人体解剖学实验室规范化管理探讨

人体解剖学实验室从实验技术队伍培养、完善实验教学管理制度、加强多种功能性实验室管理、实验室标本模型、安全卫生、实验室开放等方面进行规范化管理与监控。实践证明,规范化地管理人体解剖学实验室是科学有效组织实验教学、保证教学质量、提高技术人员综合素质的有力保证。

数码显微互动系统在形态学实验教学中的应用及维护管理

近年来,数码显微互动教学系统越来越多地被形态学专业所采用。由于信息技术与数码光学及显微镜的结合,使得形态学实验教学有不断的创新,效率的提高对教学质量的提升起到了推动作用。高效的、有时代特点的教学和沟通手段很快被师生们所接受,使现代信息技术有机地融入了医学教育领域。

扬彼此互动之长,弃缺乏沟通之短——从显微互动教室开放使用看形态学实验教学

随着以计算机、网络技术为代表的信息技术的不断发展,显微镜与这些技术的有机结合,使得形态学实验教学迈上了一个新高度,全新的软硬件平台让形态学实验教学充满了现代感与时代气息,但教学中仍存在一些"传统"的问题应给予重视。

人体解剖实验教学中多媒体设备复杂应用的维护与管理

人体解剖学是最重要的医学基础课,各种人体标本、模型是传统解剖实验教学必不可少的教具,为了更好地发挥它们的作用,以多媒体计算机为核心的现代教学手段也很快渗透到解剖实验教学中。因此,在多种教学设备共存的复杂应用环境中,搞好解剖实验的维护管理,是解剖实验教学能够顺利进行的根本保障。

数码网络显微互动教学系统在形态学实验教学中的应用与展望

随着21世纪高速发展的计算机和先进网络技术的应用,形态学实验教学也发生了革命性的变化。为适应这种变化我校加大实验教学的投入,组建全数字化的多媒体数码网络显微互动教室。改变过去单纯依靠解剖标本及显微镜的形态学传统教学模式,大大提高了教学质量。我们充分利用数码网络显微互动教学系统在形态学实验课的优势组建虚拟开放性实验室。

银杏叶提取物及银杏总内酯对帕金森病大鼠模型的作用

目的 :研究银杏叶提取物、银杏总内酯对帕金森病 (PD)大鼠模型的作用。方法 :采用腹腔注射毒扁豆碱引起的急性震颤模型A以及单侧黑质注射微量 6 羟多巴胺造成的慢性旋转模型B ,观察银杏叶提取物、银杏总内酯的预防和治疗作用。结果 :银杏叶提取物 (10 0mg/kg)、银杏总内酯 (12mg/kg)在预防给药 14d后能够明显缩短模型A的震颤时间 ;在给药治疗 14d后能减轻模型B的旋转行为 ,而且银杏总内酯 (12mg/kg)还能使模型B受损侧纹状体的多巴胺含量升高。结论 :银杏叶提取物。

基于3D Slicer应用程序构建大鼠小脑外形微细结构信息数据库

目的:建立大鼠小脑外形三维重构的可视化数据集,为小脑中央核团的三维重建摸索一个可行的方案。方法:实验于2003-03/2005-05在首都医科大学解剖教研室实验室完成。取SD大鼠5只,麻醉后处死取小脑,固定后进行冰冻连续切片、贴片,后经尼氏染色,用扫描仪对各切片进行投射扫描,图像大小为(1868×1491),获取原始图像数据库,并通过首都医科大学生物工程学院开发的配准软件及图像处理软件photoshop7.0对数据库中的数据进行半自动配准及人工分割,应用哈佛大学开发的图像处理专业软件3DSlicer对分割后的数据库进行三维重建。并应用牙科Cad-cam仪器对小脑外形进行扫描,获取完整的小脑外形图像。结果:①小脑尼氏染色获得的原始图像共159张,图像边缘清晰,可见深染的皮质和浅染的白质部分,白质间的小脑中央核深染,边界清晰。②共获得159个小脑外形的三维表面模型数据库(.vtk文件)。在3DSlicer应用程序上可选择小脑外形的三维表面模型数据进行三维显示,并构建了它们的动画显示文件(.gif),使用WindowsMediaPlayer应用软件即可以播放;与应用牙科Cad-cam仪器对小脑表面扫描获取的小脑表面的图像比较,信息更饱满,图像更真实,层次感强。结论:通过切片、配准、分割等方法获得了大鼠小脑外形微细结构信息的数据库,此法更适用于组织微细结构的三维重建。

NMDA受体在β-淀粉样蛋白引起海马神经元突触蛋白改变中的作用

为了研究NMDA受体活性对Aβ引发的海马神经元突触蛋白表达变化的影响,本文运用免疫细胞化学方法检测不同浓度NMDA受体激动剂以及拮抗剂对Aβ诱导的海马神经元突触蛋白变化的影响。结果显示:NMDA可浓度依赖性地缓解Aβ25-35引起的突触蛋白synaptophysin与PSD-95的减少。抑制突触内NMDA受体,NMDA缓解Aβ减少突触蛋白的作用减弱;抑制突触外NMDA受体,对抗Aβ的作用无显著变化。本研究结果提示NMDA受体活性改变影响Aβ诱导的突触蛋白减少,突触内NMDA受体激活可对抗Aβ的毒性作用。突触内NMDA受体活性减弱可能在谷氨酸兴奋毒性中发挥作用。

突触内与突触外NMDA受体在β-淀粉样蛋白减少海马神经元突触后密度蛋白-95表达中的作用

目的研究可溶性Aβ寡聚体在海马神经元中对突触蛋白表达的影响。方法用免疫细胞化学方法检测在NMDA拮抗剂与激动剂作用下,Aβ25～35对突触后密度蛋白(PSD-95)表达的影响。结果Aβ25～35引起的PSD-95减少具有时间、剂量依赖性。PSD-95的减少可被非特异性NMDA受体拮抗剂(MK801)缓解;突触外NMDA受体被阻断时,也可显著缓解;而在突触内NMDA受体被阻断时,无显著性改变。结论Aβ引起的PSD-95减少依赖NMDA受体活性,突触外NMDA受体可能参与Aβ诱导突触蛋白降解。

单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2的表达及益气活血法的影响

目的:肾间质纤维化是肾脏疾病进展到肾功能衰竭的共同通路。通过观察益气活血法中药制剂对肾间质纤维化大鼠肾组织基质金属蛋白酶3,基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法:实验于2006-12/2007-06在首都医科大学解剖与组织胚胎学系实验室完成。①实验动物:Wistar雄性大鼠30只,采用随机数字法分为模型组、西药蒙诺组、中药小剂量组、中药中剂量组、中药大剂量组和假手术组。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。②实验方法:其中前5组行单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型手术,假手术组打开大鼠腹腔后,分离其左侧输尿管,不结扎即关闭腹腔。益气活血法中药制剂主要由生黄芪,当归,赤白芍,丹参,黄芩,车前草,牛膝等组成。西药组、中药小剂量组、中药中剂量组和中药大剂量组于手术前2d开始灌胃给药,1次/d,其药量分别为:西药组蒙诺10mg/(kg·d)、小剂量组0.018mL/(kg·d)、中剂量组0.036mL/(kg·d)、大剂量组0.072mL/(kg·d),连续给予2周。模型组及假手术组用相同体积的生理盐水灌胃。③实验评估:6组大鼠于术后14d麻醉后处死,观察梗阻肾脏病理改变,并用免疫组织化学方法检测肾组织对基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2的表达,通过医学病理图像分析系统对基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2的积分光密度进行统计学分析。结果:30只大鼠全部进入结果分析。肾组织切片免疫组织化学方法结果显示:基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2主要表达部位在肾小管上皮,少量表达在肾间质和肾小球。基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶3在模型组的表达较假手术组明显减弱,两组间积分光密度比较差异有显著性意义(P<0.05);中药大、中剂量组及西药蒙诺组的表达较模型组显著增强,积分光密度差异有显著性意义(P<0.05)。金属蛋白酶组织抑制因子2在模型组的表达较假手术组显著增强,两组间积分光密度比较差异有显著性意义(P<0.05);中药大、中剂量组及西药蒙诺组的表达较模型组有所减弱,两组间积分光密度比较差异有显著性意义(P<0.05);中药小剂量组无论基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶3还是金属蛋白酶组织抑制因子2的表达与模型组相比均较为相似,两组间积分光密度比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:大鼠输尿管梗阻后呈现出的病理损害可能和肾组织基质金属蛋白酶3,基质金属蛋白酶2与金属蛋白酶组织抑制因子2的表达失衡有关,益气活血法可以上调基质金属蛋白酶2,基质金属蛋白酶3的表达,下调金属蛋白酶组织抑制因子2的表达,显示在抑制或延缓肾间质纤维化的进程中具有一定的作用。

无血清培养人肝癌细胞增生率的变化和bFGF在细胞中的表达

采用无血清培养体系 ,研究肿瘤细胞自分泌调控机制。将人肝癌细胞培养在无血清无外源分裂因子培养基中 ,采用细胞原位计数法和免疫组织化学染色法 ,观察不同时相人肝癌细胞增生率的变化以及碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的表达情况。结果 :人肝癌细胞生长良好 ,其增生速度与其分泌的bFGF量成正比。提示 :肝癌细胞在无外源生长因子的条件下通过分泌bFGF ,以自分泌和旁分泌的方式作用于自身和相邻细胞 ,促进细胞生长和增生。

益气活血中药对肾间质纤维化大鼠肾组织中I、Ⅲ型胶原,MMP-1和TIMP-1表达的影响

目的探讨益气活血中药抗肾间质纤维化的作用机制。方法采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型。应用免疫组化等技术,通过医学病理图像分析系统检测I、Ⅲ型胶原蛋白,基质金属蛋白酶1(MMP-1),金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达。结果模型组Ⅲ型胶原蛋白的表达较假手术组显著增强;MMP-1在模型组表达较假手术组显著减弱且分布面积减少,同时模型组TIMP-1的表达与假手术组比较显著增强;中药治疗组与西药蒙诺治疗组都能逆转I、Ⅲ型胶原蛋白,MMP-1和TIMP-1的表达,但两组间无显著差异,中药大剂量的治疗效果明显优于中、小剂量。结论益气活血中药与血管紧张素转换酶抑制剂的治疗效果和机制较为一致,可能通过恢复MMP/TIMP间的网络平衡来减少细胞外基质中胶原蛋白的合成,增加其降解,从而达到减轻或抑制肾小管间质纤维化进程的目的。

医学形态学实验立体化教学模式的构建与应用

实验教学是高等医学教育的重要组成部分,是培养医学生的实践能力、创新能力和综合素质的重要环节和必要手段。立体化教学模式是当前教学研究与改革的重要方向。本研究旨在探索在新的形态学实验课程体系建立的基础上,丰富实验室建设的内涵。通过构建形态学实验立体化教学模式,为学生提供充足的自主学习、开展实践活动的空间,培养医学生的实践能力、创新能力和综合素质,把形态学实验教学水平推上一个新的台阶,促进实验教学质量的进一步提高。

Bcl-2、Fas和Bax凋亡调控基因在限食和脑老化小鼠海马神经元中的表达

目的通过细胞凋亡调控基因Bcl-2、Fas和Bax在限食及脑老化小鼠海马神经元中的表达,研究限食与脑老化的关系。方法3月龄ICR雄性小鼠40只,随机分为4组:脑老化模型组、脑老化模型限食组、限食对照组、对照组,每组10只。10w后进行为期7dMorris水迷宫实验,实验完毕后进行Bcl-2、Fas和Bax免疫组织化学染色。结果①Fas、Bax阳性神经元数目脑老化模型组显著高于脑老化模型限食组、限食对照组显著低于对照组;与此相反,Bcl-2阳性神经元数目在脑老化模型限食组显著高于脑老化模型组,限食对照组显著高于对照组。②Morris水迷宫实验测试:脑老化模型组逃避潜伏期显著大于其他各组;撤台后小鼠的记忆性搜台游泳路程结果各组小鼠间均无显著差异。结论限食可明显降低脑内凋亡相关基因Fas、Bax的表达,同时上调抗凋亡相关基因Bcl-2的表达,从而发挥抗脑细胞凋亡及防止脑老化性学习能力下降的作用。

应用辣根过氧化物酶逆行示踪技术观察左右侧脊神经节间纤维联系

目的:观察大鼠左右侧脊神经节之间的纤维联系,以寻找两侧脊神经节 (背根节)的神经元交互支配这一电生理学现象的形态学基础。方法:实验于2004-11／2005-03在首都医科大学人体解剖学系解剖学实验室进行,取Wistar大鼠48只,根据注射示踪剂的不同随机分为3 组:游离辣根过氧化物酶(300-500g/L)组,麦芽凝集素结合辣根过氧化物酶(10-50 g／L)组和霍乱毒素B单位结合辣根过氧化物酶(3g／L) 组,按注射部位不同又分为左侧脊髓(L3或L4)、左侧脊神经节(L3或L4)、左侧坐骨神经和左侧股神经4小组,每小组4只,注射量均为3μL。注射示踪剂后两三天麻醉状态下处死取材,钨酸钠法显色。观察各组动物左右侧脊神经节、脊髓组织切片阳性标记的细胞及纤维。结果:48只全部进入结果分析。无论注射哪种标记物,一侧神经、神经节注射辣根过氧化物酶仅在单侧前角有标记细胞,背外侧束、后角、中央管后灰质处有标记的纤维,个别对侧可见标记的纤维,偶见一两个标记细胞。脊髓一侧注射的除同侧有标记细胞外,对侧(脊髓、神经节)也有少量标记细胞。结论:一侧背根节细胞的中枢突可达到两侧后角,不能直接定论是否存在或不存在直接联系,还需要进行深入的电镜和神经递质研究。

生物素化葡聚糖胺法顺行追踪大鼠颈段脊髓小脑束神经元向小脑中央核的投射

目的:采用生物素化葡聚糖胺顺行追踪法观察大鼠颈髓投射纤维在小脑中央核中的分布情况。方法:实验于2005-03/09在首都医科大学解剖教研室完成。5只Wistar大鼠腹膜腔注射60g/L水合氯醛(5mL/kg)麻醉,打开各段脊髓相应部位的椎板,用注射针头刺破硬脊膜,暴露脊髓,通过连接在微量注射器上的微玻管(内径20～40μm)将溶于0.05mol/LTris-HCl缓冲液(pH7.6)的150g/L结合生物素的葡聚糖胺多点压力注射于一侧脊髓,每只大鼠注射至C3～6部位三四点,每点注射0.2～0.3μL,总量为0.6～1.2μL。其中2只大鼠在注射区尾侧加作脊髓外侧索横断。术后动物存活15～20d后,在60g/L水合氯醛深度麻醉下,经左心室插管至升主动脉进行灌注固定,制备连续切片,片厚50μm。其中小脑分别作矢状位和横切位切片,脊髓颈段作横切位切片。所有切片在光学显微镜下观察,观察结果用图像分析仪记录。标记终末依据Robertson的观察标准,即苔藓纤维的玫瑰花结样的结构特征。结果:①注射部位:生物素化葡聚糖胺注射部位均由深褐色密集区和棕色弥散区组成。注射部位的密集区基本限定于注射侧脊髓灰质后角基部、中间带和前角,覆盖了颈段脊髓小脑束的起始细胞。②标记终末在小脑横切片上的分布:主要分布于小脑内侧核头端背内侧、中段;在前间置核其主要分布于头端;而在后间置核的分布区集中在内侧;小脑外侧核未见标记纤维及终末。③标记终末在小脑矢状位上的分布:内侧核内侧部,中间部;少量分布于前间置核头端腹侧部;后间置核的分布区集中于尾端;外侧核未见标记终末。结论:大鼠脊髓颈段有向小脑中央核的投射,与腰髓的投射相比较,存在一定的定位关系。

应用生物素葡聚糖胺顺行示踪技术探索左右侧脊神经节间纤维的联系

目的:对大鼠左、右侧脊神经节间纤维的联系进行探求,以寻找两侧脊神经节(背根节)的神经元交互支配这一电生理学现象的形态学基础。方法:①实验于2005-01／05在首都医科大学解剖学实验室完成,选用 7-8周龄健康Wistar大鼠14只,动物编号RBL1-14。将大鼠按编号分为3组:左侧坐骨神经或股神经注射组(动物编号RBL1-4,n=4)、左侧脊神经节注射组(动物编号RBL5-10,n=6)、脊髓左侧注射组(动物编号 RBL11-14,n=4)。②麻醉大鼠,手术寻找到注射部位,在左侧坐骨神经或股神经注射组大鼠左侧坐骨神经或股神经、左侧脊神经节注射组在左侧脊神经节(第3或第4腰节)、脊髓左侧注射组在腰髓(第3或第4 腰椎)左后外侧沟注射100g/L的神经束路顺行示踪剂生物素葡聚糖胺1．0-2．0μL。③左侧坐骨神经或股神经注射组的实验动物(RBL1-4) 存活9-10 d;左侧脊神经节注射组分别存活9-10 d(RBL5-8)和15 d (RBL9-10);脊髓左侧注射组RBL11-14存活6 d。④存活期满后,麻醉大鼠,借助灌注泵经升主动脉灌杀动物,取出脊髓腰骶膨大部(第13 胸髓至第6腰髓)及双侧3对神经节(注射节及其上下各1节),进行固定。脊髓为横切、神经节按长轴方向作连续水平冰冻切片。采用图像分析仪光镜下观察并照像。结果:大鼠14只均进入结果分析。①一侧脊神经、脊神经节注射生物素葡聚糖胺的动物,其脊髓相应节段的双侧背角、灰质后连合及腹角均可见生物素葡聚糖胺标记的阳性反应,但注射侧染色明显强于非注射侧; 脊神经节生物素葡聚糖胺标记阳性反应(除存活15 d动物外),一般仅见于注射侧;存活15天的动物,神经节生物素葡聚糖胺标记阳性反应则两侧相似。②在脊髓一侧注射生物素葡聚糖胺的动物,其两侧神经节也均有生物素葡聚糖胺标记阳性反应,但注射侧更为显著。结论:一侧背根节细胞的中枢突可达到两侧后角,是否能直接到达对侧脊神经节尚有待进一步实验观察。

高校实验课教学理念浅析

为培养学生科研的基本素质,提高实验教学的质量,加强学生对实验课设计和动手能力的锻炼,教学实验课的准备及设备试剂的采购,都凸显问题的重要性。传统观念是理论课比实验课重要,但就目前人才培养中更突出的是实践工作能力和创新能力。所以高校在教学工作中应更需要加强学生实验课的教学工作,培养学生科研思路的创新及动手能力,以适应21世纪人才战略需要。

鱼油制剂中DHA对小鼠海马NOS阳性神经细胞表达的影响

目的 观察鱼油制剂中DHA(DecosahehexaenoicAcid)对小鼠海马一氧化氮合酶阳性神经元表达的概况。方法 实验动物分为三组 :剂量组、对照组和空白对照组。应用NADPH d组化法显示小鼠海马CA1、CA3 区和齿状回NOS(NitricOxideSynthase)阳性神经元及其数量、突起及透光率。结果 剂量组的NOS阳性神经元数量及透光率匀大于对照组和空白组 ,剂量组胞体深染 ,透光率值低 ,对照组和空白组胞体数量少 ,透光率值高。结论 DHA对小鼠神经系统的生长发育可能具有促进作用。