大熊猫甲状腺指标测定与功能分析

本研究对58份亚成年、72份成年和18份老年大熊猫Ailuropoda melanoleuca血清中6项甲状腺指标进行了测定,分析比较了不同年龄、不同性别甲状腺功能的差异,确定了大熊猫甲状腺功能6项指标的参考范围。亚成年的甲状腺素和游离甲状腺素、游离三碘甲状腺原氨酸均极显著高于成年和老年(P<0.01),亚成年、老年的三碘甲状腺原氨酸显著、极显著高于成年(P<0.05;P<0.01),甲状腺球蛋白抗体和抗甲状腺过氧化物酶抗体水平在各年龄组间均无显著性差异(P>0.05);老年雄性的三碘甲状腺原氨酸、游离三碘甲状腺原氨酸极显著、显著高于老年雌性(P<0.01;P<0.05),老年雌性的甲状腺球蛋白抗体水平显著高于老年雄性(P<0.05),而老年雄性的抗甲状腺过氧化物酶抗体水平显著高于老年雌性(P<0.05)。研究提供了大熊猫甲状腺6项关键指标的参考范围,为大熊猫健康保健和疾病防治提供了参考数据。

四种不同血清型IBV的多重PCR鉴定方法的建立

为了建立同时区分4种不同血清型IBV的多重PCR方法,试验针对IBV H120型、4/91型、QX型、LDT3型4种常用商用疫苗株的S1基因序列,分别设计特异性引物,并对退火温度、循环数和引物浓度等条件进行优化及特异性、敏感性、重复性等试验。结果表明:试验可特异性的扩增出IBV LDT3型(860 bp)、H120型(679 bp)、4/91型(499 bp)、QX型(373 bp)毒株的目的条带。该检测方法仅对IBV的四种疫苗株检测为阳性,对NDV La Sota株、ALVJS09GY3株、ILTV Connecticut株、MDV CVI988株、FAd V SCneijiang株、IBV GI-19型、IBVGI-28型以及IBV GI-13型为阴性,对LDT3型、H120型、4/91型、QX型四种不同血清型的IBV重组质粒的检测下限分别为1.13×10^(5)copies/μL、7.56×10^(4)copies/μL、4.61×10^(6)copies/μL和2.94×10^(4)copies/μL。相同条件下进行重复性试验可获得一致性的结果。应用建立的多重PCR方法对2019年市场上收集的20种不同厂家以及不同生产批号的IB疫苗产品进行检测,产品毒株种类标识与实际样品符合率为55%,而45%的IB疫苗毒株与实际标识不符,说明部分疫苗中存在其他IB疫苗株的污染。研究建立的多重PCR方法可应用于市场上不同IB疫苗毒株的鉴定以及临床疫苗样品毒株单一性检测,为IB疫苗的使用提供参考。

牦牛德尔卑沙门氏菌的分离、鉴定及致病性研究

为调查四川省阿坝州红原县牦牛腹泻病因,本课题组从红原县4所养殖场采集牦牛腹泻粪便16份,并对分离株进行多位点序列分型、血清型鉴定、耐药性试验及小鼠致病性试验.结果表明:16份样品共计分离出16株沙门氏菌,均为德尔卑沙门氏菌ST71型,100%菌株对四环素、氨苄西林、氯霉素和头孢噻呋多重耐药;选取腹泻较严重牦牛粪样沙门氏菌分离株(编号15XLR)进行致病性试验,得出分离株15XLR的半致死剂量为1.2×10^7 CFU,病理切片结果显示小鼠后脾脏、肠道损伤严重.本研究对红原县牦牛腹泻病因进行了调查研究,并证实德尔卑沙门氏菌除感染猪鸡外,其能够入侵牦牛机体,提示牦牛腹泻疾病的防控应注重沙门氏菌的感染以及在牦牛群体中的传播.