CARD6在脓毒症心肌损伤中的机制研究

目的:探讨CARD6在脓毒症心肌损伤中的调节机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为对照组与模型组。采用LPS腹腔注射法构建脓毒症心肌损伤小鼠模型,RT-qPCR检测小鼠心肌组织中CARD6、caspase-1的mRNA水平。体外实验则采用LPS刺激转染CARD6过表达质粒的H9C2细胞,检测caspase-1、细胞活力、CK-MB水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠心肌组织中LDH、CK-MB含量,caspase-1表达水平上升,提示脓毒症导致小鼠心肌损伤,而CARD6表达水平明显降低。体外实验发现CARD6表达水平呈下降趋势,转染含有CARD6的过表达质粒后细胞释放CK-MB的水平降低、细胞活力增加、caspase-1水平降低。结论:CARD6可改善脓毒症所致心肌损伤,其机制可能与caspase-1介导的细胞焦亡相关。

PTEN诱导激酶1在高血压小鼠主动脉硬化中的机制研究

目的 探讨PTEN诱导激酶1(PINK1)在高血压模型小鼠主动脉硬化中的作用及其对血管重塑的机制。方法取8~10周龄C57BL/6J雄性小鼠12只,随机分为阴性对照组和高血压造模组,每组6只,于皮下埋植微渗透泵缓慢释放血管紧张素(Ang)Ⅱ以诱导高血压小鼠模型。取8~10周龄野生型C57BL/6J雄性小鼠24只,随机分为空白对照组、假手术组、高血压模型组、PINK1处理组4组,每组6只。空白对照组,假手术组小鼠予0.9%氯化钠溶液(灌泵)+pLenti-NC(腹腔内注射),高血压模型组小鼠予AngⅡ(灌泵)+pLenti-NC (腹腔内注射),PINK1处理组小鼠予AngⅡ(灌泵)+pLenti-PINK1(腹腔内注射)。利用BP98A鼠尾套管无创血压仪监测血压变化,采用“点对点”法监测主动脉脉搏波传导速度(PWV),测定血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平,H-E染色观察主动脉组织结构,Western印迹法分析PINK1、CollagenⅠ、LC3B-Ⅱ、p62蛋白质相对表达量,免疫荧光染色观察CollagenⅠ表达。结果 构建小鼠模型的收缩压监测结果显示:灌注后第1~8天和第10、12、14天,高血压造模组小鼠的收缩压均显著高于阴性对照组(P值均<0.01);灌注第14天,阴性对照组小鼠PWV显著短于高血压造模组(P<0.05);Western印迹法检测结果显示,阴性对照组PINK1相对表达量显著高于高血压造模组(P<0.05);阴性对照组的CollagenⅠ相对表达量显著低于高血压造模组(P<0.01)。PINK1回补实验结果显示:灌注后第3~8天和灌注后第10、12、14天,PINK1处理组小鼠收缩压显著低于高血压模型组(P值均<0.01);PINK1处理组小鼠的PWV显著短于高血压模型组小鼠(P<0.01)。高血压模型组小鼠血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平均显著高于假手术组(P值均<0.001),PINK1处理组IL-1β、IL-6和TNF-α水平均显著低于高血压模型组(P值均<0.01)。Western印迹法检测结果显示,与假手术组及空白对照组比较,高血压模型组中PINK1、LC3B-Ⅱ蛋白质相对表达量均显著降低(P值均<0.01),CollagenⅠ、p62蛋白质相对表达量均显著增高(P值均<0.01);PINK1处理组PINK1、LC3B-Ⅱ蛋白质相对表达量均显著高于高血压模型组(P值均<0.01),CollagenⅠ、p62蛋白质相对表达量均显著低于高血压模型组(P值均<0.01)。CollagenⅠ免疫荧光染色显示,CollagenⅠ呈束状,联结成网。与空白对照组相比,高血压模型组大鼠心肌中CollagenⅠ表达量均增高,经PINK1回补后CollagenⅠ表达量降低。结论 PINK1过表达后,可以减轻高血压模型小鼠中血管炎症,促进细胞自噬,抑制血管纤维化,为高血压引起的血管硬化防治提供了新的思路和方向。

不同穿刺技术在危重患者中心静脉置管中的效果比较

目的评价不同穿刺技术在危重患者中心静脉置管中的临床应用效果。方法选取2017年1月至2020年3月西藏日喀则市人民医院收治的384例危重症患者作为研究对象,按照随机数字表法分为三组,每组128例。传统穿刺技术组采取解剖标志法;普通超声组采取普通超声引导下的中心静脉穿刺技术;超声穿刺增强组采取超声穿刺增强技术引导下的中心静脉穿刺技术。记录并比较三种方法在穿刺成功率、穿刺时间、首次穿刺成功率、穿刺次数,以及在动脉穿刺、气胸、感染、静脉后壁损伤等并发症方面的优缺点。结果超声穿刺增强组的平均穿刺用时及平均穿刺次数均显著少于传统穿刺组和普通超声组,且普通超声组又少于传统穿刺组(P<0.05);传统穿刺组的穿刺成功率及首次穿刺成功率均显著低于普通超声组和超声穿刺增强组,而动脉损伤等并发症的发生率显著高于普通超声组和超声穿刺增强组(P<0.05);超声穿刺增强组的穿刺成功率及首次穿刺成功率显著高于普通超声组,而静脉后壁损伤发生率明显低于普通超声组(P<0.05)。结论于超声引导下的中心静脉穿刺技术显著优于传统的中心静脉穿刺技术,而超声穿刺增强技术引导下的中心静脉穿刺技术又优于前两者,值得临床推广应用。