杨梅苷对辐射所致血小板减少症的治疗作用及分子机制

目的:研究杨梅苷对K562细胞向巨核细胞分化和X射线致血小板减少症小鼠的治疗作用及分子机制。方法:杨梅苷干预K562细胞后,利用镜下拍照观察细胞形态变化;吉姆萨染色观察多倍体形成情况;鬼笔环肽染色观察纤维型肌动蛋白的表达;流式细胞术检测巨核细胞表面抗原CD41^(+)/CD42b^(+)的表达,从而验证杨梅苷促进巨核细胞分化的活性。采用4Gy X射线辐射昆明小鼠建立血小板减少症模型,将造模后的小鼠随机分为模型对照组、杨梅苷5、10 mg/kg组、阳性药rhTPO 3 000 U/kg组,给药第4、7、11 d时使用血细胞分析仪检测小鼠外周血象。给药第11 d, HE染色观察小鼠骨髓巨核细胞数目;流式细胞术检测脾脏细胞CD41^(+)/CD61^(+)表达水平。杨梅苷干预K562细胞后,蛋白印迹法检测MEK和ERK蛋白及磷酸化蛋白的表达。结果:与空白对照组相比,杨梅苷10、20、40μmol/L组可显著促进K562细胞体积增大,多倍体细胞数目增多,纤维型肌动蛋白荧光强度增强,CD41^(+)/CD42b^(+)表达升高(P<0.01);与模型对照组相比,杨梅苷5、10 mg/kg组可显著加速X射线诱导的血小板减少症小鼠血小板浓度的恢复(P<0.05或P<0.01),增强骨髓有核细胞数以及脾细胞CD41^(+)/CD61^(+)的表达(P<0.01);杨梅苷10、20、40μmol/L组明显上调K562细胞MEK和ERK的磷酸化蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:杨梅苷可通过激活MEK/ERK信号通路促进巨核细胞分化,促进X射线诱导的血小板减少症小鼠的血小板生成。