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谷胱甘肽亲和层析介质的制备条件及其层析特性研究 被引量:1
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作者 易秋分 张翠英 +5 位作者 蒋永吉 唐昭娜 陈文成 朱显明 刘俊伟 董辉 《天津科技大学学报》 CAS 北大核心 2015年第5期7-14,共8页
以琼脂糖凝胶4FF(Sepharose 4 Fast Flow)为基质,1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDGE)为活化剂,通过活化、偶联谷胱甘肽(GSH),得到GSH亲和层析介质.实验结果表明:活化及偶联的优化条件为10,m L基质加入0.42,g Na OH、15,m L二甲基亚砜... 以琼脂糖凝胶4FF(Sepharose 4 Fast Flow)为基质,1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDGE)为活化剂,通过活化、偶联谷胱甘肽(GSH),得到GSH亲和层析介质.实验结果表明:活化及偶联的优化条件为10,m L基质加入0.42,g Na OH、15,m L二甲基亚砜(DMSO)、15,m L BDGE,反应温度为40,℃,反应时间为6,h;偶联溶液p H 6.5,反应温度为37,℃,反应时间为24,h.在此条件下,环氧基修饰密度可达60~65,μmol/m L;所制备的介质载量为(14.19±0.98)mg/m L.以此介质对谷胱甘肽S–转移酶(GST)、融合蛋白GST-Bcl-2、GST-Ald、GST-PTPN12进行纯化,结果表明,该介质纯化效果较好、载量高、稳定性能较好,可重复使用. 展开更多
关键词 谷胱甘肽亲和层析 活化 环氧基修饰密度 载量
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从猪血中提纯食品级血红素的研究 被引量:1
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作者 蒋永吉 张翠英 +3 位作者 朱显明 易秋分 唐昭娜 董辉 《天津科技大学学报》 CAS 2014年第6期21-26,共6页
利用冰醋酸法从猪血中提纯食品级血红素.以血红素的纯度和得率为响应指标,采用单因素法和响应面法确定冰醋酸法提纯血红素的最佳工艺为:冰醋酸体积(m L)与血球液质量(g)比3.93、氯化钠添加量2.09%、反应温度98,℃、反应时间50,min.在该... 利用冰醋酸法从猪血中提纯食品级血红素.以血红素的纯度和得率为响应指标,采用单因素法和响应面法确定冰醋酸法提纯血红素的最佳工艺为:冰醋酸体积(m L)与血球液质量(g)比3.93、氯化钠添加量2.09%、反应温度98,℃、反应时间50,min.在该条件下,样品中血红素的纯度和得率分别为93.29%、60.98%. 展开更多
关键词 猪血 血红素 冰醋酸法 提取 纯度 得率
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假坚强芽孢杆菌丙氨酸脱氢酶的原核表达纯化与结晶
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作者 唐昭娜 张翠英 +3 位作者 胡平雄 易秋分 杨江丽 董辉 《天津科技大学学报》 CAS 北大核心 2015年第4期21-24,77,共5页
丙氨酸脱氢酶(alanine dehydrogenase,Ald)是一种NAD+依赖性的氨基酸脱氢酶,能可逆地催化丙氨酸氧化脱氨生成丙酮酸和氨.实验以假坚强芽孢杆菌的丙氨酸脱氢酶为研究对象,将目的基因克隆到p ET-22,b(+)原核表达载体上,并在大肠杆菌中完... 丙氨酸脱氢酶(alanine dehydrogenase,Ald)是一种NAD+依赖性的氨基酸脱氢酶,能可逆地催化丙氨酸氧化脱氨生成丙酮酸和氨.实验以假坚强芽孢杆菌的丙氨酸脱氢酶为研究对象,将目的基因克隆到p ET-22,b(+)原核表达载体上,并在大肠杆菌中完成蛋白的高效表达.通过镍离子亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析等纯化方法,得到了高纯度的目的蛋白.利用气相扩散法对目的蛋白进行结晶,最终得到分辨率为0.31,nm的蛋白晶体. 展开更多
关键词 丙氨酸脱氢酶 表达 纯化 结晶
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