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尼克酰胺与exendin-4诱导胰腺干细胞向β细胞定向分化研究
被引量:
1
1
作者
解谦
刘利萍
+1 位作者
普鸿丽
李宝园
《山西大同大学学报(自然科学版)》
2014年第3期37-40,共4页
目的体外分离胰腺干细胞,选择最佳培养条件探索胰腺干细胞在体外环境下向β细胞的分化情况.方法取SD大鼠胰腺组织,胶原酶消化,密度梯度离心获得纯化的胰腺导管上皮细胞.采用分步诱导法诱导胰腺导管上皮细胞向胰岛β细胞分化;用胰岛素释...
目的体外分离胰腺干细胞,选择最佳培养条件探索胰腺干细胞在体外环境下向β细胞的分化情况.方法取SD大鼠胰腺组织,胶原酶消化,密度梯度离心获得纯化的胰腺导管上皮细胞.采用分步诱导法诱导胰腺导管上皮细胞向胰岛β细胞分化;用胰岛素释放实验检测胰岛功能,免疫荧光法检测nestin,PDX-1,CK-19,CK-20胰岛素及胰高血糖素等的表达.结果胰腺消化培养6~12h,可看到胰腺导管上皮细胞贴壁生长,通过4步诱导培养,nestin阳性细胞快速生长,并可分泌胰岛素.结论体外分离的成人胰岛前体细胞,在诱导因子的作用下,胰腺干细胞可定向分化为β细胞,有望应用于糖尿病的治疗.
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关键词
胰腺干细胞
定向分化
Β细胞
糖尿病
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职称材料
重组β-葡萄糖醛酸苷酶键选择性的半理性改造
2
作者
普鸿丽
吕波
+1 位作者
赵东旭
李春
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期1119-1128,共10页
为了提高Escherichia coli重组表达的β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)的键选择性,本研究以PGUS-E结构与功能关系的推测为指导,选择了可能影响PGUS-E的键选择性的R329、T369、N467位点进行定点饱和突变,利用薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC...
为了提高Escherichia coli重组表达的β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)的键选择性,本研究以PGUS-E结构与功能关系的推测为指导,选择了可能影响PGUS-E的键选择性的R329、T369、N467位点进行定点饱和突变,利用薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)对键选择进行筛选,得到优势突变酶R329K、T369V。结果显示:与PGUS-E酶相比,突变酶R329K、T369V键选择性分别提高26.9%、34.3%。突变酶的酶学性质研究表明,突变酶的最适p H和温度与PGUS-E一致,但其酶催化效率下降。由此可见,R329、T369对酶催化的键选择性和酶的活性有显著影响。综上结果,本文应用饱和突变方法改善了PGUS-E的键选择性,为酶的结构和功能关系理解提供了实验依据。
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关键词
Β-葡萄糖醛酸苷酶
单葡萄糖醛酸基甘草次酸
键专一性
定点饱和突变
原文传递
题名
尼克酰胺与exendin-4诱导胰腺干细胞向β细胞定向分化研究
被引量:
1
1
作者
解谦
刘利萍
普鸿丽
李宝园
机构
山西大同大学生命科学学院
山西大同大学化学与环境工程学院
出处
《山西大同大学学报(自然科学版)》
2014年第3期37-40,共4页
基金
山西省自然科学基金项目[2013011056-6]
文摘
目的体外分离胰腺干细胞,选择最佳培养条件探索胰腺干细胞在体外环境下向β细胞的分化情况.方法取SD大鼠胰腺组织,胶原酶消化,密度梯度离心获得纯化的胰腺导管上皮细胞.采用分步诱导法诱导胰腺导管上皮细胞向胰岛β细胞分化;用胰岛素释放实验检测胰岛功能,免疫荧光法检测nestin,PDX-1,CK-19,CK-20胰岛素及胰高血糖素等的表达.结果胰腺消化培养6~12h,可看到胰腺导管上皮细胞贴壁生长,通过4步诱导培养,nestin阳性细胞快速生长,并可分泌胰岛素.结论体外分离的成人胰岛前体细胞,在诱导因子的作用下,胰腺干细胞可定向分化为β细胞,有望应用于糖尿病的治疗.
关键词
胰腺干细胞
定向分化
Β细胞
糖尿病
Keywords
pancreatic stem cells
directed differentiation
beta cells
diabetes
分类号
Q254 [生物学—细胞生物学]
R587.1 [医药卫生—内分泌]
下载PDF
职称材料
题名
重组β-葡萄糖醛酸苷酶键选择性的半理性改造
2
作者
普鸿丽
吕波
赵东旭
李春
机构
北京理工大学生命学院
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期1119-1128,共10页
基金
国家科学自然基金(Nos.20976014
21376028)
+1 种基金
国家杰出青年科学基金(No.21425624)
高等学校博士学科点专项科研基金(No.20121101110050)资助~~
文摘
为了提高Escherichia coli重组表达的β-葡萄糖醛酸苷酶(PGUS-E)的键选择性,本研究以PGUS-E结构与功能关系的推测为指导,选择了可能影响PGUS-E的键选择性的R329、T369、N467位点进行定点饱和突变,利用薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)对键选择进行筛选,得到优势突变酶R329K、T369V。结果显示:与PGUS-E酶相比,突变酶R329K、T369V键选择性分别提高26.9%、34.3%。突变酶的酶学性质研究表明,突变酶的最适p H和温度与PGUS-E一致,但其酶催化效率下降。由此可见,R329、T369对酶催化的键选择性和酶的活性有显著影响。综上结果,本文应用饱和突变方法改善了PGUS-E的键选择性,为酶的结构和功能关系理解提供了实验依据。
关键词
Β-葡萄糖醛酸苷酶
单葡萄糖醛酸基甘草次酸
键专一性
定点饱和突变
Keywords
β-glucuronidase
glycyrrhetinic acid monoglucuronide
bond selectivity
site-saturation mutagenesis
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
尼克酰胺与exendin-4诱导胰腺干细胞向β细胞定向分化研究
解谦
刘利萍
普鸿丽
李宝园
《山西大同大学学报(自然科学版)》
2014
1
下载PDF
职称材料
2
重组β-葡萄糖醛酸苷酶键选择性的半理性改造
普鸿丽
吕波
赵东旭
李春
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
原文传递
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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