲喂1周后采用自排法收集粪便待测。结果表明:8种饲料原料的干物质、粗蛋白质、粗脂肪、总磷、总能以及总氨基酸的表观消化率的范围分别是62.17%～86.47%、83.34%～95.84%、78.93%～100.06%、37.33%～81.99%、66.75%～89.86%、86.33%～96.58%。在8种饲料原料中,玉米蛋白粉的干物质、总磷和总能的表观消化率最高,而大豆粕的粗蛋白质、粗脂肪和总氨基酸的表观消化率最高;棉籽粕的干物质和总能的表观消化率最低,米糠的粗脂肪和总磷的表观消化率最低。各饲料原料中总氨基酸表观消化率与粗蛋白质表观消化率的变化趋势一致,其中以蝇蛆粉最低。由此可见,大豆粕和玉米蛋白粉是青鱼的优质植物蛋白质源,可适量替代鱼粉;蝇蛆粉中粗蛋白质和氨基酸的消化率都较低,在青鱼饲料中的添加量不宜过高;花生粕、棉籽粕和菜籽粕也是较好的植物性蛋白质源,在青鱼饲料中适量添加既有利于饲料的营养平衡,还可降低饲料成本;米糠作为青鱼的能量原料必须保持新鲜,并控制其在饲料中的用量。

2龄青鱼对7种饲料原料中营养物质的表观消化率

本试验旨在研究2龄青鱼对国产鱼粉、蝇蛆粉、玉米蛋白粉、大豆粕、花生粕、棉籽粕和菜籽粕中干物质、粗蛋白质、粗脂肪、总磷、总能和氨基酸的表观消化率。试验饲料由70％基础饲料和30％待测饲料原料组成，并以0．5％的三氧化二铬（Cr2O3）为外源指示剂。选取平均体重为（190．98±1．81）g的2龄青鱼216尾，随机分成8组，每组3个重复，每个重复9尾鱼。对照组试验鱼饲喂基础饲料，试验组试验鱼随机饲喂1种试验饲料。饲喂1周后采用自排法收集粪便待测。结果表明：7种饲料原料中干物质、粗蛋白质、粗脂肪、总磷、总能和总氨基酸的表观消化率的范围分别为61．68％-84．42％、81．44％-93．49％、64．41％-97．38％、39．94％-78．74％、70．47％-89．52％和83．57％-96．42％。在7种饲料原料中，玉米蛋白粉的干物质和总磷的表观消化率最高，而大豆粕的粗蛋白质、粗脂肪、总能和总氨基酸的表观消化率最高；棉籽粕的干物质、总磷和总能的表观消化率最低，蝇蛆粉的粗蛋白质和玉米蛋白粉的粗脂肪的表观消化率也最低。7种饲料原料中粗蛋白质表观消化率与总氨基酸表观消化率的变化趋势一致，且均以棉籽粕和蝇蛆粉较低。由此可见，2龄青鱼对大豆粕的利用效果最佳，其次是花生粕与国产鱼粉，这二者相当；玉米蛋白粉和菜籽粕也是2龄青鱼较好的植物性蛋白质源，可适量添加用于降低饲料成本；2龄青鱼对棉籽粕和蝇蛆粉中粗蛋白质和总氨基酸的表观消化率均较低，应控制其在饲料中的用量。

团头鲂(Megalobrama amblycephala)两种热休克蛋白70(HSP70s)的原核表达、纯化及鉴定

采用PCR方法扩增团头鲂组成型HSC70和诱导型HSP70基因完整的编码区片段,并分别克隆到原核表达载体pET-22b(+)中,然后转化大肠杆菌BL21(DE3),用1mmol/L IPTG在不同温度及时间下进行诱导表达。采用Ni-NTA His Bind Resins亲和层析和DEAE-Sepharose FF阴离子交换柱层析对目的蛋白进行纯化,并进行SDS-PAGE和Western-blotting分析。结果表明,成功构建了团头鲂两种重组表达质粒pET-22b(+)/Ma-HSC70和pET-22b(+)/Ma-HSP70,表达融合蛋白的相对分子量均约为72kDa,并能与兔抗人HSP70多抗进行特异性结合,这两种HSP70s融合蛋白经纯化后的纯度均达到95%以上。本实验选择融合蛋白Ma-HSC70在25℃和Ma-HSP70在30℃下分别诱导7h作为可溶性表达的最佳条件。

水产动物营养与饲料学课程建设的改革与实践

水产动物营养和饲料学是水产养殖学专业的一门核心课程,具有理论性和实践性并重的特点。为满足现代水产饲料行业对专业人才的需求,并结合地方院校应用型人才培养的目标,针对该课程在教学中存在的一些问题,重点对理论和实践教学内容、教学手段、教学方法和考核方式4个方面进行了教学改革与探索。教学实践表明,教学质量得到了明显提高,不仅激发了学生对该课程的学习兴趣,而且提高了学生的专业技能与综合素质,为学生就业或创业打下了坚实基础。

小肽吸收机制及其在水产动物饲料中的应用

综述了小肽的概念、分类、小肽的吸收机制和特点,并就小肽制品在水产动物饲料中的应用进行了详述,最后简述了影响水产动物利用小肽的因素以及小肽的研究现状和前景。

酶制剂在水产动物饲料中的应用

酶是活细胞产生的具有特殊生物催化功能的生物大分子物质（蛋白质或RNA），它广泛分布于动物、植物和微生物体内，参与机体的各种生化反应。酶制剂是一种以酶为主要功能因子，通过特定生产工艺加工而成的饲料添加剂。目前，酶制剂的研究主要集中在外源酶在畜禽饲料中的应用，大部分是关于酶制剂作用效果的研究。酶制剂在水产饲料中的应用还处在摸索阶段，本文就酶制剂在水产饲料中的合理应用进行了综述。

地方本科院校水产养殖学专业的建设与发展研究——以湖州师范学院为例

基于湖州师范学院新办水产养殖学专业建设面临的困难与挑战,应充分发挥水生生物学的学科优势,加强水产养殖学的专业宣传,强化专业思想教育,创立具有特色的水产养殖学专业人才培养模式,培养"厚基础、宽口径、强能力、高素质"的水产生物技术复合型人才,拓宽就业渠道,引导大学生自主创业,以确保水产养殖学专业的持续、稳定和快速发展。

通过科研活动提高大学生的实践创新能力

开展科研活动是高校提高学生综合素质、培养学生实践创新能力的重要途径。本文分析了当前高校大学生科研创新活动中存在的主要问题,结合大学生实践创新能力培养的主要目标,提出了提高大学生实践创新能力的主要措施,为推动高校的教学改革,培养高素质创新型人才提供参考意见。

大学生创业教育的现状及对策

创业教育对于高校提升大学生的就业能力,拓宽就业渠道,以创业带动就业等都具有重要的现实意义。目前我国的创业教育已初见成效,但在教育模式、内容、实践等诸多方面存在着亟待解决的问题。本文在分析创业教育现状的基础上,从人才培养模式、创业氛围、高素质师资队伍和构建创业实践平台等多个方面提出提升高校大学生创业教育的有效途径。

基于SSIM与ROI的视频质量评价方法

在客观结构相似视频质量评价模型SSIM基础上,提出了一种基于感兴趣区域(ROI)的视频质量评价方法,方法通过对帧内感兴趣区的提取,对帧内分块计算的SSIM值进行加权。该方法具备了SSIM算法的简单、高效等特性,同时又融合了人类感兴趣区域这一视觉特性,使得算法更好的反映了人的主观感受。在VQEG PhaseI测试数据集的实验结果表明,该方法的非线性回归后相关系数、斯皮尔曼相关系数、线外率等指标均优于传统的其他视频质量评价算法,有效地提高了视频客观评价与主观评价的相关度。