两种硫辛酸对映体对胚胎体外发育的影响

目的探讨(R)-硫辛酸和(S)-硫辛酸对胚胎体外发育的影响。方法解冻复苏卵裂期胚胎,分别在含不同浓度(R)-硫辛酸和(S)-硫辛酸的GⅡ培养基微滴中培养,观察各组的桑胚率、致密化率、囊胚率和优质囊胚率。结果硫辛酸可提高胚胎体外发育率,(R)-硫辛酸浓度10×10-9mol/m3组桑胚率、致密化率、囊胚率和优质囊胚率分别达到了59.2%,55.1%,49.0%和54.2%,均高于其他浓度组(P<0.01)。(R)-硫辛酸浓度10×10-9mol/m3组的桑胚率、致密化率和优质胚胎率均高于(S)-硫辛酸10×10-9mol/m3组(P<0.05)。结论硫辛酸对胚胎体外发育具有促进作用,特别是对桑胚率和囊胚率具有显著的影响。(R)-硫辛酸10×10-9mol/m3组的效果最好。

不同冷冻方法对人睾丸精子冷冻保存效果的研究

目的比较不同冷冻保护剂和不同冷冻载体对人睾丸精子的冷冻保存效果。方法选取在兰州大学第一医院生殖医学专科医院进行诊断性睾丸穿刺获得成熟活动精子的患者,以及行睾丸精子ICSI术后的患者,在知情同意下将剩余睾丸组织冷冻保存,共46例。将每例睾丸组织分为4份,随机分成4组进行冷冻:1.8ml冷冻管+甘油复合冷冻剂(A组,46例);1.8ml冷冻管+Fasrun冷冻保护剂(B组,46例);0.25 ml麦管+Fasrun冷冻保护剂(C组,46例);超微量冷冻麦管+Fasrun冷冻保护剂(D组,46例)。冷冻标本经液氮熏蒸后投入液氮,比较各组复苏后精子活力和复苏率。结果冷冻前各组的活动睾丸精子能够满足ICSI操作所用精子量;冷冻复苏后,C组和D组能够容易找到正常活动精子(≥0.1/200倍视野)的例数显著高于A组、B组(P<0.05);D组解冻后运动精子复苏率显著高于A组、B组(P<0.05),C组解冻后运动精子复苏率显著高于A组(P<0.05)。结论应用改良的超微量冷冻麦管+Fasrun冷冻保护剂能够提高睾丸精子的冷冻复苏率。

改良卵裂期胚胎评级标准的临床应用

目的:探讨改良卵裂期胚胎评级系统在常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的应用价值,验证其科学性和合理性。方法:回顾性分析应用改良卵裂期胚胎评级系统(1级、2级、2.5级、3级、4级)对正常受精第3天胚胎进行评级(1级为最高,4级为最低),并移植2枚胚胎,根据所移植胚胎评级的不同共分为A组(1级+1级)、B组(1级+2级)、C组(1级+2.5级)、D组(2级+2级)、E组(2级+2.5级)、F组(2级+3级)、G组(2.5级+2.5级)、H组(2.5级+3级)和I组(3级+3级)。比较各组间的种植率,同时采用化学发光法对不同评级胚胎培养液中的丙酮酸和可溶性人白细胞抗原-G(sHLA-G)进行分析,结果:在4434个常规IVF-ET周期中,总体上随着移植胚胎评级的递减,种植率呈现出下降趋势,A组最高,I组最低。至少包括1枚2级胚胎的B、D、E、F组种植率均显著高于两枚都是2级以下的胚胎(G、H、I组)(P<0.05),G组种植率(32.13%)显著低于D组(36.19%)和E组(36.47%),并且高于H组(29.97%)和I组(26.31%),差异均有统计学意义(P<0.05)。胚胎培养液中sHLA-G的阳性表达率和丙酮酸摄取量随着胚胎评级的增高,呈现出增加的趋势,并且其2.5级与其他各级之间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:改良卵裂期胚胎评级标准是选择移植胚胎的有效方法,可以反映胚胎发育的潜能。

唯支持细胞综合征患者睾丸组织Boule基因5'调控序列甲基化分析

目的:探讨唯支持细胞综合征(SCOS)患者睾丸组织中Boule基因5'调控序列甲基化状态。方法:收集梗阻性无精子症患者(12例)和SCOS无精子患者(15例)睾丸组织穿刺标本,门诊检查排除精索静脉曲张、隐睾、感染等疾病。试剂盒法提取患者睾丸组织基因组DNA,利用生物信息学方法分析Boule基因5'调控序列的序列特征,采用亚硫酸氢钠测序法检测睾丸组织中Boule基因甲基化状态。结果:Boule基因5'调控区存在一个Cp G岛,SCOS患者Boule基因的甲基化水平(61.4%)显著高于梗阻性无精子症患者(21.7%)(P<0.01),共14个Cp G位点甲基化有显著性差异,分别为-58 bp、-50 bp、-48 bp、-38 bp、-28 bp、-24 bp、-20 bp、-15 bp、-1 bp、+5 bp、+8 bp、+15 bp、+29 bp和+58 bp。结论:SCOS患者Boule基因的甲基化水平显著高于梗阻性无精子症患者,推测这种甲基化变化可能与精子发生障碍有关。

单卵裂期胚胎移植在体外受精-胚胎移植中的临床结局

目的探讨体外受精第3天(D3)单卵裂期胚胎移植在体外受精-胚胎移植中的临床应用前景。方法回顾性分析我院体外受精D3单卵裂期胚胎移植临床结局,收集172个新鲜胚胎移植周期,观察原发不育组和继发不育组、D3移植胚胎细胞数及评级、主动性单卵裂期胚胎移植及被动性单卵裂期胚胎移植与临床妊娠的关系。结果继发不育组女方年龄高于原发不育组,临床妊娠率(胚胎种植率)分别为33.63%、23.73%。D3移植胚胎的细胞数在8细胞以上者妊娠率与细胞数不足7细胞者相比有统计学差异(P<0.01)。主动性单卵裂期胚胎移植组虽然年龄和不育年限高于被动性单卵裂期胚胎移植组,但移植胚胎质量及妊娠率明显高于后者(P<0.01)。被动性单卵裂期胚胎移植组中各年龄段患者的移植胚胎质量没有显著性差异,但年龄低于35岁者有较好的妊娠结局。结论体外受精D3单卵裂期胚胎移植能获得良好的妊娠结果,临床妊娠结局主要与移植胚胎所含细胞数及评分密切相关。其次,年龄不足35岁,不育年限短的不育患者有更好的妊娠结局。

改良单细胞核固定和荧光原位杂交技术在卵裂期胚胎性别诊断中的应用

目的建立一种快速便捷的单细胞核固定和荧光原位杂交(FISH)检测技术用于性别筛选,探究其可行性,同时分析植入前胚胎中非整倍体和嵌合体的发生情况。方法解冻12位患者32枚胚胎,同时选择同期常规冻融胚胎移植周期23位患者51枚胚胎为囊胚培养对照组。激光打孔法活检卵裂期胚胎,每枚胚胎常规活检吸取2个卵裂球,活检后胚胎继续培养囊胚。改良吐温-20/HCl法游离和固定卵裂球细胞核,XY染色体计数探针和18号染色体计数探针同时孵育后荧光镜下观察结果。结果 32枚胚胎中,X、Y和18号染色体正常胚胎24枚,正常率75%;异常胚胎8枚,其中6例为嵌合体胚胎,嵌合体率18.8%。活检组与囊胚培养对照组的囊胚形成率和优质囊胚率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验所建立的改良单细胞核固定和FISH技术能够快速有效地对卵裂期胚胎进行性别选择,对解决性染色体异常和性连锁性疾病性别诊断的生育障碍有一定价值。

高海拔地区低海拔落差对藏、汉族血压、血糖、血尿酸和血脂水平的影响

目的探讨高海拔地区低海拔落差对藏、汉族血压、血糖、血尿酸和血脂水平的影响,为高血压、高血糖、高尿酸血症和高脂血症的预防提供研究资料。方法 244例被调查者为世居或长期生活在海拔3 100m及2 940m的牧区藏族、城镇藏族、城镇汉族人群,测定被调查者收缩压、舒张压、血糖、血尿酸、血脂,对检测结果进行比较。结果 3 100m海拔中,牧区藏族血糖高于城镇藏族血糖(6.21±2.48)mmol/L vs.(4.75±0.77)mmol/L(P<0.01),牧区藏族低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于城镇汉族及城镇藏族LDL-C(2.33±0.76)mmol/L vs.(2.00±0.52)mmol/L vs.(1.93±0.67)mmol/L(P<0.05),但牧区藏族、城镇藏族、城镇汉族受检者之间收缩压、舒张压、血尿酸、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)差异无统计学意义(P>0.05)。2 940m海拔中,城镇藏族及城镇汉族舒张压高于牧区藏族舒张压(78.49±12.07)mm Hg vs.(77.23±11.12)mmHg vs.(67.80±10.18)mm Hg(P<0.01),城镇汉族血尿酸高于城镇藏族及牧区藏族血尿酸(337.56±107.76)μmol/L vs.(275.19±80.00)μmol/L vs.(260.84±78.92)μmol/L(P<0.01),城镇汉族TG高于城镇藏族及牧区藏族TG(2.00±1.27)mmol/L vs.(1.24±0.85)mmol/L vs.(1.19±0.64)mmol/L(P<0.01),城镇汉族TC高于牧区藏族TC(4.49±0.94)mmol/L vs.(4.13±0.91)mmol/L(P<0.05),牧区藏族HDL-C高于城镇汉族HDL-C(1.70±0.40)mmol/L vs.(1.49±0.41)mmol/L(P<0.01),城镇藏族LDL-C高于牧区藏族LDL-C(2.26±0.88)mmol/Lvs.(1.84±0.88)mmol/L(P<0.05),但牧区藏族、城镇藏族、城镇汉族受检者之间收缩压、血糖差异无统计学意义(P>0.05)。3 100m海拔中牧区藏族舒张压、血尿酸、TC、LDL-C高于2 940m海拔中牧区藏族舒张压、血尿酸、TC、LDL-C(78.74±10.38)mm Hg vs.(67.80±10.18)mm Hg(P<0.01),(308.39±96.38)μmol/L vs.(260.84±78.92)μmol/L(P<0.05),(4.57±0.96)mmol/L vs.(4.13±0.91)mmol/L(P<0.05),(2.33±0.76)mmol/L vs.(1.84±0.88)mmol/L(P<0.01)。两个海拔中,城镇藏族之间及城镇汉族之间各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论高海拔地区低海拔落差对牧区藏族舒张压、血尿酸、TC、LDL-C有明显影响。

非高龄患者囊胚整倍体率的形态学影响因素分析

目的:探讨非高龄患者囊胚整倍体率的形态学影响因素。方法:收集2018年1月—2019年7月在本院行胚胎植入前遗传学检测患者,超促排卵后胚胎培养至囊胚阶段,激光法活检4~8个囊胚滋养外胚层细胞,全基因组扩增后进行高通量测序和生物信息学数据分析。囊胚形态学评价参数包括囊胚分期、内细胞团和外滋养层评级等,分析胚胎的形态参数与整倍体发生率的关联。结果:活检402枚囊胚,成功获得396枚(98.5%)囊胚最终测序结果,其中整倍体囊胚190枚(47.9%),多因素分析结果表明相比于4期/5期囊胚和A/B级内细胞团,3期囊胚(OR=0.64,95%CI 0.44~0.92)和C级内细胞团(OR=0.34,95%CI 0.25~0.77)分别所对应囊胚整倍体率较低。结论:4期和5期囊胚的整倍体率较高;C级内细胞团的囊胚整倍体率较低(22.7%),需进行染色体检测后方可移植。

体外受精-胚胎移植术后7天血清雌、孕激素水平与临床结局的相关性研究

目的分析体外受精-胚胎移植术后7天血清雌、孕激素水平与临床结局的相关性。方法选择2015年7月-2015年12月我院行IVF-ET的患者新鲜胚胎移植354周期,均于胚胎移植术后7天采血,检测血清雌二醇和孕酮的水平,统计分析血清性激素与临床结局的相关性。结果鲜胚移植周期妊娠组与未妊娠组相比,雌二醇及孕酮水平均显著升高(P<0.05),鲜胚移植周期雌二醇水平以150pg/ml分组,小于150pg/ml组与大于等于150pg/ml组相比,临床妊娠率显著降低(38.82%vs 72.28%,P<0.05),种植率显著降低(23.74%vs 51.50%,P<0.05),早期流产率显著升高(24.24%vs7.52%,P<0.05),活产率显著降低(24.12%vs 58.15%,P<0.05)。鲜胚移植周期孕酮水平以15ng/ml分组,小于15ng/ml组与大于等于15ng/ml组相比,临床妊娠率显著降低(49.10%vs 62.57%,P<0.05),种植率显著降低(30.30%vs 45.16%,P<0.05),早期流产率显著升高(15.85%vs11.11%,P<0.05),活产率显著降低(32.93%vs 49.73%,P<0.05)。结论 IVF-ET术后7天血清雌、孕激素水平可预测临床结局,雌、孕激素低的患者增加外源性雌、孕激素药物并不能改善结局。

促性腺激素释放激素拮抗剂在性激素依赖性疾病中的应用

促性腺激素释放激素(GnRH)是下丘脑分泌产生的神经激素,其通过下丘脑-垂体-性腺轴调节女性发育和生殖功能,同时还以自分泌和旁分泌的方式作用于垂体外组织。研究发现,GnRH及其受体在正常及异常生殖相关组织均有表达,包括子宫内膜异位症、子宫内膜癌和卵巢癌。GnRH拮抗剂在性激素依赖性疾病治疗中占有重要地位。GnRH拮抗剂类药物治疗子宫内膜异位症、不孕和肿瘤等妇科疾病是国外最新研究的热点之一。

IVF-ET卵巢高反应患者行囊胚移植的临床结局分析

目的探讨体外受精-胚胎移植卵巢高反应患者行囊胚移植的妊娠结局和应用价值。方法回顾性分析2016年5月至2017年2月在我院生殖中心进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕患者资料,卵巢过度刺激综合征(OHSS)高风险患者行双卵裂胚移植84个周期(A组),行普通单囊胚移植58个周期(非优质囊胚),行单优质囊胚移植40个周期,比较三组患者常规临床特征、超促排卵情况、胚胎发育质量、临床妊娠率、种植率、多胎率、中重OHSS发生率。结果三组不孕患者体重指数、基础FSH、Gn使用量、Gn使用时间、HCG注射日E2/P水平、获卵数、受精率、卵裂率等相互比较均无统计学意义(P>0.05)。单优质囊胚组的妊娠率显著高于双卵裂胚移植组和单囊胚移植组(P<0.05)。双卵裂胚移植组的种植率显著低于单囊胚移植组和单优质囊胚组(P<0.05),同时双卵裂胚移植组的多胎率显著高于其他两组(P<0.01)。双卵裂胚移植组的中重度OHSS发生率为10.67%,高于其他两组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论卵巢过度刺激综合征高风险患者行单囊胚移植可以减小0HSS及多胎妊娠的发生,且不影响临床妊娠率。

冻融卵裂期胚胎单个卵裂球体外发育潜能的初步探讨

目的：探讨体外受精．胚胎移植0VF—ET）治疗周期中冻融胚胎来源的单卵裂球体外发育潜能。方法：20例IVF-ET术生育成功后捐赠的91枚多余冷冻的胚胎，解冻后分为〈6-细胞组、6～8-细胞组和〉8-细胞组，将每枚胚胎中的卵裂球分离、取出，每个单卵裂球单独培养于一个液滴中，每24h观察并比较各组间单卵裂球发育情况的差异。结果：6～8-细胞组单卵裂球的卵裂率、紧密化率和囊胚形成率显著高于其它各组。结论：单卵裂球体外培养发育能力及时序与其来源的胚胎发育潜力及发育阶段密切相关；辅助生殖FET周期应优先选择6～8-细胞的胚胎进行移植。

男性大Y染色体核型早补ICSI完全受精失败一例

病例：患者女,28岁,2003年结婚,婚后同居,性生活正常未避孕未育。初潮年龄14岁,月经周期3-5/30-50天,输卵管通液数次诉双侧输卵管通畅。2005年外院子宫输卵管造影（HSG）示子宫大小形态正常,右侧输卵管远端积水,左侧伞端粘连,间质部狭窄。身高168cm,体重52kg。