大鼠源肺孢子菌p55基因片段真核表达质粒的构建及表达

目的构建大鼠源肺孢子菌抗原p55基因片段真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞COS-7中的有效表达。方法以含有p55全长基因的质粒为模板,通过PCR扩增p55基因片段,克隆至pGEM-T载体中,经酶切后再将p55基因重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入COS-7细胞,RT-PCR检测其基因转录情况,SDS-PAGE鉴定其表达相应的目的蛋白质情况。结果成功扩增了p55基因片段,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,RT-PCR和SDS-PAGE方法证实该片段能在COS-7细胞中有效表达目的蛋白质。结论成功构建了大鼠源肺孢子菌p55基因片段的真核表达质粒载体,并在COS-7细胞中表达,为进一步进行核酸疫苗的研究奠定了基础。

纳氏试剂比色法测定工作场所空气中氨的研究

氨是化学工业的主要原料，应用于化肥，炼焦．塑料，石油精炼，制药等行业，一些行业的副产物中也有氨的存在。氨对口，鼻粘膜及上呼吸道有很强的刺激作用。氨是职业卫生监测的一项重要指标。工作场所中氨的测定主要是依据职业卫生标准GBZ／T160．29—2004．但在实际工作中发现存在诸多问题，为此我们作了相应的改进研究。

高效液相色谱法测定止咳糖浆中盐酸麻黄碱的含量

目的建立测定止咳糖浆中盐酸麻黄碱的含量测定方法。方法采用高效液相色谱C18柱，流动相为乙腈-0．1％磷酸（5：95），流速为1.0ml／min，检测波长办206nm。结果盐酸麻黄碱在32~160μg范围内有良好的相关性，r＝0-9999，回收率为98．99％，RSD为0．9％（n=6）。结论该法简便，专属性强。