血清学阴性类风湿关节炎关节液中抗环瓜氨酸肽抗体、抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体的测定及临床意义

目的:检测血清学阴性类风湿关节炎(serum negative rheumatoid arthritis,SNRA)患者的关节液中抗环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide,CCP)抗体、抗突变型瓜氨酸波形蛋白(mutated citrullinated vimentin,MCV)抗体水平,了解关节液中这两种抗体对诊断SNRA的临床意义。方法:应用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测两组患者膝关节液中抗CCP抗体和抗MCV抗体,实验组为SNRA患者,共29例,对照组为骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者,共28例,并收集两组患者的临床表现及实验室指标。结果:实验组29例SNRA患者膝关节液中抗CCP抗体阳性者10例(34.5%),测定值为(114.5±62.6)U/m L;抗MCV抗体阳性者6例(20.7%),测定值为(32.0±11.3)U/m L;对照组28例OA患者膝关节液中3例抗CCP抗体阳性(10.7%),测定值为(20.6±0.1)U/m L,2例抗MCV抗体阳性(7.1%),测定值为(22.1±1.7)U/m L。SNRA组关节液抗CCP抗体的阳性率显著高于对照组(34.5%vs.10.7%,χ2=4.571,P<0.05);SNRA组关节液抗MCV抗体的阳性率高于对照组(20.7%vs.7.1%,χ2=2.167,P>0.05),但差异无统计学意义;抗CCP抗体在SNRA中的敏感性为34.5%,特异性为89.3%,阳性预测值为76.9%,阴性预测值为56.8%;抗MCV抗体敏感性为20.7%,特异性为92.9%,阳性预测值为75.0%,阴性预测值为53.1%;膝关节液中抗CCP抗体和抗MCV抗体两者联合检测的敏感性为48.0%,特异性为82.8%,SNRA关节液抗CCP抗体阳性组、抗MCV抗体阳性组与各自阴性组相比较,在年龄、病程和晨僵方面差异均无统计学意义,而膝关节液抗CCP抗体阳性组和抗MCV抗体阳性组红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)和28个关节的疾病活动评分(the disease activity score in 28 joints,DAS28)均比各自阴性组高(P均<0.01)。抗CCP抗体与ESR和CRP之间呈正相关(r=0.567,P<0.01;r=0.664,P<0.01);抗MCV抗体与ESR和CRP之间呈正相关(r=0.344,P<0.01;r=0.749,P<0.01)。结论:SNRA关节液抗CCP抗体和抗MCV抗体联合检测有助于SNRA诊断和疾病活动的判断。

甲氨蝶呤联合环磷酰胺对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡作用的研究

目的通过对类风湿关节炎(RA)动物模型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的实验研究,从滑膜细胞凋亡的角度,探讨甲氨蝶呤(MTX)联合环磷酰胺(CTX)的协同作用和机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导性雌性Wistar大鼠CIA模型,将造模成功的60只大鼠随机分成4组:CIA模型对照组、小剂量MTX治疗组(MTX0.9mg/kg,每周1次)、小剂量CTX治疗组(24mg/kg,每3周1次)及小剂量MTX联合小剂量CTX治疗组(0.9mg/kg,每周1次,CTX24mg/kg,每3周1次);再选8只为正常对照组。治疗24周后全部动物处死取材,再经固定、脱钙、包埋,通过TUNEL法检测滑膜细胞凋亡。结果各治疗组滑膜细胞凋亡均较CIA模型组增加,联合治疗组凋亡程度最高,各组间平均灰度值差异有统计学意义(P<0.05)。结论提示MTX和CTX联合治疗RA为协同作用。

甲氨蝶呤、环磷酰胺对胶原诱导性关节炎大鼠血清TNF-α、IL-1的影响

目的研究甲氨蝶呤(MTX)联合环磷酰胺(CTX)治疗对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)大鼠血清TNF-α、IL-1水平的影响,探讨甲氨蝶呤(M TX)联合环磷酰胺(CTX)治疗类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)的机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导的雌性Wistar大鼠CIA模型。取15只未造模的健康大鼠作为健康对照组(A组)。将造模成功的75只大鼠随机分成5组(每组15只),B组:造模对照组;C组:小剂量MTX组(每周0.9 mg/kg);D组:大剂量MTX组(每周2.7 mg/kg);E组:小剂量CTX组(每3周24 mg/kg);F组:小剂量M TX联合小剂量CTX组(M TX每周0.9 mg/kg,CTX每3周24 mg/kg)。分别在6周、24周检测各组大鼠血清中TNF-α、IL-1的水平。结果联合应用MTX和CTX优于小剂量MTX、小剂量CTX单药治疗组。结论 MTX和CTX联合应用在RA的治疗中具有协同效应。

甲氨蝶呤联合环磷酰胺对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞p53表达的研究

目的通过对类风湿关节炎（RA）动物模型胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的实验研究，从滑膜细胞p53表达的角度，探讨甲氨蝶呤（MTX）联合环磷酰胺（CTX）治疗RA协同作用和机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导的雌性Wistar大鼠CIA模型，将造模成功的75只大鼠随机分成5组：CIA模型对照组、小剂量MTX治疗组（每周0．9mg／kg）、大剂量MTX治疗组（每周2．7mg／kg）、小剂量CTX治疗组（每3周24mg／kg）及小剂量MTX联合小剂量CTX组（MTX每周0．9mg／kg＋CTX每3周24mg／kg）。选8只大鼠为健康对照组，共6组。治疗24周后处死全部动物并取材，经固定、脱钙、包埋，通过免疫组织化学法检测滑膜细胞突变型p53的表达。结果突变型p53在CIA组表达上调（P〈0．05），联合治疗组下调突变型p53优于小剂量MTX、小剂量CTX组（P〈0．05），与大剂量MTX组相当（P〈0．05）。结论联合治疗组在下调突变型p53表达的作用均优于小剂量MTX、小剂量CTX单用药治疗组，提示MTX和CTX联合治疗为协同作用。

周期联合甲氨蝶呤和环磷酰胺对大鼠胶原诱导性关节炎滑膜细胞周期蛋白D1表达的研究

目的通过研究大鼠胶原诱导性关节炎（CIA）滑膜组织细胞周期蛋白D1（cvclin D1）的表达以及甲氨蝶呤（MTX）和环磷酰胺（CTX）对其的影响，从周期调控的角度探讨两者联合治疗类风湿关节炎（RA）可能的协同效应机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导的雌性Wistar大鼠CIA模型，随机分为正常对照组、CIA模型对照组、小剂量MTX治疗组（每周0．9mg／kg）、大剂量MTX治疗组（每周2．7mg／kg）、小剂量CTX间歇治疗组（每3周24mg／kg）、联合治疗组（MTX每周0．9mg／kg＋CTX每3周24mg／kg）。治疗24周后全部动物处死取材，再经固定、脱钙、包埋，原位杂交法检测滑膜细胞周期蛋白cyclin D1 mRNA。结果CIA模型组大鼠关节滑膜组织的cyclin D1 mRNA的阳性染色强度明显高于正常对照组（P〈0．05），各治疗组滑膜cyclin D1 mRNA下调，联合治疗组cvclin D1 mRNA表达最低，各组间平均灰度值差异有统计学意义（P〈0．05）。MTX与CTX存在药物交互作用（P〈0．05），联合治疗组优于单用药治疗组。结论提示MTX和CTX联合治疗为协同效应，可能的重要机制是使滑膜cvclin D1 mRNA下调，从而抑制了滑膜细胞异常增殖。

甲氨蝶呤联合环磷酰胺对胶原诱导性关节炎大鼠炎症的研究

甲氨蝶呤（MTX）与环磷酰胺（CTX）小剂量按周期间歇给药治疗类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA），取得了显著疗效，明显降低了不良反应。肿瘤坏死因子（TNF）-α在RA的滑膜炎及软骨和骨的破坏中起着主导作用。本研究从MTX和CTX对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠炎症的治疗作用，并检测TNF—α的水平，探讨二者联合的协同效应及机制。

依那西普治疗脓疱型银屑病关节炎一例

患者男，20岁。主因多关节肿痛5个月，皮疹1个月伴发热1周于2007年4月人院。2006年11月出现腰骶部疼痛，活动后减轻，左膝、踝关节肿痛，实验室检查人类白细胞抗原（HLA）-B27阳性，骶髂关节CT示“双侧骶髂关节炎Ⅱ级“，诊断强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS），给予口服“塞来昔布0．2g，每日2次，来氟米特10mg／d”，静脉滴注“环磷酰胺（CTX）400mg，每3周1次”，症状改善，自行减药，未随访。