红芝LYL263混合培养高产漆酶菌株的筛选

以产漆酶的红芝LYL263菌株为试材,采用不同微生物混合培养的方法,研究了红芝LYL263与苏平平菇、白金金针菇、凤尾菇混合培养的产酶效果和产酶条件,以期能筛选出提高红芝LYL263产漆酶的相容菌株以及与之相适应的产酶条件。结果表明:红芝LYL263与其相容菌株-苏平平菇混合培养后漆酶活性达到1346.4 U·mL^(-1),比红芝LYL263单独培养产酶提高35.7%;红芝LYL263与苏平平菇的接种比例为4:2时,其产酶量最高,最优接种时间是同时接入红芝LYL263和苏平平菇。

红芝LYL263与苏平平菇共培养产漆酶对染料的脱色降解

本文以染料的脱色率作为主要的考察指标,利用红芝LYL263与苏平平菇共培养所产的漆酶粗酶液,对甲基橙、活性艳蓝、孔雀绿、溴酚蓝和结晶紫等5种染料进行脱色降解研究,考察了pH、反应温度、反应时间和漆酶酶活等条件对脱色降解效果的影响。结果表明,红芝LYL263与苏平平菇共培养所产的漆酶粗酶液,对这5种染料均具有较好的脱色降解效果,对脱色降解条件进行优化后,这些染料的脱色率得到显著提升。漆酶粗酶液中含有的低分子物质可能起到了介体的作用,促进了漆酶对非底物型染料(甲基橙、孔雀绿、溴酚蓝和结晶紫)的脱色降解。当脱色反应的pH=4、反应温度为40℃、漆酶酶活为100U·mL^(-1)时,甲基橙和活性艳蓝的脱色率最高分别达到73.2%和96.5%;当pH=4、反应温度为30℃、漆酶酶活为100 U·mL^(-1)时,孔雀绿的脱色率最高达到96.6%;当pH=3、反应温度为40℃、漆酶酶活为100U·mL^(-1)时,溴酚蓝的脱色率最高达到77.5%;当pH=4、反应温度为30℃、漆酶酶活为75U·mL^(-1),结晶紫的脱色率最高达到88.5%。

红芝漆酶高产菌株的诱变选育

以药用真菌红芝(Ganoderma lucidum)为出发菌,通过紫外线(Ultraviolet ray,UV)、亚硝基胍(Nitrosoguanidine,NTG)及紫外线(UV)-亚硝基胍(NTG)逐级诱变处理其菌丝体片段,采用平板变色法初筛、愈创木酚法测定发酵液漆酶酶活力复筛,获得1株漆酶高产诱变菌株LYL263。用复筛液体培养基震荡培养时,其平均酶活力比出发菌株提高187%,达到145 500 U/L,且产酶稳定。

高絮凝活性酿酒酵母菌株筛选及其培养条件研究

从实验室保藏菌种中筛选到1株具有高絮凝活性的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株,利用其发酵液进行絮凝实验,结果表明:该絮凝剂对4 g/L、pH为7的高岭土悬浊液有很好的絮凝效果;该菌株产絮凝剂的最佳培养条件:碳源为葡萄糖,氮源为蛋白胨,培养温度为30℃,初始pH值为5.5,液体震荡培养96 h后絮凝率最高可达92.6%。

红芝LYL263所产漆酶在溶胶-凝胶体系中的固定化研究

[目的]对红芝LYL263漆酶进行不同溶胶-凝胶体系的固定化研究,以期找到适宜该漆酶的固定化材料。[方法]将海藻酸钠-明胶、海藻酸钠-壳聚糖和海藻酸钠-明胶-壳聚糖3种溶胶-凝胶体系用于红芝LYL263所产漆酶的固定化研究,并初步分析固定化酶的酶学性质。[结果]海藻酸钠-明胶-壳聚糖体系固定后的漆酶酶活分别是海藻酸钠-明胶和海藻酸钠-壳聚糖的2.14倍和2.75倍,该体系最佳材料组成为:海藻酸钠浓度2.0%、明胶浓度1.0%、壳聚糖浓度0.3%、氯化钙浓度36.0%。该试验首次将苯甲酸用于包埋法固定化漆酶,单因素试验结果显示,适宜的苯甲酸浓度能有效提高固定化漆酶酶活;该体系固定化漆酶最佳条件为:苯甲酸浓度2mmol/L、戊二醛浓度0.32%、交联时间50 min、酶浓度10.0%,此时固定化酶活高达635.7 U/g。对固定化漆酶酶学性质的研究表明,固定化酶的热稳定性比游离酶高,冻干的固定化酶活是未冻干固定化酶的1.59倍,但冻干的固定化酶操作稳定性较差。[结论]在酶固定化材料中,各个物质的组成对酶固定化有非常大的影响,该研究对红芝LYL263漆酶的固定化材料选择有重要意义。