1966例乙肝患者HBV标志物与HBVDNA定量检测结果分析

目的:探讨对荧光定量PCR(FQ-PCR)测定的HBV-DNA的临床价值。方法:1 966例份临床血清标本用FQ-PCR方法进行HBVDNA定量测定,并和ELISA两对半以及ALT结果进行比较分析。结果:HBV DNA阳性率为55.55%(1 099/1 966),其中大三阳HBV-DNA检出率为89.81%(763/866)、ALT升高为43.41%(376/866)、小三阳HBVDNA检出率为33.81%(313/924)、ALT升高26.08%(241/924)、单HBSAg18.01%为(13/72);单抗HBe HBVDNA检出率4.31%(1/23)。结论:单HBeAg、抗HBcIgM等血清学标志判断,乙肝病毒复制是远远不够的,只有HBVDNA才是乙型肝炎病毒复制和传染性的直接病原学依据。这种实时跟踪定量检测的荧光定量PCR技术可以检测HBV的真实感染和复制情况,它和ELISA法检测的血清学指标相结合,具有临床价值。

江西省献血员中SEN病毒感染现状的研究

目的了解江西省各地区献血员中SEN病毒(SENV)感染现状。方法采用套式PCR技术对江西省379例献血员血浆标本进行SENV-DNA检测。结果379例献血员中有75例SENV-DNA阳性,占19.79%。其中,上饶最高,占36.54%(19/52),其次是抚州28.52%(12/42),吉安、九江均为18.52%(10/54),南昌18.19%(8/44),宜春13.75%(11/80),赣州为最低9.43%(5/33)。结论江西省各地区献血员中存在SENV感染。

实时跟踪荧光PCR定量检测乙型肝炎病毒DNA的临床意义

目的探讨实时跟踪荧光PCR定量检测乙型肝炎病毒DNA临床价值。方法对2 367例临床血清标本用FQ-PCR方法进行HBV-DNA定量测定,并和ELISA两对半以及ALT结果进行比较。结果HBV-DNA阳性率为60.9%(1 442/2 367),其中大三阳HBV-DNA检出率为89.04%(845/949)、ALT升高47.84%(454/949)、小三阳HBV-DNA检出率为39.08%(408/1 044)、ALT升高33.42%(349/1 044)、单HBSAg63.8%(185/290);单抗HBe HBV-DNA检出率4.54%(1/22)。结论实时跟踪定量检测的荧光定量PCR技术可以检测HBV的真实感染和复制情况是乙型肝炎病毒复制和传染性的直接病原学依据。

151例血清抗-HCV阳性患者的HCV RNA检测分析

目的 :探讨丙型肝炎抗体 (抗 HCV)和丙型肝炎病毒核糖核酸 (HCVRNA)的关系。方法 :研究对间接ELISA法检测抗 HCV阳性患者的血清进行HCVRNA检测 (采用RT PCR法 )。结果 :15 1例血清抗 HCV阳性患者有 85例HCVRNA阳性 ,阳性率为 5 6.2 %。另外 ,还观察了 4 0例抗HCV阳性病人的双份血清 ,急性期第一份血清ALT升高、HCVRNA为阳性 ;经抗病毒治疗后的第二份血清 ,部分病人ALT复常 ,HCVRNA阴转 ,另外部分病人反复ALT异常 ,HCVRNA则始终为阳性。结论 :HCVRNA能鉴别活动性HCV感染及非活动性感染 。

一种快速检测流行性出血热IgM抗体的方法

目的 :探讨一种快速检测流行性出血热 (EHF)IgM抗体的检测方法 ,为早期诊断流行性出血热提供诊断依据。方法 :将纯化的流行性出血热病毒抗原经胶体金标记 ,配合抗人 μ链抗体 ,和病人血清进行金标斑点渗透试验。结果 ;检测 2 8份临床诊断为EHF的患者血清标本 ,2 7份EHF IgM抗体阳性 ,1份阴性 ,符合率为 96 .4% ;检测 16份非EHF患者的血清标本 ,1份EHF IgM抗体阳性 ,15份为阴性。EHF IgM抗体在病程第二病日即可检测到。结论 :提示胶体金标斑点渗透法检测流行性出血热IgM抗体 ,操作简便快速 ,敏感性高 ,特异性强 。

江西省丙型肝炎病毒的基因型分布

目的 :探讨江西地区HCV基因型分布。方法 :限制性片断长度多态性分析 (RFLP)分析 89例HCV RNA阳性病人HCV的基因型。结果 :89例HCV RNA阳性者中 ,HCVⅡ型 81例 ,占 91.0 1% (81/ 89) ;HCVⅢ型 7例 ,占7.87% (7/ 89) ;HCVⅡ /Ⅲ混合型 1例 ,占 1.12 % (1/ 89)。HCVⅡ型 81例中 ,急性丙型肝炎 5例 ;慢性丙型肝炎75例 ,占 92 .6 % ;肝功能正常 ,HCV慢性携带者 1例。HCVⅢ型 7例中 ,急性丙型肝炎 3例 ;慢性丙型肝炎 4例 ,占 5 7%。HCVⅡ /Ⅲ混合型 1例 ,为急性丙型肝炎。结论 :江西省丙型肝炎基因型以Ⅱ型为主 ,占 91.0 1%。与HCVⅢ相比较 ,HCVⅡ型感染与慢性肝炎有更密切关联。

南昌地区丙型肝炎病毒感染的初步调查

丙型肝炎呈世界性分布,我国北京、天津、河北固安县都有报导,江西尚未有此报道。为了解测定南昌地区丙型肝炎病毒(HCV)感染情况,我们于1992年元月～1992年7月对本地区献血员、丙肝高危人群、无症状高谷丙转氨酶(ALT)血症及本院住院成人肝炎患者共810人进行了抗HCV检测,现将结果报告如下。

血凝抑制试验对流行性出血热血清学诊断价值

应用血凝抑制试验（HI）检测169份流行性出血热病人血清，并与间接免疫荧光抗体（IFA）、反向被动凝集试验（RPHA）比较。三种方法的检测结果一致（X1^2=13.91,X2^2=31.85,X3^2=15.81),HI试验表明，它既可用于疾病的早期诊断，又可作为抗体分型，还可进行流行病学监测。

胃病患者胃粘膜中乙肝病毒的研究

本文通过免疫组化对17例与肝炎或乙肝五项阳性有关的,13例与之无关的共30例胃病患者的胃粘膜进行了HBsAg的检测。结果显示:10例胃粘膜中存在HBsAg的感染,且胃体部HBsAg阳性程度明显高于胃窦部;胃粘膜HBsAg阳性率与血液中乙肝五项阳性项数增加呈正相关(P<0.01)。笔者认为HBsAg侵犯到肠粘膜的主要途径可能是肝脏乙肝病毒复制,经血液传播到胃。

拉米夫定治疗慢性乙肝的疗效及乙肝病毒YMDD变异的研究

目的评价拉米夫定治疗慢性乙肝病人的1年疗效、乙肝病毒YMDD变异率、变异与治疗前HBV-DNA、ALT水平的联系。方法治疗组按入选标准随机选择32例慢性乙型肝炎患者给予拉米夫定100 mg/d并随访1年,并于治疗开始后3、6、9、12个月检测肝功能、HBV-M、HBV-DNA、YMDD变异。对照组随机选择36例从未接受抗病毒治疗的HBV-DNA阳性、ALT异常的慢性乙型肝炎患者,检测YMDD变异株。结果①拉米夫定治疗一年,HBV-DNA转阴率71.88%(23/32),HBeAg/HBeAb血清转换率18.52%(5/27),ALT复常率62.5%(20/32);治疗前及治疗12个月后ALT水平分别为132.59±66.07、49.78±27.94,治疗前后差别有统计学意义(P<0.001)。②治疗组在治疗前未发现YMDD变异,治疗6个月发现2例YMDD变异,变异率6.25%,治疗12个月发现5例YMDD变异,变异率15.63%;对照组36例从未接受抗病毒治疗的慢性乙型肝炎病人中检测出2例YVDD变异株与野生株共存。③治疗前ALT<3×ULN组及≥3×ULN组YMDD变异率分别为11.76%、20.00%,两组差别无统计学意义(P=0.645);治疗前HBV-DNA<106copies/mL组及≥106copies/mL组YMDD变异率分别为5.88%、26.67%,两组差别无统计学意义(P=0.161)。结论拉米夫定能迅速抑制乙肝病毒复制、改善肝功能;治疗前HBV-DNA水平及ALT水平不足以预见YMDD变异的发生;乙肝病毒YMDD变异株存在于未使用拉米夫定的慢性乙肝患者中,建议在抗病毒治疗前对YMDD变异进行常规检测。

16SrRNA基因聚合酶链反应快速检测烧伤脓毒症细菌病原体的研究

目的为早期诊断烧伤脓毒症,探索一种能迅速检测细菌感染的方法。方法按标准收集可疑脓毒症患者39人外周静脉血标本共41份。将每份标本一分为二分别行血培养和用细菌通用引物行16SrRNA基因聚合酶链反应检测,用琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物,比较两种方法在检测细菌病原体时的快速性和敏感性,分析血培养及药敏结果。结果16SrRNA基因PCR方法的阳性率(41.16%)是血培养阳性率(21.95%)的近两倍,P<0.05。16SrRNA基因PCR方法出结果需4、5h,血培养需12～24h(多数需2、3d)。9例血培养阳性患者中,8例为单一铜绿假单孢菌感染,1例为单一溶血链球菌感染。结论16SrRNA基因PCR检测细菌感染的方法具有特异性、快速性、敏感性的优点。在该中心,使用抗生素治疗后,引起脓毒症的细菌主要为铜绿假单孢菌,该菌对目前常用广谱抗生素耐药。

土鳖四逆散对肝纤维化大鼠TGF-β_1和α-SMA表达及肝损伤的影响

目的:研究土鳖四逆散对肝纤维化大鼠TGF-β1(转化生长因子)和α-SMA(平滑肌肌动蛋白)的表达及肝损伤的影响。方法:建立大鼠肝纤维化模型,随机分组治疗:土鳖四逆散组、秋水仙碱组、模型组、空白组。每组10只,各组以药物分别处理8周后处死大鼠取材。结果:土鳖四逆散组TGF-β1和α-SMA的表达极少,秋水仙碱组的表达稍强,而模型组TGF-β1和α-SMA的表达极强。土鳖四逆散组与模型组相比差异极显著。肝组织病理显示,土鳖四逆散组的肝小叶结构改变不大,模型组肝内纤维结缔组织增生,假小叶形成;土鳖四逆散组血清转氨酶轻度升高,而秋水仙碱组与模型组血清转氨酶水平明显升高,三者比较有极显著性差异。结论:土鳖四逆散具有抗肝纤维化及护肝作用,其机理与降低纤维化肝内的TGF-β1和α-SMA的表达有关。

拉米夫定治疗乙型肝炎后病毒YMDD变异与HBV-DNA基线水平的关系

目的探讨拉米夫定治疗乙型肝炎后病毒YMDD变异与治疗前HBV-DNA基线水平的关系。方法32例慢性乙型肝炎患者采用拉米夫定片,100 mg/次,口服,1次/d,并随访1年。于治疗后第3、6、9、12个月采用全自动生化分析仪检测肝功能,用ELISA方法检测HBV-M水平,用荧光定量PCR方法检测HBV-DNA水平,用PCR-RFLP方法检测YMDD变异。结果拉米夫定治疗12个月,HBV-DNA转阴率71.88%(23/32),HBeAg转阴率25.93%(7/27),HBeAg/HBeAb血清转换率18.52%(5/27),ALT复常率62.50%(20/32);治疗前ALT水平为(132.59±66.07)U/L,治疗6个月ALT水平为(46.28±17.89)U/L,治疗12个月ALT水平为(49.78±27.94)U/L,治疗前与治疗6、12个月比较,均有非常显著性差异(P均<0.001);32例患者在治疗前均未发现YMDD变异,治疗12个月发现5例YMDD变异,一年期总变异率15.63%,其中DNA<106copies/mL组1例,变异率为5.88%,DNA≥106copies/mL组4例,变异率26.67%,两组之间无显著性差异(P=0.161)。结论治疗前HBV-DNA水平不能预见YMDD变异的发生;随着拉米夫定用药时间的延长,出现变异株的病例增加;变异株被检出时HBV-DNA水平均未超过用药前的水平。

乙型肝炎e抗原时间分辨荧光免疫分析法定量测定在慢性乙型肝炎诊断和治疗中的价值

目的探讨采用时间分辨荧光免疫分析法(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)定量检测慢性乙型肝炎(CHB)患者血清乙型肝炎e抗原(HBeAg)在CHB诊断和治疗中的临床价值。方法对257例CHB患者血清标本采用TRFIA和酶联免疫吸附测定法(ELISA)两种方法检测HBeAg,同时采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测HBV DNA含量,并对两种方法检测HBeAg的定性结果及TRFIA对HBeAg定量值与HBV DNA表达水平进行分析。结果257例临床标本中,ELISA法HBeAg阳性115例,阴性142例;TRFIA法检测定量值HBeAg≥0.03NCU/ml(即阳性)121例,HBeAg<0.03 NCU/ml(即阴性)136例;与ELISA比较,TRFIA法测定HBeAg的敏感度99.1%,特异度95.1%,两种检测方法定性结果差异无统计学意义(χ2=3.125,P>0.05);HBV DNA定量阳性率、拷贝数的高低与HBeAg在不同范围的定量值比较差异有统计学意义(χ2=180.090,P<0.05),随着HBeAg定量逐渐增高,HBV DNA阳性率也逐渐增加。结论TRFIA法定量检测HBeAg能更好地反映CHB患者体内HBV复制水平,对HBV感染的诊断、治疗方案的选择及疗效判定有更重要的临床意义。

探讨前C区A1896变异与乙型肝炎病毒相关的进展性肝病的关系

目的探讨前C区A1896变异与乙型肝炎病毒(HBV)相关的进展性肝病的关系。方法选择172例HBV感染者,采用PCR-RFLP进行A1896变异的检测,并对其临床意义进行分析。结果172例患者A1896变异的总体检出率为45.9%。在A1896变异株和野生株中,慢性无症状携带者(ASC)、慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)、慢性重型肝炎(CSH)、肝细胞癌(HCC)的构成比差异有统计学意义(P<0.05)。CHB、LC、CSH、HCC的A1896变异率分别为39.7%、52.0%、50.0%、74.1%,显著高于ASC的12.5%(P<0.05)。进展性肝病(包括CSH、LC、HCC)的A1896变异率为59.0%,显著高于CHB的39.7%(P<0.05)。慢性乙型肝病不同临床类型的A1896的野生株、变异株构成比差异无统计学意义(P>0.05)。HBeAb阳性组的A1896变异率为73.2%,显著高于HBeAg阳性组的28.1%(P<0.05)。A1896野生株HBeAg阳性率显著高于变异株(45.2%vs 19.0%,P<0.05)。变异株HBV-DNA复制的均数水平显著高于野生株[(9.55±4.65)lg copies.L-1vs(10.35±4.49)lg copies.L-1,P<0.01]。结论A1896变异与HBV相关的进展性肝病有关,但与CHB的炎症活动程度无关。A1896变异株的HBeAg阴性率和HBV-DNA病毒载量较野生株高,前者使HBV易逃避免疫清除,后者引起疾病逐步进展。

CD_(28)的表达在乙型肝炎病毒感染免疫耐受机制中的作用

目的 探讨乙肝病毒携带者外周血T淋巴细胞上的CD28表达在乙肝病毒感染免疫耐受机制中的作用以及影响其CD28表达的可能因素。方法 选择其血清中HBsAg、HBeAg、抗HBc-IgM和HBVDN均为阳性的乙肝病毒携带者(肝功能正常)35例;正常对照组11例以及急性乙型肝炎患者5例。分别采用流式细胞学、细胞RNA提取和RT-PCR等技术,检测实验对象外周血单核细胞上的CD_4、CD8、CD_(28)和CD_(25)等蛋白分子的表达情况,CD_(28)mRNA的含量以及外周血单核细胞中HBVDNA的存在情况。结果 (1)乙肝病毒携带者外周血T淋巴细胞(CD_4和CD_8T淋巴细胞)上CD_(28)的表达低下,尤以CD_8T淋巴细胞更为明显(CD_(28)/CD_4为14.42％,CD_(28)/CD_8为7.39％);而正常对照组(CD_(28)/CD_4为24.57％,CD_(28)/CD_8为29.54％)和急性乙型肝炎组(CD_(28)/CD_4为26.25％,CD_(28)/CD_8为18.42％)则均有较高的表达。其与乙肝病毒携带者的结果相比较,有着显著或非常显著之差异(P<0.05,P<0.01)。同时,通常用于表示T淋巴细胞激活状态的CD_(25)在乙肝病毒携带者的外周血T淋巴细胞上的表达也低下(CD_(25)/CD_4为9.10%,CD_(25)/CD_8为7.93％),特别是以CD_8T淋巴细胞上的表达低下尤为明显。其与正常对照组的相应结果(CD_(25)/CD_4为4.2％,CD_(25)/CD_8为1.48％)相比?

YMDD变异后HBeAg(+)患者病情进展及处理的临床研究

目的研究经拉米夫定(LAM)治疗出现YMDD变异且HBeAg(+)的慢性乙型肝炎患者病情的进展及预后;观察阿德福韦酯(ADV)的临床疗效。方法将60例患者随机分为两组,治疗组采用ADV与LAM联合治疗12周,后单用ADV治疗36周;对照组继续LAM并加强护肝治疗48周。结果YMDD变异后大部分患者HBVDNA的反弹和/或ALT的升高程度低于治疗前水平,少数出现轻度黄疸,临床表现轻微;两组治疗48周后ALT水平下降均显著,ADV组比对照组ALT水平、ALT复常率、HBV DNA转阴率差异显著(P≤0.001);结论ADV治疗YMDD变异,可获得较好的临床疗效。

口腔扁平苔藓与丙型肝炎病毒感染的关系研究

目的 :探讨口腔扁平苔藓与丙型肝炎病毒感染的关系。方法 :应用酶联免疫测定法和PCR技术分别对 80例口腔扁平苔藓患者、80例非扁平苔藓粘膜病患者及 80例健康人进行血液抗 -HCV和HCV -RNA检测。结果 :80例口腔扁平苔藓中 ,17例抗 -HCV阳性 ,明显高于疾病对照组 ( 4例 ) (P <0 .0 1) ,明显高于正常对照组 ( 2例 ) (P<0 .0 1) ;13例HCV -RNA阳性 ,明显高于疾病对照组 ( 4例 ) (P <0 .0 5 ) ,明显高于正常对照组 ( 2例 ) (P <0 .0 1) ;且 13例HCV -RNA阳性患者的损害均表现为白纹伴糜烂。结论 :OLP患者存在较高的HCV感染率 。

慢性乙型重型肝炎中TNF-α,IL1β,IL6与病毒含量关系的研究

目的探讨细胞因子TNF-α,IL1β,IL6在慢性乙型重型肝炎中与病毒含量的关系及其在重型肝炎中的作用和临床意义。方法60例慢性乙型重型肝炎中的血清标本进行HBVDNA和TNF-α,IL1β,IL6的测定,方法分别采用荧光定量PCR和ELISA法,并进行临床观察。结果慢性乙型重型肝炎中病毒载量不同组之间TNF-α,IL1β,IL6有显著性区别P<0.05病毒载量高时TNF-α活性值较高而IL1,βIL6则表现活性值低;另存活组病人TNF-α低,IL1,IL6升高较死亡组,P<0.05。结论慢性乙型重型肝炎中病毒含量一定程度上影响着细胞因子的变化,影响病情预后,对临床有一定的指导意义。