胰岛素抵抗大鼠及恢复状态下PGC-1α和Mfn2表达的变化

目的观察胰岛素抵抗(IR)及改善后骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)和线粒体融合蛋白2(Mfn2)的表达变化及线粒体形态和参数的变化。方法成年Wistar大鼠随机分为对照组(NC)、高脂组(HF)和高脂罗格列酮干预组(HF+RSG)。喂养4周及8周时,清醒状态下用正常葡萄糖高胰岛素钳夹技术评价IR;第8周时,实时定量PCR和Western blot检测骨骼肌PGC-1α和Mfn2的表达;透射电镜观察骨骼肌线粒体的形态;Im-age-Pro Plus 6分析线粒体的各项参数。结果高脂喂养4周后HF组与HF+RSG组IR状态形成。继续喂养4周后,HF+RSG组由于服用罗格列酮IR状态改善明显。与NC组相比,HF组的PGC-1α和Mfn2均显著下降(P<0.05);与HF组相比,HF+RSG组上述两基因的表达均显著升高(P<0.05);而与NC组相比,HF+RSG组PGC-1α的表达没有明显差异,而Mfn2的表达仍较低。与其余两组相比,HF组线粒体的形态和各项参数也发生了明显的改变(P<0.05)。结论胰岛素抵抗状态的形成与PGC-1α和Mfn2的表达下降有关,也与线粒体的改变有关。

肌动蛋白结合蛋白

肌动蛋白结合蛋白是一类调节肌动蛋白聚合、成束或交联的蛋白质,迄今已经发现160多种。通过与肌动蛋白相互作用,直接或间接参与肌动蛋白纤丝的聚合及解聚、纤丝成束与交联,从而介导细胞形态的维持、细胞运动等众多生物学功能。

糖尿病患者基因组Mfn2启动子区PGC-1α及ERRα顺式作用元件的多态性分析

目的筛查2型糖尿病(T2DM)患者基因组线粒体融合蛋白2(Mfn2)启动子区过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子1α(PGC-1α)及雌激素相关受体(ERRα)顺式作用元件的多态性。方法采用PCR-SSCP技术结合DNA测序技术。结果Mfn2启动子区PGC-1α及ERRα顺式作用元件处未发现多态性位点。结论T2DM患者PGC-1α调控的Mfn2表达下降,可能通过某些生理机制,而非遗传机制。

生精细胞的凋亡研究进展

凋亡(apoptosis)是由澳大利亚病理学家Johnkerr于1972年提出的,指细胞由基因控制的主动死亡过程。形态上表现为核固缩、染色质浓集、细胞膜皱折、胞体变小,细胞成断片后,最后成为被膜包绕的凋亡小体而被邻近的细胞吞噬与降解。组织学表现为单个细胞缺失,周围没有炎症反应。生物化学表现为活化Ca^(2+)依赖的核酸内切酶,在核小体连接处将染色质DNA降解成单或寡核苷酸小体,其大小均为长度180～200bp的倍数。凋亡可以是一种生理现象,也可以是病理现象。它与因缺血、缺氧而引起的病理性细胞坏死明显不同,后者细胞器和细胞膜出现肿胀、溶解、破裂,细胞内含物释放到细胞间隙可引起炎症反应。

一氧化氮及其合酶

对生物体内ＮＯ的研究，已成为当今医学界最为活跃的研究领域。目前已知有三类ＮＯ合酶，分别由内皮细胞、神经细胞及巨噬细胞产生。但新的研究结果显示这三种酶并非仅仅局限于这些部位。在其它部位亦可存在。如骨骼肌中的神经性ＮＯ合酶，它产生的ＮＯ以两种不同方式分别调节骨骼肌的收缩和舒张。

线粒体融合蛋白2与胰岛素抵抗

线粒体融合蛋白具有促进线粒体融合、抑制细胞增殖、保护细胞免于凋亡等多种功能。目前,越来越多的证据表明该基因产物与胰岛素抵抗状态有关。

Mfn2启动子区基因多态性与2型糖尿病的相关性分析

筛选Mfn2的启动子区PGC-1α和ERRα的顺式作用元件附近的多态性位点,评价其与糖尿病的相关性。在Mfn2启动子附近,发现3个多态性位点,分别是-166A/G、-45A/G和+110T/C多态性位点。这三个多态性位点,具有一定程度的连锁性,基本规律是AAT/GGC,其中前两个多态性位点在所考察的212个个体中,全部连锁(100%),而第三个位点的连锁率为88.8%。经过χ2检验这三个多态性位点在2型糖尿病人群和健康对照人群的基因型频率和等位基因频率都没有显著性差异。

沙棘共生固氮根瘤及其内生弗兰克氏菌

用透射电镜研究了中国沙棘（ＨｉｐｐｏｐｈａｅｒｈａｍｎｏｉｄｅｓＬ．）根瘤的超微结构。它的侵染细胞位于皮层中部，非侵染细胞与之相间排列，富含多酚和淀粉粒。在根瘤的发育过程中，具有以下特征：（１）早期侵染细胞中具有核仁联合体；（２）由内生菌丝趋核生长而形成的核膜内陷处，有许多核孔出现；（３）在中期侵染细胞的内生菌丝和泡囊的荚膜附近，有成束的微管存在；（４）在４、５月瘤样的维管束细胞、非侵染细胞及早期侵染细胞中，有大量脂体存在。

银杏叶提取物对高脂饮食大鼠胰岛素敏感性的影响

目的观察银杏叶提取物对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的影响。方法采用高脂喂养的方法建立胰岛素抵抗大鼠动物模型,舒血宁腹腔注射进行干预,以罗格列酮作为阳性对照。干预前后分别行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验测定葡萄糖输注率(GIR),并测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)等指标。结果高脂喂养成功复制了胰岛素抵抗大鼠模型,第4周即出现GIR下降,与正常对照组相比,差异显著(P<0.05);随时间延长,GIR降低更加明显;TC、TG、FFA、FBG、FINS不同程度升高(P<0.05或P<0.01);银杏叶提取物干预使上述指标明显改善(P<0.05或P<0.01),与罗格列酮干预作用相近。结论银杏叶提取物可以显著改善高脂诱导的大鼠胰岛素抵抗状态,其作用可能与调节血脂及游离脂肪酸代谢有关。

高精度并联6-DOF测量机构的正解研究

并联六自由度平台可达到微米级的测量效果,针对此类Stewart平台传统位置正解计算时间长、精度低等问题,提出一种区间分析和遗传算法相结合的求解方法,弥补了迭代过程中难以获取初始解以及迭代结果易发散的问题。对比相同实例的区间分析—遗传算法与牛顿迭代法计算结果,数据表明:区间分析与遗传算法的结合缩短了正解运算时间,平台整体响应速度提高约40%,使平台能达到7μm的重复定位精度,能更好地满足实际使用要求。

银杏叶提取物对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌蛋白激酶B表达的影响

目的观察银杏叶提取物(EGB)对胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌蛋白激酶B(PKB)表达的影响,探讨EGB改善胰岛素敏感性的分子机制。方法采用高脂喂养的方法建立IR大鼠模型,并给予为期4周的不同剂量EGB腹腔注射干预,以罗格列酮作为阳性对照。本研究共涉及6个组,分别是正常对照组(NC组,基础饲料喂养,腹腔注射0.9%氯化钠注射液8 mg·kg-1·d-1)、模型对照组(MC组,IR大鼠,腹腔注射0.9%氯化钠注射液8 mg·kg-1·d-1)、银杏叶1组(EGB1组,IR大鼠,腹腔注射舒血宁注射液4 mg·kg-1·d-1)、银杏叶2组(EGB2组,IR大鼠,腹腔注射舒血宁注射液8 mg·kg-1·d-1)、银杏叶3组(EGB3组,IR大鼠,腹腔注射舒血宁注射液12 mg·kg-1·d-1)、罗格列酮组(RSG组,IR大鼠,马来酸罗格列酮0.9%氯化钠注射液混悬液3 mg·kg-1·d-1灌胃)。干预后测定各组大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)等指标的水平,用高胰岛素-正常葡萄糖钳夹实验测定葡萄糖输注率(GIR)。用Western Blot法测定大鼠骨骼肌PKB水平,实时荧光定量RT-PCR测定大鼠骨骼肌PKB mRNA表达。结果(1)实验第8周末,6组大鼠体质量间差异无统计学意义(P>0.05)。MC组大鼠血清TC、TG、FBG、FINS水平及GIR与NC组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。经药物干预,RSG组、EGB2组和EGB3组大鼠血清TC、TG、FBG、FINS水平及GIR与MC组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)与NC组比较,MC组大鼠骨骼肌PKB表达量呈下降趋势,但差异无统计学意义(P=0.063)。EGB2组、EGB3组大鼠骨骼肌PKB水平与MC组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。MC组大鼠骨骼肌PKB mRNA表达量与NC组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。RSG组、EGB2、EGB3组大鼠骨骼肌PKB mRNA表达量与MC组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论EGB能够改善高脂饮食诱导的IR状态,其胰岛素增敏机制可能与其增加骨骼肌PKB的表达有关。

自体成肌细胞修复周围神经缺损

目的:观察自体成肌细胞在神经再生室中的作用,探讨其作为组织工程的种子细胞修复周围神经缺损的可行性。方法:实验于2002-08/2003-08在北京军事医学科学院基础医学研究所九室完成。①成年Wistar大鼠30只,采用随机数字法分成成肌细胞组、细胞外基质凝胶组和生理盐水组,每组10只。②切除大鼠右坐骨神经6mm,断端分别套入硅胶管,使神经两断端在硅胶管内相距13mm。③成肌细胞组:快速分离骨骼肌成肌细胞,差速贴壁法纯化、增殖,按1×109L-1细胞浓度与细胞外基质凝胶混合,植入神经再生室内;细胞外基质凝胶组:神经再生室内植入细胞外基质凝胶;生理盐水组:神经再生室内植入生理盐水。④术后4,8,12周进行大鼠坐骨神经功能指数测定;术后12周进行大体观察、电生理检测、腓肠肌湿重、神经组织学及超微结构观察。结果:30只大鼠全部进入结果分析。①结蛋白免疫组织化学:阳性细胞平均达98.01%。②大体观察:术后12周,成肌细胞组和细胞外基质凝胶组均可见再生神经,外形似正常神经,直径较正常的神经干细,成肌细胞组略粗于细胞外基质凝胶组。生理盐水组导管内无再生神经通过间隙。③坐骨神经功能指数:术后8,12周,成肌细胞组显著高于细胞外基质凝胶组(8周:-71.788±3.569,-76.986±2.266;12周:-61.847±2.914,-69.527±1.765;P均<0.01)。④电生理检查:术后12周,成肌细胞组的运动神经传导速度及波幅明显高于细胞外基质凝胶组,成肌细胞组、细胞外基质凝胶组腓肠肌肌电图呈部分失神经电位表现,生理盐水组则为完全失神经电位。⑤腓肠肌湿重恢复率:成肌细胞组明显好于细胞外基质凝胶组和生理盐水组。⑥组织学检查:术后12周,成肌细胞组、细胞外基质凝胶组的再生神经纤维排列整齐、密集,神经导管交界处无瘢痕,成肌细胞组的再生神经纤维多且直径较粗大,排列更为规则。⑦透射电镜观察:成肌细胞组和细胞外基质凝胶组均见再生的有髓神经纤维。⑧再生神经纤维图像分析:术后12周,在有髓神经纤维密度、神经纤维有效面积、有髓神经纤维数量、直径及髓鞘厚度等指标上成肌细胞组均优于细胞外基质凝胶组。结论:自体成肌细胞能够促进周围神经再生,可以作为种子细胞应用于外周神经组织工程。

罗格列酮对老年胰岛素抵抗大鼠肝脏脂肪酸代谢及胰岛素敏感性的影响

目的研究罗格列酮对老年胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠肝脏脂肪酸代谢及胰岛素敏感性的影响。方法22～24月龄雄性Wistar大鼠随机分为老年对照组(OC组)和高脂喂养组。OC组喂饲基础饲料,高脂喂养组喂饲高脂饲料。喂养至第4周末行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验评价高脂喂养组IR状态。判断造模成功后将高脂喂养组随机分为高脂(HF)组和罗格列酮干预(RSG)组。两组除继续喂以高脂饲料外,RSG组予罗格列酮3mg·kg-1.d-1灌胃,HF组予等体积生理盐水灌胃,继续喂养4w。实验第8周末,再次行钳夹实验评价各组大鼠胰岛素敏感性;肝脏甘油三酯经氯仿/甲醇抽提后用全自动生化分析仪测定。结果分组喂养4时,钳夹实验发现高脂喂养组葡萄糖输注率(glucose infusion rates,GIR)低于OC组(P<0.05),说明高脂喂养组IR模型诱导成功。继续喂养4w后,HF组GIR进一步下降(P<0.01),而RSG组GIR与HF组比较明显提高(P<0.05)。与OC组相比,HF组空腹血糖(FBG)、胰岛素(FINS)、游离脂肪酸(FFA)、血清甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)水平升高,而RSG组这些指标较HF组下降(P<0.01或P<0.05)。肝脏TG含量在HF组高于OC组,RSG组低于HF组;肝脏TG含量与GIR呈负相关,与空腹血糖呈正相关。结论高脂饮食导致老年大鼠肝脏脂质积聚及IR;罗格列酮干预可改善老年IR大鼠血浆脂代谢异常,降低肝脏脂质含量,提高胰岛素敏感性。

细胞中蛋白质的合成和转运(一)

细胞的一切功能活动，都离不开蛋白质的参与，细胞中蛋白质的合成场所有两处：基质中和ＲＥＲ 上的多聚核糖体上。特定蛋白有特定的合成场所和转运方式，本文简要介绍了分泌蛋白、膜嵌入蛋白、溶酶体蛋白、亲核蛋白、过氧物酶体蛋白、叶绿体蛋白。

建立新的根瘤菌──非豆科植物共生体系的研究

建立新的根瘤菌──非豆科植物共生体系的研究四川师范大学细胞生物学研究室成都６１００６６曲东明，韩善华在自然界中，根瘤菌一般只能与豆科植物形成极其精细复杂而又高度专一化的共生结构——根瘤。根瘤是根瘤菌与寄主植物之间对抗和协调的统一，是根瘤菌侵染寄主植物...