慢性心力衰竭“虚-瘀-毒”病机探析

心力衰竭是多种心血管疾病的终末阶段,慢性心力衰竭“虚-瘀-毒”病机贯穿心力衰竭的过程。早期前心力衰竭阶段为“因虚致瘀”,从心力衰竭的代偿期到失代偿期为“瘀久成毒”,是心力衰竭治疗的关键时期;“瘀毒从化”是心力衰竭病因繁多、变证频发的集中体现;失代偿期的重症心力衰竭“诸毒并现,正虚不复”,此时多种病邪皆已化毒,五脏六腑皆受毒害,正气衰惫,造成阴竭阳脱的局面。针对“虚-瘀-毒”病机,提出益心解毒、活血化瘀是主要治法,在临床和基础实验中均显示出独特优势。

心力衰竭气虚证动物模型的建立与评价

目的:建立心力衰竭气虚证的病证结合小鼠模型,并对其进行评价。方法:将44只昆明种(KM)小鼠随机分为假手术组、模型组、四君子汤加减组(12.89 g·kg^(-1))。模型组及四君子汤加减组给予主动脉弓缩窄术(TAC)处理,假手术组只穿线不缩窄。采用超声心动图、病理学检测对心力衰竭进行疾病模型判断及药效学评估;从宏观表征、微观生物学、方剂反证3个层面分别对小鼠的一般性体征、体质量、旷场、抓力、线粒体超微结构等宏、微观表征进行采集,并测定线粒体分裂、融合蛋白表达,以判断证候类型。结果:TAC术后8周,相较于假手术组,模型组心脏左室射血分数(LVEF)显著降低(P<0.01),四君子汤加减可显著改善小鼠LVEF(P<0.05)。心脏苏木素-伊红(HE)染色结果显示,模型组出现炎性细胞浸润及血管壁增厚,四君子加减可显著改善炎性细胞浸润。在6~8周,相较于假手术组及四君子汤加减组,模型组小鼠出现显著的毛发不齐,毛发枯黄、活跃度降低及精神萎靡的情况。同时与假手术组比较,模型组体质量增长值明显降低(P<0.05);与模型组比较,四君子汤加减组体质量增长值明显上升(P<0.05)。在6~8周,与假手术组比较,模型组旷场距离及旷场速度均明显下降(P<0.05),而四君子汤加减组在第8周明显改善旷场距离及旷场速度(P<0.05)。在6~8周,与假手术组比较,模型组抓力最大值明显下降(P<0.05),而四君子汤加减组TAC术后8周抓力最大值明显增加(P<0.05)。腓肠肌透射电镜显示,模型组肌组织基质不均匀,线粒体肿胀,体积变大,基质溶解,嵴缺失,空泡化;四君子汤加减组可改善线粒体肿胀,嵴断裂,基质空化。蛋白免疫印迹法(Western blot)结果显示,与假手术组比较,模型组小鼠腓肠肌分裂蛋白动力相关蛋白1(DRP1)表达显著增高(P<0.01),线粒体融合素1(MFN1)表达明显降低(P<0.05)。同时与模型组比较,四君子汤加减组小鼠腓肠肌分裂蛋白DRP1表达明显降低(P<0.05),MFN1表达显著升高(P<0.01)。结论:TAC术后小鼠6~8周出现显著的气虚证候表现,同时伴随腓肠肌线粒体形态功能异常,而四君子汤加减可显著改善这一过程。

巨噬细胞在心力衰竭中的作用及中医药干预研究进展

心力衰竭作为世界上高发病率和高病死率的疾病之一,严重影响人类社会的健康发展,目前,针对心力衰竭的治疗手段有限,迫切需要发现新的疾病治疗靶点,开发新的治疗策略。巨噬细胞作为伴随心力衰竭发生发展的先天免疫细胞,在维持心脏稳态,调控心脏应激等方面发挥着重要作用。近年来,巨噬细胞在心脏中的作用受到了越来越多的关注,成为干预心力衰竭的潜在靶点,随着技术手段的提高,巨噬细胞参与心力衰竭的研究取得了重要进展。中医药在调节炎症反应、防治心力衰竭、维持机体稳态方面具有显著疗效。该文从心脏巨噬细胞来源及分类、巨噬细胞与心脏炎症、巨噬细胞与心肌纤维化、巨噬细胞与心脏血管生成和巨噬细胞与心脏电传导等5个方面将近年来心脏巨噬细胞在心力衰竭的作用及中医药的应用进行归纳总结,为后续的基础研究和临床应用提供思路。

基于代谢组学探究鸡鸣散改善射血分数保留的心力衰竭的作用机制

该研究采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术,进行非靶向代谢组学研究,分析了鸡鸣散干预高脂饮食(high-fat diet,HFD)和一氧化氮合成酶抑制剂(Nω-nitro-L-arginine methyl ester hydrochloride,L-NAME)诱导的射血分数保留的心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)小鼠血浆中的潜在生物标志物,探究鸡鸣散改善HFpEF的药效和作用机制。随机将8周龄雄性C57BL/6N小鼠分为对照组、模型组、恩格列净组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))、鸡鸣散高剂量组(14.3 g·kg^(-1)·d^(-1))和鸡鸣散低剂量组(7.15 g·kg^(-1)·d^(-1)),对照组予以低脂饲料,模型组和各给药组予以高脂饲料,各组小鼠均自由饮水,模型组和给药组的小鼠饮水中加入一氧化氮合酶抑制剂(0.5 g·L^(-1)),从造模第1天开始给药,15周后检测各组小鼠血压和心功能,取小鼠心脏进行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察病理改变,Masson染色检测各组小鼠心肌胶原纤维沉积;取小鼠血浆进行非靶向代谢组学分析,并使用MetaboAnalyst 5.0进行代谢通路分析。结果显示,与模型组相比,鸡鸣散高、低剂量组血压显著下降,心肌向心性肥厚和左心室舒张功能障碍明显改善;HE和Masson染色显示,鸡鸣散高、低剂量组可显著改善心肌纤维化;代谢组学共筛选出23个血浆中的潜在生物标志物,分析出8条关联性较强的代谢通路,包括亚油酸代谢(linoleic acid metabolism)、组氨酸代谢(histidine metabolism)、α-亚麻酸代谢(alpha-linolenic acid metabolism)、甘油磷脂代谢(glyce-rophospholipid metabolism)、嘌呤代谢(purine metabolism)、卟啉与叶绿素代谢(porphyrin and chlorophyll metabolism)、花生四烯酸代谢(arachidonic acid metabolism)、嘧啶代谢(pyrimidine metabolism)。该研究明确了鸡鸣散具有降低血压和改善HFpEF的药效,并利用代谢组学技术揭示了鸡鸣散发挥药效的机制,为鸡鸣散在心力衰竭治疗中的临床运用提供了实验依据,为丰富和发展HFpEF的中医治法提供了新的视角。

鸡鸣散对心肌梗死小鼠心肌纤维化的影响及作用机制研究

鸡鸣散是一种传统古方,临床用于心力衰竭的治疗有较好疗效,但其机制缺乏进一步探讨。该研究采用小鼠冠状动脉结扎模型,评估其对心肌梗死小鼠心肌纤维化的影响及作用机制。拟采用冠状动脉左前降支结扎的方法构建心肌梗死后心力衰竭小鼠模型,通过超声影像图检测、苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、Masson染色及天狼猩红染色、血清心肌酶谱检测等多角度对鸡鸣散的药效进行评价;基于Western blot法对心室重构的关键蛋白转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、无翅型MMTV整合位点家族成员3a(wingless-type MMTV integration site family member 3a,Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶2(matrix metallopeptidase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶3(matrix metallopeptidase 3,MMP3)、TIMP金属蛋白酶抑制剂1(TIMP metallopeptidase inhibitor 1,TIMP1)和TIMP金属蛋白酶抑制剂2(TIMP metallopeptidase inhibitor 2,TIMP2)进行检测。结果显示,与模型组相比,鸡鸣散高、低剂量组小鼠左心室收缩末内径(left ventricular intemal diameter in systole,LVID;s)和舒张末内径(left ventricular intemal diameter in diastole,LVID;d)均显著降低,左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)和短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)明显提高,心肌梗死后小鼠心脏功能有效改善;可有效降低心肌梗死后心肌损伤标志物如肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)和乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)的水平,保护缺血心肌;HE染色显示,鸡鸣散可减弱心肌梗死后心肌炎症细胞浸润;Masson染色和天狼猩红染色显示,鸡鸣散能够有效抑制心肌纤维化水平,降低心肌组织中胶原Ⅰ/Ⅲ的含量比,改善心肌梗死后胶原重构。Western blot结果显示,鸡鸣散可降低TGF-β1、α-SMA、Wnt3a和β-catenin蛋白表达,降低MMP2、MMP3和TIMP2蛋白表达,提高TIMP1蛋白表达,提示其通过干预心脏成纤维细胞转分化来源、心肌细胞外基质代谢降低胶原Ⅰ和α-SMA含量,发挥抗心肌梗死后心肌纤维化的作用。该研究揭示了鸡鸣散通过改善心室重构发挥治疗心肌梗死的作用,为后续探究鸡鸣散物质药效研究铺路。

清热解毒中药调节炎症反应对心血管疾病异病同治的意义

心血管疾病严重影响人身体健康,其发病率随人口老龄化的加剧而持续增高。针对心血管疾病的中西结合治疗已取得一定效果,但仍未满足临床需要。研究表明炎症反应在心血管疾病的发生发展中具有重要作用,且相关机制存在共性特征,如心血管疾病中表达C-C趋化因子受体2(C-C motif chemokine receptor 2,CCR2)的巨噬细胞数量增加并促进炎症反应,核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体的过度激活导致炎症因子水平的升高。中医对于心血管疾病的主要病机与治法也有了新的认识与发展,心系疾病热毒学说和清热解毒治法逐渐受到关注,黄连解毒汤、四妙勇安汤等治疗心血管疾病的临床与药理研究也逐渐增加。该文通过分析心血管疾病炎症反应机制的共性特点,探讨不同心血管疾病采用清热解毒法调节炎症、异病同治的预防和治疗的意义,为心血管疾病异病同治的临床治疗和药物研究提供思路与借鉴。