不同年龄小鼠骨来源间充质干细胞衰老相关特性与成骨分化能力的比较研究

目的探索不同年龄组小鼠骨来源的间充质干细胞(bone derived mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老相关的生物学特性及骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导成骨分化能力的改变。方法将8只C57BL/6J小鼠分为青年组(4周龄,体质量约为10~15 g,n=4)和老年组(12月龄,体质量约为20 g~25 g,n=4),每组雌雄各半。分别从2组小鼠的整骨中提取间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),通过流式细胞术鉴定2组BMSCs的表面标志物,通过β-半乳糖苷酶染色比较2组BMSCs的衰老程度,通过MTT和EdU掺入实验比较2组BMSCs的增殖及自我更新能力。通过Western blot分析2组BMSCs中周期蛋白CyclinD1、P21的表达情况。采用ALP染色和茜素红S染色及RT-qPCR评估2组BMSCs的体外成骨分化能力,使用RNA-seq分析比较2组BMSCs经BMP2诱导后的差异基因表达,并用流式分析验证测序结果。结果流式细胞术分析结果显示,分离培养的小鼠BMSCs符合间充质干细胞判定标准。β-半乳糖苷酶染色结果显示,老年组BMSCs的衰老水平显著高于青年组(P<0.05)。而MTT和EdU掺入实验结果表明,老年组BMSCs的细胞活力和增殖能力显著低于青年组(P<0.05)。Western blot结果显示,与青年组比较,老年组BMSCs的细胞周期蛋白CyclinD1表达水平较低,而细胞周期阻抑因子P21蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。ALP染色和茜素红S染色及RT-qPCR检测结果显示,BMP2诱导后青年组BMSCs的成骨分化能力显著高于老年组(P<0.05)。RNA-seq结果显示,BMP2诱导后,整合素αV重组蛋白(cluster of differentiation 51,CD51)在青年组和老年组中的表达趋势相反。而流式细胞术分析结果显示,青年组CD51^(+)细胞在CD45^(-)细胞中占比明显高于老年组(P<0.01)。结论老年组BMSCs中CD51^(+)细胞在CD45^(-)细胞中占比下降与CD51^(+)细胞对BMP2的成骨诱导响应性下降密切相关。

两种H9C2心肌细胞氧化损伤模型的比较

目的:探讨低氧、低糖及血清剥夺(glucose and serum deprivation under hypoxia(1%O_(2)),GSDH)处理与H_(2)O_(2)处理在构建H9C2心肌细胞氧化损伤模型中的应用价值。方法:培养H9C2心肌细胞,当细胞生长状态良好时,用低氧(1%O_(2))、低糖(1.0 g/L)及血清剥夺联合处理或200μmol/L的H_(2)O_(2)作用于心肌细胞24 h。采用CCK8实验检测细胞增殖能力;通过细胞凋亡试剂(annexinV-FITC/PI)、Hoechst染色检测细胞凋亡;细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测细胞氧化应激水平;BODIPY检测细胞脂质过氧化水平;过碘酸雪夫(periodic acid-schiff stain,PAS)染色检测细胞糖原合成能力;线粒体膜电位检测试剂(mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1,JC-1)染色检测线粒体膜电位水平;Western blot检测能量代谢相关分子AMP依赖的蛋白激酶(Adenosine 5’-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK)及氧化应激相关分子NAD(P)H醌脱氢酶1(NAD(P)H quinone dehydrogenase 1,NQO-1)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达水平。结果:与空白组比较,GSDH处理组与H_(2)O_(2)处理组的心肌细胞存活率均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白组相比,GSDH处理与H_(2)O_(2)处理都增加了心肌细胞的凋亡水平、ROS和脂滴堆积水平增高、糖原消耗量增加且线粒体膜电位降低。但相比于H_(2)O_(2)处理组,GSDH处理组的细胞糖原消耗增多更明显,脂滴堆积也更明显,并且AMPK磷酸化水平显著降低。结论:低氧、低糖及GSDH处理与H_(2)O_(2)处理均能造成H9C2心肌细胞氧化损伤,但相比于H_(2)O_(2)处理组,GSDH处理组的效果更符合体内心肌损伤时的能量代谢转变,有望作为一种更简单便捷的心肌氧化损伤模型应用于科研。

锑冶炼砷碱渣资源化利用及无害化处理研究现状

锑冶炼砷碱渣是粗锑精炼过程中产生的废渣,其中含有易溶于水的剧毒性砷酸钠,危害性大。目前,由于对砷碱渣资源化利用技术尚不成熟,我国已堆存了大量砷碱渣,极大地制约了锑冶炼行业的发展。本文对目前砷碱渣固废处理工艺现状进行了分析,对砷碱渣的主要处理方法进行了讨论。通过对比分析,认为对砷碱渣进一步处理而获得无毒且可作为半导体原料的金属砷是更为环保的研究方向。

低氧低糖及血清剥夺联合处理抑制Nrf2信号通路诱发大鼠骨髓间充质干细胞氧化应激和凋亡

目的探讨低氧低糖血清剥夺(GSDH)处理对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)氧化应激及凋亡的影响。方法在体外对提取纯化后的原代BMSCs利用低氧(1%O_(2))、低糖(1.0 g/L)及血清剥夺联合处理建立BMSCs细胞损伤模型。采用集落形成实验、细胞周期测定以及CCK-8实验检测细胞增殖能力;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力;通过细胞凋亡试剂(AnnexinV-FITC/PI)、线粒体膜电位检测试剂(JC-1)染色和线粒体荧光探针(Mito-Trancker)检测细胞凋亡;细胞活性氧簇(ROS)和钙离子(Fluo-4AM)检测细胞氧化应激水平;Western blotting检测抗氧化应激相关分子谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)等以及核因子红细胞系2相关因子2(Nrf2)信号通路中关键分子的蛋白表达水平。结果大鼠原代BMSCs表面标志物高表达CD29、CD71,低表达CD45、CD34;GSDH处理抑制BMSCs细胞增殖(P<0.05)和迁移(P<0.05),增加ROS和钙离子水平(P<0.05),且抑制抗氧化应激相关分子GPX4等蛋白表达(P<0.01);与空白对照组相比,GSDH处理后BMSCs凋亡显著升高(P<0.05),线粒体膜电位降低(P<0.01),网络化减少(P<0.01)。Nrf2信号通路中Nrf2蛋白及下游关键分子的蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论GSDH处理诱发的BMSCs氧化应激及进一步导致的凋亡损伤与Nrf2信号通路被抑制有关。

发动蛋白(dynamin)抑制剂Dyngo-4a在大鼠骨髓间充质干细胞内吞葡聚糖过程中存在脱靶效应

目的研究发动蛋白(DNM)抑制剂Dyngo-4a在依赖DNM的内吞途径中可能存在的脱靶作用。方法分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)并进行流式细胞术鉴定,将细胞分为抑制剂对照组、Dyngo-4a处理组、转染阴性对照(si-NC)组、DNM2小干扰RNA(si-DNM2)转染组、转染和Dyngo-4a共处理组。反转录PCR和Western blot法验证DNM2基因沉默效率,CCK-8法检测Dyngo-4a处理后细胞活性变化,共聚焦显微镜检测内吞的Dylight649标记的转铁蛋白(transferrin-Dylight649)和四甲基罗丹明标记的葡聚糖(dextran-TMR)阳性的囊泡数量以及平均荧光强度。结果使用小干扰RNA能显著下调BMSC的DNM2的mRNA和蛋白表达,转染组内吞的转铁蛋白囊泡数量与转染阴性对照组比较明显降低,si-DNM2转染组内吞的葡聚糖囊泡数量和平均荧光强度与si-NC组比较变化不明显,转染si-DNM2和Dyngo-4a共处理组与单独si-DNM2转染组比较,Dyngo-4a处理组与抑制剂对照组比较,葡聚糖囊泡数量和平均荧光强度均明显降低。结论Dyngo-4a作为靶向DNM的抑制剂在葡聚糖内吞进BMSC过程中存在脱靶效应。

生殖器疱疹患者氧化应激与细胞免疫状态的研究

目的研究生殖器疱疹患者的氧化应激和细胞免疫状态之间的关系。方法对67例生殖器疱疹患者和20例正常对照的血清进行检测,超氧化物歧化酶(SOD)活力采用黄嘌呤氧化酶法,丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸法,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力采用改良HAFEMAN直接测定法,一氧化氮(NO)含量采用硝酸还原法。T细胞、NK细胞和B细胞应用COULTER流式细胞仪检测。结果1生殖器疱疹患者SOD及GSH-PX活力低于正常对照组,MDA及NO浓度高于正常对照组(P<0.05),且NO浓度与SOD活力呈负相关,与MDA浓度呈正相关(P<0.05);2生殖器疱疹患者外周血T淋巴细胞浓度降低,而NK细胞浓度反应性升高,发作期T细胞水平较间歇期更为低下。结论生殖器疱疹患者氧化应激失衡,T细胞水平低下,但是未发现氧化应激与T细胞免疫之间的相关性。

二氧化碳激光预处理联合光动力疗法对光化性角化病和光嫩肤的疗效评价

目的评价二氧化碳激光预处理联合光动力疗法对光化性角化病(AK)和光嫩肤的荧光成像疗效。方法选择80例AK患者随机分为两组,对照组(40例)采用光动力疗法治疗,观察组(40例)采用光动力疗法联合二氧化碳激光治疗,观察两组临床疗效,对比两组皮肤镜特征和VISIA皮肤检测,分析水通道蛋白(AQP)在AK中的表达,记录其不良反应发生情况。结果治疗后,观察组总有效率明显高于对照组(P<0.05);对照组表面有鳞屑者25.00%,草莓样结构者22.50%,有卷曲状血管(点状、线状血管者)27.50%,玫瑰花瓣征25.00%;观察组粉刺样开口者20.00%,粟粒样囊肿者17.50%,有鳞屑者32.50%,草莓样结构者30.00%;观察组VISIA皮肤检测指标均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组AQP1与对照组差异无统计学意义(P>0.05);观察组AQP3、AQP9和AQP10均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用二氧化碳激光预处理光动力疗法治疗AK的临床疗效显著,可有效提升AK的治愈率,同时具有光嫩肤的效果。

高校体育课堂教学若干问题的思考

高校体育课堂教学要处理好教与学的关系,教学评价由重结果向重过程转变,教学目标由重体育知识技能传授向重体育能力培养转变。体育教师备课要把握好教学大纲和处理好教材,编写好教案,选用教学方法与手段,讲究教学的语言艺术,做好示范动作,注重教学情感的运用,有良好的教学心态,注意仪表风度和对体育课成绩的考核。

光动力联合咪喹莫特治疗日光性角化病临床疗效研究

目的:探讨光动力(Photodynamic therapy,PDT)联合咪喹莫特治疗日光性角化病(Actinic keratosis,AK)的临床效果。方法:选取2015年1月-2020年1月于笔者医院就诊的102例AK患者。按随机数字法分为对照组和观察组,每组51例。对照组应用咪喹莫特治疗,观察组应用PDT联合咪喹莫特治疗。比较两组临床效果、皮损面积、不良反应、随访情况及满意度情况。结果:观察组总有效率(94.12%)高于对照组(70.59%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组皮损面积均小于治疗前,且观察组小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后随访3~6个月,平均随访(4.59±0.70)个月,观察组复发率1.96%,低于对照组的17.65%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组总满意度(84.31%)高于对照组(62.74%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PDT联合咪喹莫特治疗AK具有良好的临床疗效,可改善皮损情况,减小复发风险,且不增加不良反应,患者满意度高。

CO2激光联合5ALA光动力治疗男性肛管内尖锐湿疣的疗效观察

目的观察CO2激光联合5ALA光动力治疗男性肛管内尖锐湿疣的临床效果。方法选取2016年1月-2019年1月四川大学华西医院就诊的肛管内尖锐湿疣男性患者58例,按照入院顺序进行编号后随机分为试验组和对照组,每组29例。试验组在CO2激光治疗基础上联合光动力治疗,对照组接受CO2激光治疗,比较2组治疗总有效率,治疗有关情况(包括手术时间、血便消失时间以及治疗中出血量),不良反应情况,以及随访半年复发率。结果试验组治疗总有效率为96.55%,高于对照组的79.31%(P<0.05);2组手术时间比较差异无统计学意义(P>0.05);试验组术中出血量少于对照组,血便消失时间短于对照组(P<0.01);2组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05);随访半年,试验组复发率低于对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论CO2激光联合5ALA光动力治疗在男性肛管内尖锐湿疣方面疗效较好,具有临床应用推广价值。

5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗皮肤肿瘤疗效观察

目的观察5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗皮肤肿瘤的效果。方法择取2017年5月-2019年5月四川大学华西医院皮肤性病科收治的皮肤肿瘤患者64例,按照随机数字表法分为试验组和对照组各32例。对照组患者接受外科手术治疗,试验组在对照组基础上联合5-氨基酮戊酸光动力治疗。比较2组患者临床疗效、不良反应,对患者进行为期12个月的术后随访,记录2组患者复发情况。结果试验组患者总有效率为93.75%,高于对照组的75.00%(P<0.05)。试验组患者不良反应发生率为6.25%,低于对照组患者的21.88%(P<0.05)。试验组患者复发1例,而对照组患者复发4例,试验组患者复发率为3.12%,低于对照组的12.50%(P<0.05)。结论5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗皮肤肿瘤疗效较好,建议在临床中进行推广应用。

建立普通高校体育工作管理体系若干问题的思考

高校体育工作管理体系的建立 ,要使高校的体育工作管理科学化、系统化、规范化、制度化 ;使体育工作者在工作中自我约束、自我管理 ,从而提高思想素质和业务水平 ,调动其工作积极性 ;有利于鉴别优劣、表彰先进。

沙利度胺治疗扁平苔藓1例

临床资料患者女，64岁。因颈部红斑、丘疹、瘙痒2个月，泛发全身50天，加重1个月就诊。患者2个月前无明显诱因颈部出现豌豆至蚕豆大小红斑，粟粒大小丘疹，瘙痒明显，在当地医院就诊，诊疗不详。50天前皮疹蔓延至躯干、四肢，躯干红斑、丘疹部分融合成片，四肢以粟粒至绿豆大小红色丘疹为主，40天前上颚出现一绿豆大小的水疱，自服药物后水疱消退（具体不详）。1个月前全身红斑、丘疹密集增多，瘙痒剧烈，到医院就诊，诊断为“湿疹”，以抗过敏治疗7天效果不明显，来我院就诊。

病毒感染患者的氧化应激状态的研究

近年来发现人体疾病的发生、发展与机体的氧化应激状态密切相关 ,病毒感染的机体常处于慢性氧化应激状态。病毒诱导宿主细胞产生氧化应激 ,释放大量活性氧自由基 ,在活性氧自由基的作用下病毒复制增强 ,应用抗氧化剂治疗病毒性疾病已取得初步疗效。总结目前关于氧化应激与病毒感染的研究 ,从脱氧核糖核酸病毒、核糖核酸病毒及逆转录酶病毒 3方面阐述病毒感染患者的氧化应激状态 。

Sysmex XS-800i全自动血细胞分析仪性能评价

目的评价Sysmex XS-800i全自动血细胞分析仪的性能。方法对Sysmex XS-800i的准确性、批内及批间精密度、携带污染率、稀释效果、总重复性、白细胞分类检测的重复性进行测定,并取20例健康体检和病人标本同时用SysmexXS-800i和Sysmex XT-1800i测定WBC、RBC、Hb、PLT、HCT五项指标并进行比对,并从中随机抽取5个健康体检标本的Sysmex XS-800i分类结果与手工分类结果进行比较。结果 Sysmex XS-800i的准确性、批内及批间精密度、携带污染率、稀释效果、总重复性均在允许范围内,Sysmex XS-800i和Sysmex XT-1800i对WBC、RBC、Hb、PLT、HCT的测定结果经统计学分析无显著性差异(P>0.90),Sysmex XS-800i分类结果与手工分类结果进行比较,相关性较好。结论 Sysmex XS-800i是一种较理想的全自动血细胞分析仪,性能良好,检测结果与显微镜目测有良好的一致性;检测快速、准确、重复性好,可用于医院实验室对批量全血标本血细胞分析进行有效的筛选。

超声下光动力疗法联合窦道切开引流治疗脓性汗腺炎的效果

本文探讨超声下光动力疗法联合窦道切开引流对化脓性汗腺炎的效果。选取80例化脓性汗腺炎患者随机分为试验组和对照组,每组40例。试验组行超声引导下光动力疗法联合窦道切开引流治疗,对照组行单纯窦道切开引流治疗,观察患者治疗前后的视觉模拟量表(VAS)评分、外周血白细胞(WBC)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)变化,对患者的创面愈合情况及肿胀度进行评分,分析两组疗效。结果显示,试验组患者在术后3 d、术后1周时的VAS评分均低于对照组(P<0.05);试验组术后3 d的WBC,术后3 d及术后1周的血清hs-CRP水平均低于对照组(P<0.05);试验组术后3 d、术后1周的创面愈合评分、肿胀度评分均低于对照组(P<0.05);试验组患者总体治疗效果优于对照组(P<0.05)。超声下光动力疗法联合窦道切开引流治疗化脓性汗腺炎能显著减轻患者术后疼痛感受,促进创面早期愈合。

皮肌炎并发中央型小细胞肺癌1例

1．病历摘要 患者女，54岁。因全身红斑、肌肉疼痛及乏力20d，加重伴吞咽困难3d，于2008年2月来我院就诊。20d前，患者无明显诱因颈部、躯干出现片状红斑，双睑水肿伴面颊潮红、瘙痒，全身肌肉疼痛，疲乏无力，无吞咽困难，在当地医院予抗过敏治疗（具体用药不详）效果不佳。3d前上述症状加重，出现吞咽困难，遂来我院就诊。既往身体健康，否认有慢性咳嗽、咯血、胸痛及胸闷病史。

生殖器疱疹的免疫学及疫苗研究进展

本文从免疫学和疫苗研究的进展两个方面 ,对防治生殖器疱疹潜伏感染和复发的意义进行了综述。CD4 + 和CD8+ T淋巴细胞是复发性生殖器疱疹的效应细胞 ,在生殖器疱疹的慢性炎症过程中Th1型细胞因子如干扰素 -γ、白介素 - 2、白介素 - 12等具有阻止复发的能力。疫苗能激发机体产生免疫应答 ,HSV基因工程减毒疫苗的潜在致癌性使其临床应用受到限制 ,因此目前研究的焦点是HSV多肽疫苗和核苷酸疫苗 。

生殖器疱疹患者的氧化应激状态研究

目的:检测生殖器疱疹患者的氧化应激状态,以探讨其与生殖器疱疹的关系。方法:本研究通过67例生殖器疱疹患者血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和一氧化氮(NO)的水平来评估生殖器疱疹患者的氧化应激状态。结果:生殖器疱疹患者SOD及GSH-Px活力低于正常人,MDA及NO浓度高于正常人(P<0.05),且NO浓度与SOD活力呈负相关,与MDA浓度呈正相关(P<0.05)。结论:生殖器疱疹患者氧化应激失衡,表现为氧化水平升高,抗氧化能力下降。

排球专项课优化教学法初探

本文介绍了一种排球专项课的优化教学方法，并作了定性与定量的对比试验研究，以期证明其可行性及效果．