染色体平衡性结构畸变携带者的生育风险研究

目的:研究染色体平衡性结构畸变携带者的生育风险,为遗传咨询与优生优育提供参考依据。方法:回顾性收集2012年1月至2023年7月就诊于梧州市工人医院的69例染色体平衡性结构畸变携带者的生育史及临床资料,按照染色体畸变类型、性别进行分组,评估各组的生育风险。结果:(1)69例染色体平衡性结构畸变携带者中20.29%(14例)既往无妊娠史,79.71%(55例)既往有妊娠史,31.88%(22例)既往生育有表型正常的后代。既往有无妊娠史、是否生育有表型正常的后代在相互易位组、罗氏易位组、倒位组3组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)55例有妊娠史的平衡性结构畸变携带者中,共妊娠158例次,其中自然流产或稽留流产的发生率为79.75%(126/158),活产缺陷儿的发生率为6.33%(10/158),生育表型正常后代的发生率为13.92%(22/158)。自然流产或稽留流产的发生率、活产缺陷儿的发生率、生育表型正常的后代的发生率在相互易位组、罗氏易位组、倒位组3组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)男性携带者其配偶自然流产或稽留流产的发生率为81.66%,活产缺陷儿的发生率为6.67%,生育表型正常后代的发生率为11.67%,女性携带者自然流产或稽留流产的发生率为83.67%,活产缺陷儿的发生率为6.12%,生育表型正常后代的发生率为10.21%,两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(4)无妊娠史的平衡性结构畸变携带者中,男性多表现为精子异常,女性主要表现为原发性不孕、闭经等。结论:染色体平衡性结构畸变携带者的自然妊娠风险很大,以自然流产及稽留流产为主,但仍可通过自然受孕获得表型正常的后代,染色体平衡性结构畸变可影响男性与女性的生育能力,导致不孕不育。

一种改良大鼠心脏采血方法的探讨

在医学研究中,大鼠的应用最为广泛.统计表明[1],医学生物学的科学研究课题半数以上是用鼠类动物来完成的.大鼠的血样采集技术已成为科学研究中一项最基本、也是最重要的技术和方法,但大鼠采血技术一直又是困扰实验者的一个难题.目前已有的采血方法有剪尾采血、眼眶后采血、舌下静脉采血、阴茎背静脉采血等,这些方法往往因其操作问题导致溶血、采血量不够或不能重复采血而影响实验进程和结果.目前虽有实验者总结了一套比较成熟的大鼠心脏采血方法[2],但在实际操作中仍存在一些问题,如因心脏定位不够准确、麻醉状态不好加上固定不牢导致心脏穿刺失败,进而导致心包积血而死亡等.我们在参考文献和结合自己工作经验的基础上,主要介绍改良的实验模型大白鼠活体的心脏采血方法和操作体会,以供参考.

1986~2022年广西梧州地区遗传咨询者细胞遗传学检测结果及变化分析

目的探讨梧州地区遗传咨询者染色体异常与临床表型的关系及异常核型分布与变化的特点。方法选取1986年1月~2022年10月前来梧州市工人医院进行遗传咨询的4346例患者,通过外周血淋巴细胞培养及G显带法对染色体核型进行分析,并分析Ⅰ阶段(1986~2019年),Ⅱ阶段(2020~2022年)异常核型的分布与变化的特点。结果4346例遗传咨询者中检出染色体异常304例,异常核型检出率6.99%,其中21三体检出率最高,为3.18%(138/4346),占所有异常核型的45.39%(138/304)。异常核型构成比依次为21三体、平衡易位、47,XXY,45,X,罗氏易位、染色体片段缺失/重复、47,XXX和倒位。此外,检出13三体3例,19三体1例,8三体1例,47,XN,+mar 5例,性染色体不一致嵌合7例,性反转7例。平衡易位、倒位的构成比在Ⅱ阶段(2020~2022年)分别为24.59%,8.20%,高于Ⅰ阶段(1986~2019年)的9.88%,0.82%;而21三体的构成比在Ⅱ阶段(2020~2022年)为14.75%,低于Ⅰ阶段(1986~2019年)的53.09%,两阶段比较,差异均具有统计学意义(χ^(2)=9.439,8.735,28.904,均P<0.05)。而47,XXY,45,X,罗氏易位等异常核型的构成比在两阶段间的比较,差异均无统计学意义(χ^(2)=0.192,0.000,1.313,均P>0.05)。在Ⅱ阶段(2020~2022年),常染色体数目异常及片段缺失/重复的患者在1岁之前被确诊占78.57%,高于Ⅰ阶段(1986~2019年)的63.38%,但两阶段比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.709,P=0.400)。在Ⅱ阶段(2020~2022年),性染色体异常的患者在12岁之前被确诊占27.78%,高于Ⅰ阶段(1986~2019年)的13.11%,但两阶段比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.238,P=0.266)。结论梧州地区遗传咨询者中异常核型检出率较高,尤其是21三体。近三年21三体的构成比下降,平衡易位、倒位的构成比显著上升,核型异常患者的确诊年龄有提前趋势。染色体异常是导致该地区的遗传咨询者存在出生缺陷、生长发育迟缓及不良孕产史等症状的原因之一,对具有相应临床指征的患者行染色体核型分析具有重要临床意义。

FGF-21的研究进展

人成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)是最新发现的和糖脂代谢有关的因子。FGF-21能改善胰岛β细胞的功能;FGF-21能促进脂肪组织中的葡萄糖吸收,减少脂肪堆积,并可在过氧化物酶体增生物激活受体PPARα调节下,可以作为肝脏中稳定的脂类调节剂,避免脂肪肝的发生;FGF-21是FGFs家族中目前发现的唯一没有促有丝分裂的基因,从而大大降低了临床用药的风险。目前FGF-21已成为国际上研究的热点基因。本文着重描述了FGF-21的来源与结构、生物学功能、表达纯化及其发展前景。

乳糖诱导成纤维细胞生长因子-21在大肠杆菌中的表达

[目的]研究用乳糖作为诱导剂诱导成纤维细胞生长因子-21(fibroblast growth factor 21,FGF21)基因重组蛋白的表达,以探讨其工程化生产的可能性。[方法]对影响重组表达产物的乳糖诱导浓度、诱导时机、诱导时间及诱导温度等进行比较,并以IPTG诱导作为对照,确定最佳的乳糖诱导条件。[结果]对于重组目的蛋白,乳糖可以起到很好的诱导效果,诱导产物的表达量与IPTG诱导产物相当。其最佳表达条件为:在A600为0.8～1.0时,加入乳糖至终浓度为0.5 g/L,在35℃下诱导6 h。[结论]乳糖可诱导FGF21基因表达,并取得良好效果,为工程化生产提供了试验数据和借鉴。

综合与自主设计实验在医学检验专业课学习的体会

自主设计性实验是在系统学习完基础与专业理论与实验课程之后,根据已掌握的基本理论与实验技术和学科的前沿知识与临床疾病的诊断密切相关而实验课中没有涉及的,结合自己感兴趣的题目自主创新设计而完成的实验。自主设计实验不仅激发了我们主动参与实验的热情,培养创新意识,提高动手操作和独立思考的能力,而且通过小组内成员的团结协作、相互配合,培养了团队意识,增强了医学检验专业学生的责任感和主人翁意识。

染色体分散仪在外周血染色体标本制备中的应用

目的探讨Thermotron Model CDS-5染色体分散仪在外周血染色体制备中的应用。方法使用染色体分散仪控制染色体滴片时的环境温度及湿度,在不同温度/湿度组合下制备染色体并对制备成功率、分散效果进行分析。同时与传统滴片法制备染色体的成功率、分散效果进行比较。结果在一定温度和相对湿度范围内,升高温度和湿度可以提高染色体的制备成功率和分散效果。超过温度和湿度阈值时,染色体制备成功率、分散效果反而下降。将Thermotron Model CDS-5染色体分散仪温度设为25℃,湿度设为55%时,染色体分散效果最好。染色体制备成功率、分散效果优于传统滴片法(P<0.001)。结论Thermotron Model CDS-5染色体分散仪在最佳温度/湿度组合下可制备出优质的染色体,提高染色体核型分析的准确性,值得向各实验室推广。

复合因素法致大鼠肝纤维化模型的建立

目的探讨一种新的制备肝纤维化动物模型的方法,为下一步研究肝纤维化发生机制、治疗方案提供稳定、可靠的动物模型。方法将80只雄性Wistar大鼠随机分成两组,对照组腹腔内注射橄榄油2 mL/kg,2次/周,并给予普通饮水及饲料。模型组采用腹腔注射猪血清+四氯化碳(CCl4)+高脂低蛋白饲料(10%猪油、2%胆固醇)+普通饲料+乙醇进行诱导。共8周,实验结束进行肝功能生化指标测定及病理学观察并加以评估。结果模型组70只,造模结束时死亡10只,死亡率14.3%。血清ALT、AST、ALP、GGT和Hyp与正常对照组有显著性差异(P<0.01),病理切片均可看到明显的肝纤维化形成,造模成功60只,成模率85.7%。对照组10只全存活。结论该方法可成功建立肝纤维化模型,为实验研究应用。

外周血染色体吉姆萨显带制备条件优化研究

目的对外周血染色体吉姆萨显带制备条件进行优化,以提高染色体制备成功率。方法选取2021年4月~2022年4月因不孕不育就诊于梧州市工人医院生殖医学中心的116例成年患者的外周静脉血为研究对象,其中单因子梯度实验15例,正交实验设计1例,优化前组50例和优化后组50例。在现有染色体制备体系基础上,通过单因子梯度实验对影响外周血染色体制备成功率的秋水仙素作用浓度、作用时间及低渗处理时间进行优化,根据单因子梯度实验结果进行3因素3水平正交实验设计,以染色体制备成功率最高的条件组合作为最适的外周血染色体制备体系。并进一步对优化前、后两组<320带,320~400带和400~550带的分裂相所占比例进行比较分析。结果单因子梯度实验结果表明,染色体制备成功率随着秋水仙素作用浓度、作用时间及低渗处理时间的增加均呈先升高后下降趋势。在秋水仙素不同作用浓度实验中,当秋水仙素作用浓度为0.24μg/ml时染色体制备成功率最高,达67.67%;在秋水仙素不同作用时间实验中,当秋水仙素作用时间为30 min时染色体制备成功率最高,达62.33%;在不同低渗处理时间实验中,当低渗处理时间为35 min时染色体制备成功率最高,为64.17%。根据单因子梯度实验结果,秋水仙素作用浓度设置0.20,0.24,0.28μg/ml三个水平,秋水仙素作用时间设置25,30和35 min三个水平,低渗处理时间设置30,35,40min三个水平,进行正交实验设计。结果表明秋水仙素作用浓度为0.24μg/ml,秋水仙素作用时间30 min,低渗处理时间40 min是外周血染色体制备最适体系。优化前组吉姆萨显带<320带的分裂相占比(64.30%)显著高于优化后组(43.78%),差异具有统计学意义(χ^(2)=508.443,P<0.001);优化后组320~400带,400~550带分裂相占比(40.30%,15.29%)均显著高于优化前组(33.12%,2.58%),差异具有统计学意义(χ^(2)=66.629,635.346,均P<0.001)。结论经优化后确定的染色体制备体系可提高染色体制备成功率,值得临床应用与推广。

嵌合型8号三体综合征1例并文献复习

8号三体综合征是一种比较罕见的染色体异常性疾病,目前的临床病例报道中的以产后嵌合型8号三体为主,约占2/3以上,新生儿中的发病率约1/25000~1/50000,且男性∶女性约为5∶1[1,2]。细胞嵌合比例与临床严重程度并不相关,偶有核型为纯合型8号三体,临床表型正常,仅表现为生殖障碍的病例报道,其中确切机制尚未明了[3]。由于较大的遗传异质性和临床表型变异度,给产前诊断、遗传咨询和预后风险评估带来一定的困扰。

瞬时弹性成像技术评价恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎的效果

目的利用瞬时弹性成像技术检测肝硬度值评价恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎的临床效果。方法利用瞬时弹性成像技术动态监测实验组30例(恩替卡韦+常规护肝治疗)和对照组30例(常规护肝治疗)慢性乙型肝炎患者治疗12、24、48周后硬度值、肝功能复常率的变化。结果实验组治疗12、24、48周后肝硬度值均明显低于治疗前,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗24和48周后,实验组肝硬度值明显低于同期对照组,肝功能复常率明显高于同期对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论瞬时弹性成像技术能动态、定量监测肝纤维化的程度,可用于评估肝脏疾病治疗效果;恩替卡韦抗病毒治疗慢性乙型肝炎效果明显,对抑制肝纤维化具有一定的临床疗效。

新生儿13三体综合征1例

患儿男,系G4P4,孕38+4周经剖宫产娩出,羊水Ⅱ度浑浊,脐带与胎盘未见异常。患儿出生后因"口唇与四肢肢端发绀、呼吸与反应欠佳6 h"于2021年10月24日转入梧州市工人医院就诊。患儿母亲43岁,父亲52岁,否认近亲结婚及家族遗传病史,已育有2女1子,均健康。孕期未进行常规产检,无特殊不适。

母源性46,XX,der(13)t(11;13)(q23;p12)染色体非平衡易位的细胞遗传学分析

目的 对1例面容特殊,头发、眉毛稀疏,鼻梁低平,低位耳,眼距过宽,腭弓高,嘴角下垂,颈短,通贯掌,全身皮肤薄而光滑,先天性心脏病表现的患儿进行细胞遗传学分析,探索临床表型与细胞遗传学因素的相关性。方法 应用G显带染色体核型分析技术对患儿及其父母外周血进行细胞遗传学检测。结果 G显带染色体核型分析显示患儿母亲核型为46,XX,t(11;13)(q23;p12),患儿父亲核型为46,XY,患儿核型为46,XX,der(13)t(11;13)(q23;p12)mat。患儿携带母源性染色体非平衡易位,为11q23→qter片段重复。结论 患儿的临床表型与11号染色体长臂部分片段重复有关,通过染色体家系调查明确了患儿病因,也发现了其母亲既往的复发性流产的根源,对该家庭下一次生育的优生优育指导具有重大的临床意义。

同型半胱氨酸、视黄醇结合蛋白与血脂在单纯性肥胖中的表达意义分析

目的探讨Hcy、RBP与血脂水平在单纯性肥胖中的相关性及意义。方法选择430例肥胖者(肥胖组)和440例健康体检者(对照组)为研究对象,测定人体体质参数和血清Hcy、RBP、血脂等。结果肥胖组血清Hcy、RBP、血脂水平显著高于对照组;男性血清Hcy、RBP水平显著高于女性,高年龄组血清Hcy水平显著高于低年龄组,差异均有统计学意义(P<0.05);高年龄组血清RBP水平与低年龄组相比,差异无统计学意义(P>0.05);血清Hcy与RBP、TG、LDL呈正相关(r值分别为0.237、0.198、0.147,P<0.05);与HDL呈显著负相关(r=-0.244,P<0.01)。多元逐步回归分析,HDL、RBP是血清Hcy水平的独立相关因素(P<0.05)。结论肥胖患者血清Hcy、RBP、血脂水平表达明显紊乱,Hcy、RBP、血脂水平在肥胖相关性疾病中发挥重要作用。

单纯性肥胖个体血清视黄醇结合蛋白水平的变化与总蛋白、白蛋白的相关性研究

目的探讨单纯性肥胖个体血清视黄醇结合蛋白(RBP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)水平及相关性。方法 870例研究对象分为肥胖组和对照组,测定人体体质参数,血清生化指标:RBP、TP、ALB、血糖、血脂等。结果肥胖组血清RBP、TP、ALB水平显著高于对照组(P<0.01);总体分析,血清RBP水平与体质量指数(BMI)、腰围(WC)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、TP、ALB呈显著正相关(P<0.05),与性别、HDL呈显著负相关(P<0.05);与年龄、空腹血糖(FPG)无显著相关性(P>0.05)。多元逐步回归分析,性别、BMI、ALB、TC是血清RBP水平的独立相关因素。结论肥胖患者血清RBP、TP、ALB水平均显著升高,且存在性别特异性差异,RBP与TP、ALB、血脂水平密切相关。