基于全球视角的重楼专利格局分析

目的重楼作为我国传统清热解毒中药,药用历史悠久。近些年,伴随着重楼产业的蓬勃发展,国内外相关专利也日益增多,因此有必要从国际专利视角认识各国关于重楼的专利现状,以求为中国重楼产业的发展提供参考。方法通过incopat全球专利库筛选重楼相关专利,运用统计学方法及各类数据分析软件对有效信息进行分析挖掘。结果获得了重楼专利申请的生命周期、全球专利布局、技术主题、申请人情况、药用相关专利等方面的专利格局。结论重楼产业正进入稳步发展的成熟期,其中A61K(医用配制品)、A61P(化合物或药物制剂)领域是专利聚焦的热点,A61Q(化妆品)、A23L(食品、食料或非酒精饮料)领域从专利角度看具有较大的增长潜力;国际上日本、韩国为重楼领域最主要的技术优势国,中国、美国、欧洲为主要的专利布局地,国内云南、山东、广西总量位居全国前三甲,其中云南在各领域发展较为均衡。从当前重楼的发展现状来看,重楼未来在化妆品原料及外用制剂等领域的开发上具有广阔的前景。

细胞分裂素对川牛膝幼苗根生长发育影响的研究

目的:比较不同浓度6-BA对川牛膝幼苗根生长发育的影响,以进一步探究川牛膝"根粗壮、分支少"的品质特征形成机制。方法:以细胞分裂素6-BA培育31 d后的川牛膝幼苗为研究对象,对其根进行形态参数统计和显微结构观察,并对其内源激素、初级代谢产物采用酶联免疫提取法和植物试剂盒进行含量测定。结果:随着6-BA浓度上升,平均主根长度、平均侧根数均显著减少,而平均主根直径与根木质部面积则明显增加。内源激素(赤霉素GA、玉米素ZT、生长素IAA、脱落酸ABA)含量则分别在Z-2、Z-6浓度时达到最大值,含量显著高于其他浓度。初级代谢产物(可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白)含量随着6-BA浓度升高而逐渐增大,且均在Z-10浓度时达到峰值。相关性分析则显示ZT、ABA与平均主根长度和平均侧根数均呈负相关,初级代谢产物含量和ZT、GA则与平均主根直径呈正相关。结论:高浓度的6-BA通过提高ZT、ABA含量而显著抑制川牛膝幼苗主根长度增加和侧根发育;对主根直径增粗则具有显著促进作用,体现在川牛膝幼苗根木质部面积增大和ZT、GA以及初级代谢产物含量的增加上。

不同干燥加工方式的白芷饮片质量评价

目的评价不同干燥加工方式的白芷饮片质量。方法采用Adobe Photoshop 2020软件测定烘干蒸切、鲜切干燥、半鲜切干燥3种不同干燥方式所得白芷饮片的红绿度(a)、黄蓝度(b)、明度(L)值;采用高效液相色谱法测定3种不同干燥方式白芷饮片中伞形花内酯等9种香豆素类成分的含量;采用SPSS 26.00软件和SIMCA 14.0软件对32批白芷饮片中9种香豆素类成分含量进行主成分分析和偏最小二乘法-判别分析,采用灰色关联度分析饮片粉末颜色和香豆素类成分含量的关联性。结果32批白芷饮片粉末的a、b、L值分别为0~2.4、6.0~20.3、35.6~51.1。伞形花内酯、白当归素、补骨脂素、花椒毒素、佛手柑内酯、氧化前胡素、欧前胡素、珊瑚菜素、异欧前胡素的含量分别为0.026~0.324、0.051~0.549、0~0.113、0~0.398、0.256~1.115、1.434~6.014、1.866~4.039、0.742~1.455、0.789~2.642 mg/g,总含量为6.442~13.382 mg/g。主成分分析结果显示,半鲜切干燥饮片(BZ-27~BZ-30、BZ-32)的综合得分排序靠前,其余两种饮片质量差异较大。偏最小二乘法-判别分析结果显示,半鲜切干燥饮片聚为一类,烘干蒸切饮片和鲜切干燥饮片分离度较差。灰色关联度分析结果显示,L、b值与佛手柑内酯、氧化前胡素、欧前胡素、珊瑚菜素、异欧前胡素及b值与补骨脂素的关联系数均大于0.8,a值与各成分的关联度较低。结论白芷饮片的外观性状与香豆素类成分含量具有较强关联性,可通过颜色大致判断饮片质量,即颜色较白的饮片质量较好;半鲜切干燥饮片质量优于烘干蒸切饮片和鲜切干燥饮片。

川白芷产地趁鲜切制与传统切制方法对其质量的影响

目的通过对川白芷Angelica dahurica产地趁鲜切制与传统切制方法的研究,优化和建立适宜的川白芷切制方法。方法针对川白芷产地趁鲜切制与传统切制过程中所涉及的不同含水量鲜切方法、干燥方法、软化方式等关键操作单元,采用8种不同切制方法对川白芷进行切制。用Adobe Photoshop 2020软件测定川白芷饮片切面颜色,用HPLC法同时测定川白芷饮片中5种香豆素类成分(花椒毒素、佛手柑内酯、欧前胡素、珊瑚菜素、异欧前胡素)的含量,以川白芷饮片切面颜色与5种香豆素类成分含量及其总量为考察指标,结合主成分分析(principal component analysis,PCA)、饮片切面颜色与药效成分含量之间的相关性分析对川白芷饮片的质量和切制方法进行综合评价。结果产地趁鲜切制与传统切制川白芷饮片切面颜色明显不同,以传统切制方法所得川白芷饮片更白[川白芷5~8,其颜色明度(L)值范围为61~67,普遍高于川白芷1~4,其L值范围为34~40];不同切制方法所得川白芷饮片5种香豆素类成分含量及其总量均具有显著性差异;川白芷产地趁鲜切制过程中较适宜的切制方法为川白芷含水量50%时切制,传统切制过程中以川白芷烘干(50℃),蒸透软化15 min后切制为较适宜的切制方法;川白芷饮片切面颜色与药效成分含量之间略呈正相关。结论切制方法对川白芷饮片质量的影响至关重要,产地趁鲜切制以川白芷含水量50%时切制为宜;传统切制以川白芷烘干(50℃),蒸透软化15 min后切制最佳。饮片切面颜色结合药效成分的定量测定可作为评价川白芷切制方法优选的一种快速检测方法。

基于incoPat专利数据库的白芷专利格局分析

白芷为我国常用大宗中药材之一,药用历史悠久。基于incoPat专利数据库对全球范围内近20年的白芷专利数据进行检索,共检索出白芷相关专利16285件,运用常见的可视化图表分析方法,从全球发展趋势、技术研发热门领域、专利布局、专利价值和质量、功效应用等方面对白芷专利进行格局分析。分析表明,白芷当前研发正进入新的发展阶段;白芷中药材、中成药、化妆品及具有保健功能的食品和饮品为当前白芷的技术研发热点;中、韩2国为全球主要的白芷专利布局地;我国白芷专利虽数量巨大,但专利价值和质量与世界水平仍有一定差距;白芷在治疗鼻炎、头痛、美白肌肤等方面具有较高的认可度与关注度。从白芷当前的发展趋势来看,未来白芷领域尚有广阔的发展空间,我国白芷专利申请人可根据自身发展优势、发展短板和全球发展机遇、国际挑战制定正确且符合自身的发展策略。

基于网络药理学和分子对接技术探讨桃红四物汤治疗原发性痛经的有效成分及作用机制

通过网络药理学结合分子对接技术研究桃红四物汤治疗原发性痛经的有效成分及作用机制。首先利用TCMSP平台检索桃红四物汤中6味中药的化学成分和作用靶点,并通过DrugBank,OMIM,TTD和CTD等数据库筛选出治疗PD的靶标,借助Uniprot数据库对靶点进行基因注释,取药物-疾病交集基因通过Cytoscape 3.7.2构建药物-化合物-靶点网络,再基于STRING构建PPI蛋白互作网络,根据拓扑学参数筛选桃红四物汤治疗PD的核心靶点,通过DAVID进行GO功能富集分析,KOBAS 3.0进行KEGG通路富集分析,最后将网络中度值较高的成分与核心靶点进行分子对接。分析结果显示网络中包含槲皮素、山柰酚、木犀草素、杨梅酮、阿魏酸等36个化合物和PTGS2,PTGS1,PGR,PPARG等99个靶点,GO功能富集分析得到102个GO条目(P<0.01),KEGG通路富集得到228条信号通路(P<0.05),主要涉及炎症因子、免疫调节、激素水平调节、中枢镇痛以及平滑肌痉挛等信号通路。分子对接结果显示主要活性成分与靶点均能自发结合。该研究初步揭示了桃红四物汤通过多成分-多靶点-多通路治疗原发性痛经的作用机制,为桃红四物汤的机制研究提供理论依据。

基于叶绿素代谢途径的不同类型厚朴转录组与蛋白质组学研究

厚朴是一种传统中药材,在其多年的种植过程中,由于不同种源种子的交换,导致厚朴叶片呈现较多的分化类型。笔者经走访调查发现四川省大部分地区分布有厚朴(CH)、凹叶厚朴(DA)、小凹叶厚朴(XA)及柳叶厚朴(LY)4种类型,且不同类型厚朴在生长速率、化学成分、叶形及叶色等方面存在明显差异。该研究以川产不同类型的厚朴叶(DA,XA,LY,CH)为研究对象,测定其叶绿素含量,采用高通量技术对不同类型的厚朴叶片组织进行转录组学测序,使用一种包含TMT标记和LC-MS/MS的整合方法来量化不同类型厚朴叶整个蛋白质组的动态变化。结果表明CH的叶绿素含量最低,DA的叶绿素含量最高;转录组和蛋白质组学检测发现DA中参与叶绿素合成途径的谷氨酰-tRNA还原酶、尿卟啉原脱羧酶(UROD)、氧依赖性原卟啉原-Ⅲ氧化酶(ODCO)、原卟啉原氧化酶(PPO)、镁螯合酶亚基ChlD、原卟啉镁Ⅸ单甲酯[氧化]环化酶(MPPMC)等较CH,XA,LY中均显著上调,与DA在4个类型中叶绿素质量分数最高(37.56 mg·g^-1 FW)检测结果一致。将参与叶绿素合成途径相关的部分限速酶如ODCO,PPO,MPPMC等进行平行反应检测(parallel reaction monitoring,PRM)验证,结果表明DA中限速酶的含量均高于其他3个类型。因此,该研究基于不同类型厚朴叶色差异,通过对不同类型厚朴叶片中叶绿素代谢途径进行初步研究,从分子水平上探究引起叶色差异的相关基因和蛋白,以期为研究不同类型厚朴在生长发育上的差异奠定基础。

基于成分变化研究厚朴“发汗”过程中颜色与酶促反应的关系

该研究为探索厚朴“发汗”过程中酶促反应对药材颜色的影响,通过Q Exactive测定厚朴“发汗”不同时期的主要代谢产物,对厚朴“发汗”过程中药材颜色指标进行量化,并通过ELISA法测定“发汗”不同时期多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、酪氨酸酶等酶活性,采用灰度关联法对药材颜色、化学成分和酶活性进行灰度关联分析。研究结果表明厚朴药材在不同方法“发汗”过程中代谢物质变化规律相近,其中变化较为明显的初级代谢产物为氨基酸类、核苷酸类和糖类等化合物,次级代谢产物为酚类和苯丙素类等化合物,不同“发汗”方法共同上调化合物包括L-谷氨酸、乙酰精氨酸、次黄嘌呤、黄嘌呤等11种化合物,共同下调化合物包括L-精氨酸、L-天冬氨酸、苯丙氨酸、胞苷等6种化合物。厚朴“发汗”过程中明度值(L^(*))、红绿色值(a^(*))、黄蓝色值(b^(*))持续降低;“发汗”期间PPO与POD的活性变化与药材颜色参数值变化规律一致。主要差异化合物、粉末色度参数与酶活性的灰度关联分析结果表明氨基酸、酚类等主要差异代谢物与色度参数L^(*)、a^(*)、b^(*)密切相关;POD与氨基酸类和酚类化合物关联度较高,PPO与酚类化合物关联度较高。结合PPO和POD的特性可知,厚朴“发汗”后颜色变化与PPO和POD主导的酶促褐变密切相关。该研究通过分析厚朴“发汗”过程主要差异代谢产物-颜色参数-酶活性的关联性,揭示厚朴“发汗”物质变化的共性规律,探明厚朴“发汗”前后颜色变化与酶促反应的关系,为研究厚朴“发汗”机制提供一定参考,对保障厚朴药材品质具有重要意义。

金果榄化学成分和药理作用研究进展及其质量标志物(Q-Marker)预测分析

金果榄为喉科要药,民间常用于治疗炎症和胃痛等,疗效显著,为苗、壮、瑶族等少数民族习用药物;同时被《中国药典》收载,具有清热解毒、利咽止痛等功效。现代药理学研究表明金果榄具有抗炎、镇痛、抑菌、抗溃疡、抗肿瘤、降血糖、抗氧化等药理作用,化学成分以二萜类、生物碱类和甾体类为主,其中克罗烷型二萜如古伦宾、异喹啉类生物碱如巴马汀为主要活性成分。对金果榄的化学成分、药理作用和安全性评价进行综述,并从植物亲缘学及成分特异性、成分与中药有效性的关联、成分可测性等方面对金果榄的质量标志物(quality marker,Q-Marker)进行预测分析,并预测古伦宾、巴马汀、药根碱、非洲防己碱、木兰花碱等可作为其Q-Marker,为建立和完善其质量标准提供参考。

基于种子质量的川白芷产区划分合理性研究

目的对来自主、副产区及不同花枝的川白芷种子质量展开研究,验证传统川白芷产区划分的合理性,优化川白芷传统留种方式。方法测定26批川白芷种子发芽率、发芽势、千粒重、电导率、饱满率、净度、含水量等指标参数,采用相关性分析及主成分分析(PCA)筛选质量评价指标,依托筛选出的质量评价指标对不同产地、不同花枝的川白芷种子进行质量评价,并依据偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)验证质量评价结果。结果发芽率与发芽势、电导率之间的关联性系数分别为0.848、0.725,发芽势与电导率之间的关联系数为0.694,千粒重与其他指标关联性较弱;主成分分析结果显示发芽率贡献系数最大,其次为电导率、发芽势。主产区所产种子各项质量评价指标均显著高于副产区所产种子,且主产区所产种子发芽率、电导率的相对标准偏差较副产区所产种子小;顶花所结种子各项质量指标平均值显著高于其余花枝所结种子,不同花枝所结种子萌发率、千粒重、电导率的相对标准偏差分别为10.03%、10.80%、18.74%。结论发芽率、电导率、千粒重可作为川白芷种子质量评价的重要指标,依据其展开的质量评价结果科学、可行。从质量评价结果可知,主产区所产川白芷种子较副产区质量更好,可控性更强,证明川白芷传统道地产区划分科学、合理;顶花所结种子质量优于其余花枝所结种子,而主边花与次边花所结种子质量差异不明显,故三者均可作为种源留种。该研究可为川白芷种子质量控制提供理论依据,为各产区引种栽培川白芷提供参考,为川白芷药材道地性研究奠定基础。