恒磁场对成人骨髓间充质干细胞增殖及细胞周期的影响

目的:观察不同强度恒磁场辐射对成人骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)增殖水平及细胞周期的影响。方法:用密度梯度离心法分离成人MSC,再经贴壁筛选法筛选,对生长良好的第3代成人MSC进行恒磁场辐射(强度分别为0.05、0.10、0.50和1.00mT),连续刺激5天(每天8h)后,用单四唑(MTT)法、流式细胞仪法测定细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡情况。结果:0.05mT组细胞增殖显著高于对照组;0.10mT组细胞增殖与对照组相比无明显差异;其余剂量组细胞增殖均显著低于对照组。各组均未发现DNA倍体异常细胞。结论:恒磁场对成人MSC增殖的影响与磁感应强度有关,0.05mT的磁场促进MSC的增殖,0.10mT的磁场对MSC无明显影响,0.50mT和1.00mT的磁场抑制MSC的增殖。

以心室收缩不同步作为心脏再同步化治疗筛选标准的疗效评价

目的:以心室收缩不同步作为心脏再同步化治疗的筛选标准,观察心脏再同步化(cardiac resynchronization therapy,CRT)治疗慢性心力衰竭(CHF)的临床疗效。方法:26例CHF患者经过严格的超声筛选后行CRT,全部患者均经冠状静脉窦植入左心室电极,电极位置尽量与超声提示的左心室收缩最延迟部位一致,术后随访(13.8±10.4)个月。结果:2例患者随访中死亡,其余24例患者治疗后心功能、患者活动度、心率变异性均明显改善(P<0.05),左心室舒张末内径从(77.0±9.4)mm缩小至(68.7±10.2)mm(P<0.05),左心室内各室壁收缩期达峰时间标准差从(48.4±17.9)ms减少至(30.2±18.6)ms(P<0.05)。术后1个月左心室16,12及6节段达最小容积点时间的标准差和最大时间差均有明显减低(P<0.05)。结论:CRT是CHF治疗的有效方法,术前应用常规超声心动图及组织多普勒成像技术(TDI)等多项技术来评价患者心室运动的失同步是CRT的有效筛选手段。

经组织多普勒筛选的右束支传导阻滞心力衰竭患者行心脏再同步化治疗的疗效

目的观察经组织多普勒(TDI)筛选的右束支传导阻滞(RBBB)的心力衰竭患者行心脏再同步化治疗(CRT)的效果。方法 8例心力衰竭合并RBBB患者接受了CRT,其中5例并发左侧束支的部分阻滞(LHB),3例为单纯RBBB,所有患者符合CRT治疗的I类适应证,并在CRT治疗前应用TDI进行了严格筛选,所有患者均存在心室间及室内收缩不协调,左室电极尽量放置在收缩最延迟处,观察患者术后症状及超声指标改善情况。结果 CRT术后6个月随访,所有患者均存活,其中5例并发LHB患者及1例单纯RBBB患者NYHA心功能分级改善至少1级,射血分数改善大于5%,其余2例单纯RBBB患者对CRT治疗无反应,NYHA心功能分级未改善,射血分数改善小于5%。结论经TDI筛选的RBBB心力衰竭患者可从CRT治疗中获益,但获益的患者多数合并有LHB,而只有较少单纯RBBB患者从CRT获益。

血管内皮细胞生长因子真核表达质粒的构建及其在心肌细胞中的表达

目的 :构建血管内皮细胞生长因子 ( VEGF1 65)真核表达质粒 pc DNA3 .1( -) /h VEGF1 65,并通过转染心肌细胞来验证其生物活性。方法 :应用 DNA重组方法 ,将编码 h VEGF1 65全长 c DNA克隆于真核表达载体 pc DNA3 .1( -)中 ,构建 pc DNA3 .1( -) /h VEGF1 65真核表达质粒 ;应用阳性脂质体介导的基因转染技术 ,将真核表达质粒 pc D-NA3 .1( -) /h VEGF1 65瞬时转染培养的大鼠心肌细胞中 ;采用 RT-PCR,ELISA,Western blot及免疫组化染色等方法检测 VEGF1 65基因在心肌细胞中的表达情况 ;应用 MTT法检测转染后细胞上清液中 VEGF1 65的生物活性。结果 :将构建好的真核表达质粒 pc DNA3 .1( -) /h VEGF1 65转染心肌细胞后 ,VEGF m RNA及蛋白表达水平明显增高 ,转染后的心肌细胞培养上清液具有促使内皮细胞增殖的生物活性。结论 :成功构建了真核表达质粒 pc DNA3 .1( -) /h VEGF1 65,其转染心肌细胞后可获得较高水平 VEGF蛋白的表达 ,所表达出

电子束CT冠状动脉血管造影与冠状动脉造影结果的关联性研究

目的 探讨电子束CT冠状动脉血管造影 (eletronbeamcomputedtomographicangiography ,EBA)与冠状动脉造影结果的关联性。方法 2 4例临床怀疑冠心病患者分别行EBA及冠状动脉造影 (coronaryangiography,CAG) ,所有EBCT图像均经三维重建显像 ,按照AHA分段方法进行分段 ,每套重建显像血管分成左主干 (leftmainartery ,LM)及前降支 (leftanteriordescendingcoronaryartery ,LAD)、左旋支 (leftcircumflexartery ,LCx)、右冠脉 (rightcoronaryartery,RCA)各近、中、远三段共 10段血管 ,由 2名医生对LM和LAD、LCx、RCA的近、中段共 16 8段血管进行分析 ,其结果与CAG结果对比 ,比较EBA与CAG所示冠状动脉狭窄间的关系。结果 在 16 8个近段和中段血管中有 147段 (87.5 0 %)EBA能够清楚显像 ,其中LAD近段和中段清晰显像的百分比都为 95 .83%,而RCA近段和中段分别为 91.6 7%和 5 8.33%,LCx近段和中段为 91.6 7%、79.17%,而在 16 8个近段和中段血管中CAG全部清晰显像 ;如果以 >5 0%狭窄作为有意义狭窄 ,则EBA与CAG比较发现狭窄的敏感性和特异性是 83.33%和 92 .13%,其中LM是 10 0 .0 0%和 95 .6 5 %,LAD近段是 10 0 .0 0 %和 75 .0 0 %,LAD中段是 82 .35 %和 6 6 .6 7%,RCA近段是 80 .0 0 %和 71.43%,RCA中段是

犬缺血心肌内注射血管内皮生长因子基因的疗效

目的 :了解血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因 ,经心肌直接注射治疗犬心肌缺血模型后新生血管和侧枝循环形成以及心功能改善情况 .方法 :取实验用犬 2 4只 ,结扎左冠状动脉前降支 (LAD)近、中段 ,模型建造成功后 ,通过直接心肌注射将hVEGF1 6 5基因转染缺血部位心肌细胞 ,应用超声检查及冠状动脉造影 (coronaryangiog raphy,CAG)进行监测 ,3mo后处死 ,组织学切片观察心肌组织中毛细血管生成情况 .结果 :术后 3mo ,CAG显示 ,治疗组新生血管数目和侧枝血管形成较对照组明显增加 ,TIMI血流也较对照组明显改善 (P <0 .0 5 ) ;超声检查显示 ,治疗组射血期及舒张早期局部心肌运动速度和二尖瓣环舒张早期平均运动速度均较对照组显著增加 ;组织学检查显示 ,治疗组心肌内毛细血管数为 (4 1± 8) /HP ,而对照组为 (9± 6 ) /HP (P <0 .0 1 ) .结论 :犬心肌缺血模型经心肌直接注射pcDNA3.1 (- ) /VEGF1 6 5 ,能促进心肌血管新生 ,加速侧枝循环建立 。

EGFP标记的VEGF165重组质粒的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达

目的 构建pIRES2 EGFP VEGF16 5真核表达质粒 ,并在大鼠骨髓间充质干细胞内表达。方法 应用DNA重组方法构建pIRES2 EGFP VEGF16 5 ,并将其转染到大鼠骨髓间充质干细胞内 ,采用ELISA和MTT法检测转染后细胞培养上清液中VEGF16 5的含量及生物活性。结果 成功构建了pIRES2 EGFP VEGF16 5 ,将其转染骨髓间充质干细胞后 ,VEGF蛋白表达水平明显增高 ,转染后的细胞培养上清具有促使内皮细胞增殖的生物活性。结论 成功构建了真核表达质粒pIRES2 EGFP VEGF16 5 ,将其转染骨髓间充质干细胞后可高水平地表达具有生物学活性的VEGF蛋白。

对美国高血压预防、检测、评估及治疗联合委员会第七次报告的思考

高血压病是全球范围内最常见的心血管系统疾病 ,其发病率、死亡率和致残率高 ,是严重危害人们健康的疾病之一。美国高血压预防、检测、评估及治疗联合委员会第七次报告 (JNC7)为高血压诊断及治疗提供了新的、有价值的依据。

骨髓基质细胞结合血管内皮生长因子基因治疗猪慢性心肌缺血的疗效

目的:探讨骨髓基质细胞(BMSCs)结合血管内皮生长因子(VEGF)基因心内膜注射治疗猪慢性心肌缺血模型的疗效。方法:建立猪心肌梗塞模型,胸骨穿刺抽取骨髓,分离培养BMSCs,将VEGF165基因转染到BMSCs中,4周后进行左室心内膜电机械标测并行心内膜注射等操作,按照注射成分不同分为3组,联合组(n=8)注射转染VEGF165基因的BMSCs,细胞组(n=8)注射BMSCs,对照组(n=6)注射生理盐水。于细胞移植后4周分别进行左室心内膜电机械标测、选择性冠脉造影及超声心动图检查。结果:术后4周时联合组较细胞组及对照组的心梗面积明显缩小,侧支循环、心脏泵血功能以及心肌收缩力改善更加明显(P<0.05～<0.01)。结论:自体BMSCs结合VEGF165基因治疗心肌梗塞效果显著。

心脏性猝死与植入型心脏转复除颤器

心脏性猝死(SCD)是威胁人类生命的一大杀手,植入型心脏转复除颤器(ICD)是其预防治疗的有效手段,成为SCDⅠ级预防和Ⅱ级预防的标准治疗方法。近年来ICD在临床应用取得了不少的发展与进步,本文在此对其进行简述。

保留经皮冠状动脉腔内成形术导丝行左室起搏一例

患者男性,77岁,间断胸闷、气短、心慌4年,加重1月入院,诊断:扩张型心肌病,心功能Ⅳ级。入院后给予优化的药物治疗后,植入了Medtronic8042三腔起搏器。植入过程中4193型左室电极进入多处冠状静脉均起搏不良,而利用经皮冠状动脉腔内成形术导丝于心侧静脉进行延伸起搏后获得满意阈值(1.5V),但阻抗较低仅有306Ω,患者起搏器植入处肌肉跳动明显,将左室电极起搏模式由Unipolar改为LVtip/RVring模式后,肌肉跳动消失,1个月后随访,未有不良事件发生,患者活动度明显增加,左室射血分数提高。

以问题为基础的学习教学法在心脏听诊教学中的应用探讨

美国神经病学教授Barrows于1969年提出了＂以问题为基础的学习教学法＂（problem-based learning,PBL）,这种新的教育方法自提出以来受到了很多医学院校和医学教育者的关注。PBL教学法提倡一种＂以学生为中心＂的教学策略,帮助学生在新的环境中运用医学知识和技能。学生通过主动查询数据资料,解决了他们在学习过程中遇到的问题,提高学习效果。

纳米粒子介导血管内皮生长因子基因转染的实验研究

目的 观察纳米粒子携带血管内皮生长因子（VEGFl65）基因转染的可行性。方法 应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物（PL-GA）和聚乙烯醇（PVA）包载VEGFl65基因质粒，制备纳米级粒子混合物，检测其载药量、体外释放情况及粒径；培养心肌细胞，应用RT-PCR及ELISA方法观察纳米级粒子混合物为真核细胞传递基因的可行性；将纳米粒子悬浮液注射至活体家兔心肌组织内，96h后电镜观察其向心肌组织内传递基因的可行性。结果 制备的纳米粒子载药量为1．87％，粒径为25～300nm；RT-PCR和ELISA结果提示纳米粒子可将目的基因转移至心肌细胞中；体内实验显示心肌细胞胞质内及胞核内可见大量被吞噬的纳米粒子。结论 纳米粒子可作为向心肌组织转运VEGF基因的载体。

双环折返型心房扑动消融1例

1对象和方法患者，男，52岁，心悸2年入院，发作时无胸痛、胸闷等不适，曾于外院诊断“心律失常-心房扑动（房扑）”，口服药物治疗症状缓解不明显．行三尖瓣峡部线消融．短暂转复后心悸再发，

心动过速性心肌病治疗1例

1对象与方法患者，男，18岁，甘肃庆阳人，因体检发现心率快1年，夜间咳嗽3个月入院。患者1年前因征兵体检发现心率快，当时因无症状未予重视，近3个月出现夜间咳嗽，上腹饱胀感，食欲减退、纳差、消瘦，无晕厥、黑朦。既往尤其他病史。

电子束CT冠状动脉血管成像技术对老年男性冠心病患者的诊断价值

目的 :评价电子束 CT冠状动脉血管成像技术 (EBT)在老年男性冠心病患者的诊断价值。方法 :对 4 8例临床有冠心病症状、可疑冠心病症状或无症状的老年男性 ,进行 EBT及冠脉造影 (CAG)检查 ,以 CAG结果作为“金标准”评价 EBT与冠脉狭窄之间的相关性。结果 :1冠状动脉狭窄组的 EBT阳性率明显高于非狭窄组 (P<0 .0 1) ;两种方法的检测结果并无统计学差异 (P>0 .0 5 )。 2 EBT诊断冠脉狭窄的灵敏度、特异度、误诊率、漏诊率、准确度、阳性预告值、阴性预告值、阳性似然比及阴性似然比分别为 86 %、6 7%、33%、14 %、83%、95 %、4 0 %、2 .6及 0 .2 1。3EBT阳性与冠脉存在狭窄血管支数之间呈正相关。 4 EBT对于冠脉近段血管狭窄诊断的敏感性、特异性、准确性均较高 ,而对远段血管的诊断则与 CAG相差较大。结论 :1EBT是预测老年冠心病的有价值的检查手段。 2EBT对于冠脉近段病变具体位置的确定有价值。

壳聚糖-hVEGF_(165)基因微粒的制备及体外转染的实验研究

采用复凝聚法制备壳聚糖-hVEGF165基因微粒,观察微粒形态,测定微粒的粒径、基因包封率和载药量,以LipofectamineTM2000转染试剂作为阳性对照,检测微粒对心肌细胞的转染活性及对心肌细胞存活率的影响。结果表明,微粒形态多呈球形,粒径小,基因包封率和载药量均较高,转染活性略低于脂质体,但微粒对心肌细胞的毒性明显低于脂质体。

血管紧张素Ⅱ诱导人骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用于人骨髓间充质干细胞(hMSCs)后,心肌特异蛋白及细胞外信号调节激酶(ERK 1/2)的表达变化。方法第8代hMSCs用0.1μmol/L AngⅡ孵育24 h。倒置显微镜下观察细胞形态变化,免疫细胞化学法标测心肌肌钙蛋白I(cTnI)、间隙连接蛋白43(connexin 43)及α肌动蛋白(α-actin)表达情况,反转录PCR法检测细胞cTnI表达,透射电镜观察分化的心肌样细胞内是否有肌丝存在,W estern b lot法检测细胞ERK 1/2总蛋白表达,流式细胞仪测定心肌样细胞分化率。结果与对照组比较,AngⅡ组hMSCs诱导后细胞形态改变,第2周开始表达α-actin及connexin 43,第3周开始表达cTnI,AngⅡ组细胞ERK 1/2的蛋白表达水平逐渐增加,流式细胞仪测得心肌样细胞分化率为(23±3)%。结论AngⅡ在体外可能经ERK通路诱导hMSC向心肌样细胞分化。

电风暴

电风暴是由于心室电活动极度不稳定所导致的最危重的恶性心律失常,是心源性猝死的重要机制,其发生率为10%～40%不等。可发生于器质性或非器质性心脏病患者、遗传性心律失常以及植入埋藏式心脏转复除颤器(ICD)的患者。其促发因素:心肌缺血及心力衰竭、电解质紊乱、药物影响和自主神经失衡。其治疗可采取①电复律;②静脉应用抗心律失常药;③病因治疗;④植入ICD和射频消融等非药物治疗。