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温度、酸碱度和盐离子浓度对curcin紫外光谱和荧光光谱的影响
被引量:
2
1
作者
晏华立
蒋楠
+3 位作者
樊佳
黄曌
徐莺
陈放
《资源开发与市场》
CAS
CSSCI
2014年第12期1409-1412,共4页
将麻疯树核糖体失活蛋白curcin在不同温度、酸碱度和Na Cl浓度下进行孵育,测定其紫外光谱和荧光光谱的变化,对影响其结构稳定性的因素进行初步探究。研究结果显示,curcin对温度和p H变化相对敏感。当温度上升到70℃后,紫外吸收明显增加,...
将麻疯树核糖体失活蛋白curcin在不同温度、酸碱度和Na Cl浓度下进行孵育,测定其紫外光谱和荧光光谱的变化,对影响其结构稳定性的因素进行初步探究。研究结果显示,curcin对温度和p H变化相对敏感。当温度上升到70℃后,紫外吸收明显增加,在348nm时新增一个明显的荧光激发峰。极端p H值对curcin结构影响同样较大,特别是当p H值为11时,在348nm处新增荧光激发峰。上述现象表明,温度和酸碱度的改变可能导致curcin中含色氨酸的疏水核心结构出现暴露在外的变性过程。Curcin对上述两个因素的敏感性提示其稳定性还有待提高,才能满足蛋白质药物开发的需求。
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关键词
麻疯树
核糖体失活蛋白
CURCIN
紫外光谱
荧光光谱
下载PDF
职称材料
麻疯树核糖体失活蛋白Curcin2的原核可溶性表达及其抗真菌活性研究
被引量:
1
2
作者
邵子静
蒋楠
+3 位作者
晏华立
詹诚
徐莺
陈放
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期43-49,共7页
Curcin2是麻疯树幼苗在真菌侵染、干旱及高低温胁迫下诱导产生的一种核糖体失活蛋白。采用分子克隆的方法,从麻疯树基因组中扩增到Curcin2成熟肽编码基因,分别连接到质粒载体pGEX-6p-1、pMAL-c5E上,转化大肠杆菌最终获得重组菌PGC(pGEX-...
Curcin2是麻疯树幼苗在真菌侵染、干旱及高低温胁迫下诱导产生的一种核糖体失活蛋白。采用分子克隆的方法,从麻疯树基因组中扩增到Curcin2成熟肽编码基因,分别连接到质粒载体pGEX-6p-1、pMAL-c5E上,转化大肠杆菌最终获得重组菌PGC(pGEX-6p-1-curcin2)和PMC(pMAL-c5E-curcin2)。在不同温度、IPTG浓度、时间诱导下,Curcin2在重组菌PGC中均以包涵体形式表达,在重组菌PMC中主要以可溶性融合蛋白形式表达,且蛋白质的表达量与诱导条件相关。重组菌PMC表达可溶性curcin2的优化条件为:温度28℃,IPTG 0.3mmol/L,时间8h,此条件下目的蛋白占总蛋白表达量的30.6%,1L培养物中可获得19.74mg电泳纯的重组蛋白。重组蛋白可被MBP TrapTMHP柱亲和纯化并与curcin抗体发生抗原抗体反应。体外抗真菌活性实验表明,纯化后的curcin2融合蛋白有抑制真菌生长作用,且对小麦赤霉、油菜菌核的抑制作用强于curcin。此蛋白的获得为其相关功能的研究奠定了基础。
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关键词
麻疯树
核糖体失活蛋白
原核表达
抗真菌活性
原文传递
麻疯树小热激蛋白JcHSP-17.5的纯化与活性鉴定
3
作者
徐漪沙
樊佳
+2 位作者
晏华立
徐莺
陈放
《四川大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期1119-1123,共5页
将实验室已有的pET32a-JcHSP17.5重组载体,经测序验证后,转入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中,不同温度条件下,用不同浓度异丙基硫代-D-半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,优化表达条件;选择镍离子亲和层析柱(Ni-NTA)纯化JcHSP-17.5蛋白,SDS-PAG...
将实验室已有的pET32a-JcHSP17.5重组载体,经测序验证后,转入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中,不同温度条件下,用不同浓度异丙基硫代-D-半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,优化表达条件;选择镍离子亲和层析柱(Ni-NTA)纯化JcHSP-17.5蛋白,SDS-PAGE电泳检测蛋白纯度;通过热激聚合反应来鉴定蛋白的分子伴侣活性.结果表明,17℃,200r/min,0.5mM IPTG诱导13h为JcHSP-17.5蛋白的最佳诱导表达条件,使用200mmol/L咪唑缓冲液纯化蛋白后,每500mL菌液可得到1.345mg的电泳纯蛋白,该蛋白在高温(45℃)条件下能够阻止苹果酸脱氢酶(MDH)发生聚合反应,表现出较强的分子伴侣活性.
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关键词
麻疯树
小热激蛋白
异源表达
亲和纯化
热激聚合反应
原文传递
题名
温度、酸碱度和盐离子浓度对curcin紫外光谱和荧光光谱的影响
被引量:
2
1
作者
晏华立
蒋楠
樊佳
黄曌
徐莺
陈放
机构
四川大学生命科学学院
出处
《资源开发与市场》
CAS
CSSCI
2014年第12期1409-1412,共4页
文摘
将麻疯树核糖体失活蛋白curcin在不同温度、酸碱度和Na Cl浓度下进行孵育,测定其紫外光谱和荧光光谱的变化,对影响其结构稳定性的因素进行初步探究。研究结果显示,curcin对温度和p H变化相对敏感。当温度上升到70℃后,紫外吸收明显增加,在348nm时新增一个明显的荧光激发峰。极端p H值对curcin结构影响同样较大,特别是当p H值为11时,在348nm处新增荧光激发峰。上述现象表明,温度和酸碱度的改变可能导致curcin中含色氨酸的疏水核心结构出现暴露在外的变性过程。Curcin对上述两个因素的敏感性提示其稳定性还有待提高,才能满足蛋白质药物开发的需求。
关键词
麻疯树
核糖体失活蛋白
CURCIN
紫外光谱
荧光光谱
Keywords
Jatropha curcas
RIPs
curcin
ultraviolet spectroscopy
fluorescence spectroscopy
分类号
Q518.4 [生物学—生物化学]
下载PDF
职称材料
题名
麻疯树核糖体失活蛋白Curcin2的原核可溶性表达及其抗真菌活性研究
被引量:
1
2
作者
邵子静
蒋楠
晏华立
詹诚
徐莺
陈放
机构
四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期43-49,共7页
基金
国家"十二五"科技支撑项目(2011DFB22B08)
文摘
Curcin2是麻疯树幼苗在真菌侵染、干旱及高低温胁迫下诱导产生的一种核糖体失活蛋白。采用分子克隆的方法,从麻疯树基因组中扩增到Curcin2成熟肽编码基因,分别连接到质粒载体pGEX-6p-1、pMAL-c5E上,转化大肠杆菌最终获得重组菌PGC(pGEX-6p-1-curcin2)和PMC(pMAL-c5E-curcin2)。在不同温度、IPTG浓度、时间诱导下,Curcin2在重组菌PGC中均以包涵体形式表达,在重组菌PMC中主要以可溶性融合蛋白形式表达,且蛋白质的表达量与诱导条件相关。重组菌PMC表达可溶性curcin2的优化条件为:温度28℃,IPTG 0.3mmol/L,时间8h,此条件下目的蛋白占总蛋白表达量的30.6%,1L培养物中可获得19.74mg电泳纯的重组蛋白。重组蛋白可被MBP TrapTMHP柱亲和纯化并与curcin抗体发生抗原抗体反应。体外抗真菌活性实验表明,纯化后的curcin2融合蛋白有抑制真菌生长作用,且对小麦赤霉、油菜菌核的抑制作用强于curcin。此蛋白的获得为其相关功能的研究奠定了基础。
关键词
麻疯树
核糖体失活蛋白
原核表达
抗真菌活性
Keywords
Jatropha curcas L.Ribosome-inactivating protein Prokaryotic expression Antifungal activity
分类号
Q946 [生物学—植物学]
原文传递
题名
麻疯树小热激蛋白JcHSP-17.5的纯化与活性鉴定
3
作者
徐漪沙
樊佳
晏华立
徐莺
陈放
机构
四川大学生命科学学院
出处
《四川大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期1119-1123,共5页
基金
国家自然科学基金(31070301)
文摘
将实验室已有的pET32a-JcHSP17.5重组载体,经测序验证后,转入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中,不同温度条件下,用不同浓度异丙基硫代-D-半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,优化表达条件;选择镍离子亲和层析柱(Ni-NTA)纯化JcHSP-17.5蛋白,SDS-PAGE电泳检测蛋白纯度;通过热激聚合反应来鉴定蛋白的分子伴侣活性.结果表明,17℃,200r/min,0.5mM IPTG诱导13h为JcHSP-17.5蛋白的最佳诱导表达条件,使用200mmol/L咪唑缓冲液纯化蛋白后,每500mL菌液可得到1.345mg的电泳纯蛋白,该蛋白在高温(45℃)条件下能够阻止苹果酸脱氢酶(MDH)发生聚合反应,表现出较强的分子伴侣活性.
关键词
麻疯树
小热激蛋白
异源表达
亲和纯化
热激聚合反应
Keywords
Jatropha curcas L. , small heat shock protein, heterologous expression, affinity purifica-tion, heat shock agglutination
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
温度、酸碱度和盐离子浓度对curcin紫外光谱和荧光光谱的影响
晏华立
蒋楠
樊佳
黄曌
徐莺
陈放
《资源开发与市场》
CAS
CSSCI
2014
2
下载PDF
职称材料
2
麻疯树核糖体失活蛋白Curcin2的原核可溶性表达及其抗真菌活性研究
邵子静
蒋楠
晏华立
詹诚
徐莺
陈放
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
原文传递
3
麻疯树小热激蛋白JcHSP-17.5的纯化与活性鉴定
徐漪沙
樊佳
晏华立
徐莺
陈放
《四川大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
原文传递
已选择
0
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