莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)ZLX10对发酵雪茄烟叶中性致香成分的影响

为探究烟草源微生物单菌发酵对雪茄烟叶挥发性致香成分的影响,采用GC-MS检测莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)ZLX10发酵雪茄烟叶中性致香成分,筛选差异致香成分,并与感官评价进行相关性分析,结合ROAV值变化,明确ZLX10提升雪茄烟叶感官品质的关键致香成分。结果表明,ZLX10发酵雪茄烟叶后,香气总量和大多数中性致香成分含量均显著提高,共筛选得到15种差异中性致香成分,共有10种致香成分显著上调(P<0.05),其中巨豆三烯酮A、巨豆三烯酮B、6-甲基-5-庚烯-2-酮、2,6,6-三甲基-2-环己烯-1,4-二酮、茄酮和植物醇与烟叶香气呈显著正相关(P<0.05),可认为是增加烟叶干香和花香的关键差异致香成分;共有5种致香成分显著下调(P<0.05),其中苯乙醛和2,4-二叔丁基-6-硝基苯酚与烟叶刺激性呈显著正相关(P<0.05),对烟叶香气有较大的负面影响。由此可知,ZLX10发酵能促进雪茄烟叶香气质和香气量得到提升,这为人工接菌发酵雪茄烟叶提供了基础。

地衣芽孢杆菌FZ 1对发酵雪茄烟叶中性致香成分的影响

【目的】探明烟草源微生物发酵对雪茄烟叶品质和挥发性致香成分的影响,为人工接菌发酵雪茄烟叶工业化生产提供菌种资源和理论依据。【方法】利用从进口雪茄烟中筛选的1株地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)FZ1发酵雪茄烟叶,对其进行感官评价,通过GC-MS检测烟叶中性致香成分,利用SIMCA进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘分析(OPLS-DA),使用变量投影重要度(Variable Importance in Projection,VIP)>1和独立t检验中P<0.05筛选差异致香成分,并结合感官评分进行相关性分析与ROAV值变化,明确地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)FZ1提升雪茄烟叶感官品质的关键致香成分及其对香气的贡献。【结果】雪茄烟叶经FZ1发酵后香气明显提升、刺激性减少;香气总量提高18.84%,以烯烃类、酮类和醇类增加为主;共筛选出15种差异中性致香成分,其中,11种差异致香成分显著上调,新植二烯、金合欢基丙酮、茄酮、香叶基丙酮、2,4-二叔丁基苯酚和植物醇6种与雪茄烟叶香气呈显著正相关关系,是FZ1发酵雪茄烟叶的关键差异致香成分;另有正十五烷、邻苯二甲酸二丁酯、苯乙醛和2,4-二叔丁基-6-硝基苯酚共4种差异致香成分显著下调,其中,2,4-二叔丁基-6-硝基苯酚和苯乙醛与雪茄烟叶的刺激性呈显著正相关关系;茄酮、香叶基丙酮、巨豆三烯酮A、巨豆三烯酮B和植物醇对香气的贡献增大。【结论】FZ1发酵雪茄烟叶可明显改善香气品质,增加关键差异致香成分。

ACC脱氨酶菌株的分离筛选及对丹参毛状根的影响

为研究1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-Aminocylopropane-1-carboxylic acid,ACC)脱氨酶菌株对丹参次生代谢物合成的影响,使用筛选获得的ACC脱氨酶活性最强的丹参根际菌株对丹参毛状根进行诱导,并分析诱导前后毛状根生物量以及药用活性物质含量的差异。结果表明:获得了ACC脱氨酶活性最高的菌株为DS3T3,其酶活力达到0.3899U/mg,经鉴定该菌株为假单胞菌属细菌(Pseudomonas sp.);丹参毛状根经该菌株诱导处理后,其干重与对照组相比增加16.22%,主要酚酸物质总量增加16.07%;对DS3T3进行进一步的测定结果表明,该菌株还具有固氮、产铁载体及产吲哚-3-乙酸和水杨酸等植物激素的能力。因此,该菌株可作为提高丹参产量以及品质的候选菌株。

三七根腐病原菌拮抗菌的筛选与活性分析

中药材三七的种植产业发展受根腐病影响十分严重,通过筛选高效、稳定的三七根腐病原菌拮抗菌株可对三七进行生物防治。采用平板对峙试验,从三七植株中筛选出2株拮抗细菌菌株WZZ-6和WZZ-25,并对其进一步的活性测定。结果表明:WZZ-6和WZZ-25菌株对柱孢菌(Ilyonectria mors-panacis)病原真菌有较好的抑制活性,病菌菌丝的生长抑制率都超过50%,其中菌株WZZ-6抑菌率高达72%;对三七离体块茎、植株的根腐病均具有较强的拮抗作用,防治效果高达100%。16SrDNA鉴定结果显示:WZZ-6和WZZ-25分别为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis),序列相似度分别为100%和99%。拮抗菌株WZZ-6和WZZ-25有望成为三七根腐病生物防治的新材料。

西瓜枯萎病多功能生防细菌的筛选和抗病效果

由尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum,FON)侵染引起的西瓜枯萎是一种毁灭性的土传病害,利用有益微生物是生产上防治西瓜枯萎病最具潜力的方法。采用耐酸耐盐培养基和平板对峙法筛选出一株既耐酸耐盐,又能拮抗西瓜枯萎病原菌的多功能生防菌株ZJT2,对其耐酸耐盐活性及抗病效果进行测定,并进一步对其进行分子鉴定。结果表明:菌株ZJT2可耐受pH值为4.0、NaCl质量分数为11%的培养条件,且在正常土壤中该菌株对西瓜枯萎病原菌的防治效果高达100%;在设施土壤(酸化和盐渍化土壤)中该菌株对西瓜枯萎病原菌的防治效果高达67%;16S rDNA鉴定表明菌株ZJT2与暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)具有很高的遗传相似性,同源性为99%。多功能生防菌株ZJT2有望成为酸化及盐渍化土壤中西瓜枯萎病生物防治的新材料。

沙福芽孢杆菌GL2对雪茄烟叶中性致香成分的影响

【目的】利用人工接菌发酵雪茄烟叶是雪茄烟叶工业化生产的必然趋势,而中性致香成分是雪茄烟叶重要的品质成分。探讨沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)GL2对雪茄烟叶中性致香成分的影响。【方法】GL2由课题组前期从古巴雪茄烟高希霸罗伯图中筛选得到,利用其发酵雪茄烟叶,采用蒸馏萃取-气相色谱-质谱法测定烟叶中的中性致香成分,同时结合多元统计方法进行分析。【结果】GL2发酵后雪茄烟叶香气总量和大多数中性致香成分含量显著提高(P<0.05),增加的致香物质主要有烯烃类、酮类和醇类。采用VIP>1和P<0.05共筛选得到13种差异中性致香成分,其中9种显著上调且与烟叶香气呈正相关,有7种达到显著正相关(P<0.05)、为关键差异中性致香成分,分别是2,6,6-三甲基-2-环己烯-1,4-二酮、2,6,6-三甲基-1,4-环己二酮、香叶基丙酮、金合欢基丙酮、新植二烯、茄酮和植物醇;另有4种致香成分显著下调,且与烟叶香气呈负相关,其中2,4-二叔丁基-6-硝基苯酚与雪茄烟叶香气呈显著负相关(P<0.05)。2,6,6-三甲基-2-环己烯-1,4-二酮、香叶基丙酮、茄酮和植物醇对发酵后雪茄烟叶的香气贡献度增大,使整体香气的干香、花香更加浓郁,可丰富雪茄烟叶香气、提升雪茄烟叶感官品质。【结论】在雪茄烟发酵过程中接种沙福芽孢杆菌有利于提升雪茄烟叶品质,为利用生物技术改善雪茄烟叶发酵品质提供理论支持。