HPLC-ESI-MS对石榴皮中鞣质类化学成分的初步分析

目的:用HPLC-ESI-MS初步鉴定石榴皮提取物中鞣质类化学成分。方法:采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈∶水,梯度洗脱;流速:1.0 ml·min-1,检测波长:256 nm;采用负离子检测模式。结果:初步鉴定出石榴皮提取物中5个鞣质类化学成分,分别为没食子酸,安石榴磷,安石榴苷,鞣云实精,鞣花酸。结论:本方法快速、简便,适合石榴皮中鞣质类化学成分的初步鉴别,为中药活性成分研究提供新的思路。

地榆鞣质提取物对TGF-β_1诱导人肾小管上皮细胞增殖的影响

目的:通过观察地榆鞣质提取物(STE)对生长转化因子(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)增殖的影响,探讨地榆在防治肾间质纤维化方面的作用。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基培养,实验分为5组:空白对照组、TGF-β1组(5 ng·ml-1TGF-β1)、干预1组(5 ng·ml-1TGF-β1+12.5μg·ml-1STE)、干预2组(5 ng·ml-1TGF-β1+25μg·ml-1STE)、干预3组(5 ng·ml-1TGF-β1+50μg·ml-1STE),孵育24 h。在倒置显微镜下观察各组细胞形态的改变,并通过CCK8法测定地榆鞣质对细胞增殖的影响。结果:TGF-β15 ng·ml-1能显著诱导人肾小管上皮细胞增殖,并促进其细胞形态向纤维化转变,相比于空白对照组具有显著差异(P<0.05);但与地榆鞣质提取物(STE)共同作用后,其促进细胞增殖的作用受到一定抑制(P<0.05),细胞形态也趋于正常,且呈剂量依赖性。结论:地榆鞣质提取物能抑制HK-2细胞的增殖,在一定程度上具有防止肾间质纤维化的作用。

地榆鞣质在大鼠尿液中代谢产物分析

目的:采用HPLC-Q-TOF/MS研究地榆鞣质在尿液中的代谢产物。方法:收集给药后大鼠尿样,采用ZORBAX Eclipse XDB-C_(18)(150 mm×2.1 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,在飞行时间质谱负离子模式下扫描,利用TOF/MS得到的准确相对分子质量及一级、二级质谱信息,对照化学成分数据库,鉴定地榆鞣质在大鼠尿液中可能的代谢产物,结合相关文献,推测地榆鞣质在大鼠体内可能的代谢途径。结果:从大鼠尿液中共检测到9个代谢产物,分别为:M1(Pyrogallol)、M2(Urolithin B)、M3(Methyl-Urolithin C)、M4(Urolithin A)、M5(Methyl-Urolithin A)、M6(Urolithin C-Glucuronidation)、M7(Dimethy-EA)、M8(Urolithin M5)、M9(没食子酸),其中M9为原型药物。结论:地榆鞣质经灌胃给予大鼠后,先经过I相代谢反应生成尿石素等极性偏小的代谢产物吸收进入体内,再发生Ⅱ相结合反应,与葡萄糖醛酸等结合,变成极性较大的物质,从尿液排除体外,进一步阐明了地榆鞣质在体内发挥药理作用的机理。

罗布麻叶对大鼠尿液内源性物质代谢的影响

目的:采用代谢组学方法考察罗布麻叶对正常大鼠尿液内源性物质代谢的影响。方法:罗布麻叶用10倍量70%乙醇回流提取,将大鼠分为空白对照组、罗布麻叶高剂量组及低剂量3组,连续灌胃给药29 d,运用SIMCA-P软件中的PCA法与PLS-DA法对比分析。结果:罗布麻叶给药组与空白对照组得分点达到很好的区分效果,连续给药22 d时,尿液内源性物质代谢改变最为明显。相比于罗布麻叶低剂量组,高剂量组与空白对照组之间差距更大。结论:罗布麻叶提取物对正常大鼠机体内源性物质代谢产生了影响,为进一步阐释罗布麻叶的药性研究工作提供了依据。

地榆中总鞣质超声提取工艺研究

目的:优选地榆中鞣质最佳提取工艺。方法:以提取物中总鞣质含量为指标,通过单因素试验研究提取溶剂、料液比、超声提取时间、超声提取次数等四个因素对总鞣质提取率的影响,利用正交试验确定地榆总鞣质最佳提取工艺。结果:地榆鞣质的最佳提取工艺为:12倍量的40%的乙醇,超声提取2次,每次75min。在最佳条件下,提取率为9.113%。结论:该工艺合理可行,重复性好,地榆鞣质的提取率高。

鞣花鞣质肠道代谢产物urolithins研究进展

鞣花鞣质是一类具有诸多生物活性的酚类化合物,近年来研究发现其发挥作用的物质基础与其肠道菌群代谢产物——尿石素密切相关。该研究就近几年国内外关于尿石素的结构特征、类型、分布,以及其改善前列腺、乳腺、结肠相关疾病,抗癌、抗氧化、抗炎等生物活性研究进行了综述,为开发和利用尿石素奠定基础。

石榴皮鞣质对肾纤维化大鼠内源性代谢物的影响

目的:运用代谢组学方法研究石榴皮鞣质对肾纤维化大鼠内源性代谢物的影响,寻找潜在的生物标志物并分析代谢途径,为肾纤维化的治疗和石榴皮鞣质的利用提供相关理论依据。方法:SD大鼠随机分为5组,假手术组,模型组,缬沙坦组,石榴皮鞣质高剂量组、低剂量组。除假手术组,其余各组采用左侧输尿管结扎方法构建肾纤维化模型,假手术组的输尿管不结扎和剪断。收集各组大鼠术后3周尿样,经预处理后,进行液相色谱-高分辨质谱分析,获得总离子流图。对LC-MS所得数据进行预处理,导入SIMCA-P软件进行主成分分析(PCA)和正交信号校正偏最小二乘法分析(OPLS),根据获得的得分图、载荷图的分析结果,寻找潜在的生物标记物。结果:代谢组学分析发现造模后第3周各组大鼠尿液有明显的聚类现象,通过对重要变量的分析鉴定,筛选出13个潜在的生物标记物。结论:石榴皮鞣质干预下的肾纤维化大鼠内源性代谢物聚类性趋近正常水平,代谢组学分析法寻找潜在生物标志物可行且有效。

石榴皮鞣质的抗菌活性及其对金黄色葡萄球菌的抗菌机制

目的:研究石榴皮鞣质(tannins from Pericarpium Granati,TPG)的抗菌活性及对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)的抗菌机制。方法:实验采用牛津杯法和试管二倍稀释法研究了石榴皮鞣质对5种不同细菌的抗菌活性,并以药物敏感性最强的金黄色葡萄球菌为供试菌,通过测定菌体胞外碱性磷酸酶(AKP)含量、胞外钾离子(K+)浓度、大分子核酸的吸光度值、胞内和胞外总三磷酸腺苷酶(T-ATPase)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和透射电镜(TEM)观察,研究了石榴皮鞣质对金黄色葡萄球菌的抗菌机制。结果:石榴皮鞣质对革兰阳性菌具有较强的抗菌活性,而对革兰阴性菌抗菌活性较弱,经药物作用后金黄色葡萄球菌菌体胞外AKP、K+和核酸含量与对照组相比均升高,胞内ATP酶浓度显著降低。SDSPAGE分析表明石榴皮鞣质能够抑制菌体蛋白质合成,尤其是大相对分子质量蛋白。透射电镜表明菌体细胞膜结构和完整性被破坏。结论:石榴皮鞣质对革兰阳性菌具有较强的抗菌活性,能够显著影响金黄色葡萄球菌的细胞壁和细胞膜结构,且对菌体内蛋白合成具有一定的抑制作用。