色素上皮衍生因子及其多肽对非小细胞肺癌增殖、凋亡及迁移的影响

背景与目的色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)的抗肿瘤作用已被大量证实,然而其多肽的抗肿瘤作用报道较少,本研究旨在探讨PEDF及其多肽对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)凋亡及迁移的影响。方法选取肺癌A549细胞和H1299细胞为研究对象,通过给予细胞相同浓度的不同药物作为观察对象,分为正常组、PEDF处理组、34肽处理组、44肽处理组及34+44组合肽处理组。CCK-8法检测各组细胞的增殖活性;划痕实验检测细胞的迁移能力;免疫印迹法检测凋亡相关蛋白表达水平,如蛋白激酶3(RIP3)和半胱天冬酶3剪切体(cleaved-caspase-3)以及各组上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)标志物的表达水平,如钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA);流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果CCK-8结果显示PEDF及其各多肽分组均可抑制细胞的增殖其中34+44组合肽抑制效果最强(P<0.05);镜下观察发现PEDF及其多肽对A549细胞及H1299细胞均可起到抑制增殖及间充质转化的作用,且34+44肽组的抑制效果最明显;免疫印迹结果表明,与其他组别相比,34+44肽组细胞内Cleaved-Caspase-3及RIP3的表达量明显增高(P<0.05),EMT蛋白E-cadherin的表达升高,α-SMA的表达量降低(P<0.05);流式细胞术结果表明,34+44组合肽组细胞的凋亡率明显高于对其他组(P<0.05);划痕实验表明,与所有组别相比,34+44肽组的愈合率最低(P<0.05)。结论34+44组合肽可以更好地促进NSCLC的凋亡,抑制NSCLC的迁移,从而抑制NSCLC的增殖。

半胱氨酸蛋白酶-1基因缺陷对小鼠急性心肌梗死期血管屏障的影响

目的探讨半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)对小鼠急性心肌梗死期血管通透性的影响及其分子机制。方法本研究选取C57野生型(WT)小鼠和Caspase-1基因缺陷小鼠(Casp1-/-)为研究对象, 建立急性心肌梗死(AMI)模型;通过构建糖氧剥夺(OGD)模型来模拟内皮细胞中的AMI环境。2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法观察各组小鼠心梗面积的大小;免疫印迹法检测相关蛋白表达水平的变化;免疫荧光染色法检测血管渗透性及观察各组黏附连接标志物的分布;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测法检测细胞因子浓度, 组间比较采用t检验。结果 Casp1-/--AMI组梗死区域面积低于WT-AMI组(33.83±7.01比56.78±11.60, t=2.93, P<0.05);Casp1-/--AMI组VE-cadherin的表达量高于WT-AMI组(0.87±0.14比0.43±0.11, t=4.37, P<0.05);OGD条件下VE-cadherin的表达具有相同的变化;Casp1-/--AMI组细胞因子浓度低于WT-AMI组[(57.41±5.34)、(52.40±6.00) pg/ml比(73.80±6.16)、(69.84±4.68) pg/ml, t=4.50、t=5.13, P<0.01];Casp1-/-+Echinulin组VE-cadherin的表达水平明显低于Casp1-/--normal组(0.31±0.05比0.95±0.15, t=7.23, P<0.01), 差异均有统计学意义。结论 Caspase-1基因缺陷可以通过调控核因子-κB通路发挥维持血管通透性, 保护心脏功能的积极作用。