注射用多西他赛胶束无菌检查方法验证

目的建立针对2种注射用多西他赛胶束的无菌检查方法。方法参照2015年版《中国药典》(四部)通则1105无菌检查法,取注射用多西他赛胶束15瓶,用500 mL 0.9%氯化钠溶液溶解,作为供试液,平均分配至3个滤筒过滤。同法制备6个滤筒。每个滤筒用pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗3次,每次100 mL,然后加入相应培养基,并分别接种<100 CFU/mL的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、生孢梭菌和黑曲霉,于适宜温度下观察培养。以等量无菌氯化钠溶液替代注射用多西他赛胶束供试液后采用相同的后续操作,作为对照组。采用薄膜过滤法,用pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜,每个滤筒冲洗3次,每次100 mL,检测各菌株生长情况。结果6种验证菌株均在48 h内生长良好,样品的抑菌活性被完全消除。结论注射用多西他赛胶束可用上述方法进行无菌检查。

2015年版《中国药典》微生物限度检查法洁净环境及计数培养基修订分析探讨

2015年版《中国药典》将于2015年7月起开始实施:该版药典对微生物限度检查法检查时的洁净环境、培养基及检查方法进行了修订。其中洁净环境要求由10000级背景下的100级单向流(2010年版)修订为受控背景下的不低于B级环境(2 015年版);计数培养基由营养琼脂/玫瑰红钠琼脂培养基(2010年版)修订为胰酪大豆琼脂培养基/沙氏葡萄糖琼脂培养基(2015年版)。该文旨在分析2015年版中国药典与2010年版中国药典在非无菌产品微生物限度检查时洁净环境与计数培养基的异同点,为更规范执行2015年版中国药典提供参考。

单克隆抗体类生物制品关键质量属性

分析单克隆抗体(mAb)类生物制品关键质量属性(CQAs)及影响其杂质检测结果准确性、可靠性的因素。依据mAb类药物的特点及目标产品质量概况(QTPP)分析其关键质量属性。质量属性可分为关键的和非关键的:质量属性是否作为CQAs主要通过评价其超出可接受范围时对产品安全性和有效性的影响程度。mAb类药物CQAs包括等电点、单体、大小变异体、电荷变异体、N-糖基化修饰、唾液酸含量、生物学活性等。研究mAb类生物制品CQAs、分析其杂质检测结果准确可靠的影响因素对产品治疗控制和临床用药安全具有重要的价值。

从SARS、MERS到COVID-19爆发谈高级别生物安全实验室及其应用

生物安全是国家安全的组成部分,而生物安全实验室是生物安全的重要部门。从SARS、MERS到COVID-19,每一次公共生物安全事件都强化了对生物安全危害的认识,也促进生物安全管理体系和防护措施的完善。高等级生物安全实验室是烈性传染性疾病预防控制、科学研究和诊断治疗的重要技术平台。在COVID-19全球流行背景下,体液样本中新冠病毒的快速检测是进行传染源控制、传播途径切断和易感者保护的决策基础。在缺乏特效治疗药物的背景下,开发针对新型冠状病毒的疫苗、治疗性抗体等生物治疗手段对疾病的预防及治疗具有重要的价值。分析高等级生物安全实验室的特点及其空调系统的冗余设计,并探讨COVID-19流行背景下的生物安全实验室应用与管理。

幽门螺杆菌的免疫学检测技术及其主要抗原表位

目的了解幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的免疫学检测技术和主要抗原表位及其应用,为临床诊断及生物技术药物开发提供参考。方法查阅相关文献并结合本课题组的研究,分析H.pylori的免疫学检测技术和主要抗原表位及其应用。结果基于抗原-抗体反应的免疫层析技术是H.pylori的主要体外检测技术。H.pylori特异性抗原是基于免疫反应H.pylori检测的关键,也是相关疫苗开发的关键。尿素酶(Ure)、细胞毒素相关蛋白A/L(CagA/L)、空泡毒素相关蛋白A(VacA)、中性粒细胞激活蛋白(NAP)是H.pylori致病性关键表面抗原和病理学基础。结论基于多种抗原(或抗体)的组合表位同时具备了高灵敏度和高特异性的优点,其在H.pylori诊断和疫苗及抗体等生物技术药物开发方面具有广阔的前景。

某院新型冠状病毒肺炎疫情期间制剂室的疫情防控策略与措施探究

目的:探究医院制剂室在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情期间的管理及防控措施,为医院制剂室面对突发公共卫生事件采取应急措施提供参考。方法:针对COVID-19传播途径及可能造成污染的来源,进一步细化工作区域;对各区域人员的进出、消毒进行分级管理;优化人员配置,强化COVID-19相关知识的培训,保证员工身心健康;并做好防疫物资和原、辅料及消毒剂的管理。结果:COVID-19疫情期间,医院制剂有序生产、消毒剂稳定供应,保证了临床安全用药的需求,极大地缓解了院内感染风险的压力。结论:医院制剂室在COVID-19疫情期间,依据自身情况采取积极应对措施,在疫情防控中发挥了重要作用,确保了防疫药品的制剂生产和供给。

高效液相色谱法测定产后康膏中盐酸益母草碱含量

目的建立测定院内制剂产后康膏中盐酸益母草碱含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Kromasil 100-S-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(22∶78,V/V),流速为1.2 m L/min,检测波长为280 nm,进样量为10μL,柱温为20℃。结果盐酸益母草碱质量浓度在0.0045~1.1250 mg/m L范围内与峰面积良好线性关系良好(R^(2)=0.9999);精密度、稳定性和重复性试验结果的RSD均小于1.50%;平均加样回收率为100.63%,RSD为3.99%(n=6)。结论该方法专属性强,准确度高,可用于测定产后康膏中盐酸益母草碱的含量,符合院内制剂快速检查要求。

细胞因子与嵌合抗原受体修饰T细胞免疫疗法不良反应的相关性及其靶向药物干预

嵌合抗原受体修饰T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T)免疫治疗是目前最有潜力的恶性肿瘤过继性免疫疗法,具有不需要抗原递呈细胞(antigen presenting cell,APC)、不受主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)限制的优点。CAR-T免疫疗法除直接识别并杀灭肿瘤细胞外,还可形成记忆T细胞并建立长效的抗肿瘤机制。CAR-T免疫疗法治疗白血病、多发性骨髓瘤等非实体肿瘤的效果已得到广泛证实,在治疗实体肿瘤中也有巨大潜力。但CAR-T免疫疗法治疗过程中也会产生多种不良反应,如细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS,也称细胞因子风暴)、神经系统毒性(neurotoxicity,NT)、脱靶效应等,其中CRS和NT的发生可能与治疗时细胞因子水平的异常变化有关。细胞因子水平剧烈升高是CRS的主要特征,细胞因子升高并非CAR-T疗法不良反应的根本原因,也并非不良反应的全部结果表现。CAR-T免疫疗法不良反应发生率高,甚至可能危及患者生命,而托珠单抗、阿那白滞素等细胞因子靶向药物可降低不良反应的发生率,改善患者的预后。本文对细胞因子与CAR-T免疫治疗并发CRS及NT的相关性以及细胞因子靶向药物的作用作一综述,以期为CAR-T免疫疗法的基础研究、质量控制及临床应用提供参考。

非酒精性脂肪肝的发病机制及药物治疗

非酒精性脂肪肝是多种病因导致的慢性疾病,发病率有上升趋势。脂肪肝发生发展与肝内脂肪合成排出动态平衡、激素、胰岛素抵抗等有关,目前还缺少有效治疗药物。综述非酒精性脂肪肝的发病机制、中西药物治疗进展,以期为该领域研究提供借鉴,脂肪肝治疗药物开发提供依据。

新一代测序技术进展及其在药品质量控制中应用和发展趋势

基因测序技术的发明和广泛应用促进了医学和生命科学的革命性发展。自以Sanger测序法和化学降解法为代表的第1代测序技术发明以来,基因测序技术已发展至第4代。第1代测序平台主要为Sanger测序法和化学降解法,测序长度长,准确性高,但成本高,通量低和耗时长;第2代测序平台主要有454/GS-FLX测序平台、SOLID测序平台、Solexa测序平台和HiSeq/MiSeq测序平台及HeliScope测序平台;以单分子测序技术为基础的第3代测序平台基于单分子水平的边合成、边测序而无需PCR扩增,主要包括HeliScope测序平台和SMRT测序平台;ONT纳米孔单分子测序技术是基于电信号而非光信号的测序技术,具有高通量、低成本、耗时短和数据分析相对简单的优点,通常归为第4代测序平台。测序技术在药品洁净环境控制和中药质量分析方面有着越来越广泛的应用。随着测序技术的进步和生物信息学的发展,测序技术在医学和生命科学中的应用将发挥更大的作用。

治疗性单克隆抗体类药物分析技术及其应用

治疗性单克隆抗体(单抗)类药物是高度均一的生物大分子,抗原表位、理化性质和生物活性等方面的均一性程度高,能够通过特异性地与靶标分子结合发挥治疗作用。单抗类药物治疗过程中不良反应发生率低、患者耐受性高。单抗类药物是生物药物领域的热点和焦点,已成为现代生物制药行业中占比最大、增长最快的细分领域。根据生产技术和工艺的不同,单抗类药物发展已经经历了4代。我国最近批准上市的信迪利单抗注射液、特瑞普利单抗注射液、注射用卡瑞利珠单抗和替雷利珠单抗注射液等均属于第3代人源化单克隆抗体药物。单抗类药物分子结构复杂,容易发生二聚体、多聚体、末端氨基酸突变等不均一性变化,严重影响临床用药的安全性和有效性。对单抗类药物的原液和成品进行有效的质量控制是确保该类产品安全性和有效性的重要措施。目前,单抗类产品质量控制与分析的主要方法包括高效液相色谱(HPLC)法、酶联免疫吸附测定(ELISA)法、毛细管区带电泳(CZE)法、毛细管等电聚焦电泳(cIEF)法、成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF)法和十二烷基硫酸钠-毛细管电泳(CE-SDS)法等。本文就单抗类药物质量控制分析方法及应用进行综述,为相关研究及产品质量控制提供参考。

微生物快速鉴定、分型技术在食药源性微生物检测中的应用

食品、药品微生物检测是保证食品、药品质量、维护人类健康的重要环节。传统的微生物检测、鉴定方法存在周期长、主观性强等缺点,并且对一些生长缓慢或者新型微生物难以进行有效检测。现代微生物快速鉴定分型技术的发展为食品、药品微生物检测提供了新的思路和方法。现代分子生物学技术和常规生化鉴定在微生物准确鉴定的属种水平上有所差异,要将不同鉴定、分型技术相结合应用。本文综述食药微生物鉴定、分型技术的传统方法和现代分子生物学方法进展及其在食品、药品微生物检测领域中的应用,为发展新型的微生物检测、分型方法提供借鉴和参考。

嵌合抗原受体修饰T细胞免疫疗法的现状、挑战及应用前景

以嵌合抗原受体修饰T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)技术为代表的免疫治疗,旨在利用机体免疫细胞的活性特异性地杀灭含有某种抗原表型的恶性肿瘤细胞。CAR-T免疫疗法已成为继外科手术、放射治疗和化疗后最有潜力的肿瘤治疗方法,是利用经基因工程修饰的、可表达嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)的T细胞进行过继性免疫治疗的技术。CAR-T能够以非限制性形式特异识别肿瘤细胞表面特异抗原并进行杀灭,且无需抗原递呈细胞(antigen presenting cell,APC)参与、不受主要组织相容复合体(major histocompatibility complex,MHC)的限制。CAR-T可通过释放穿孔素、颗粒霉素B等直接杀灭肿瘤细胞、募集体内免疫细胞杀灭肿瘤细胞、形成记忆T细胞获得特异性的长效抗肿瘤机制等发挥治疗作用。CAR-T免疫疗法在白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤治疗中效果显著,对实体肿瘤治疗潜力巨大。但CAR-T免疫疗法会产生脱靶效应和多种不良反应,诸如细胞因子风暴、神经系统毒性和基因修饰致成瘤风险等。国内尚无自体CAR-T或异体CAR-T产品的生产及质量控制相关规范。未来应在制定相关规范及质量标准的基础上,从寻找肿瘤特异性抗原、强化CAR-T产品的识别特异性、优化CAR-T的制备工艺和筛选流程、降低副反应等方面优化CAR-T细胞制剂的应用。本文就CAR-T免疫疗法的原理、在血液系统恶性肿瘤和实体肿瘤治疗中的应用及存在的挑战作一综述,为相关领域的研究和应用提供参考。