比较在肉汤及人工痰液培养基中多黏菌素E对鲍曼不动杆菌的杀菌效果

目的探究阳离子调节MH肉汤和人工痰液培养基中,多黏菌素E对碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌的杀菌效果。方法选取碳青霉烯类抗生素耐药的鲍曼不动杆菌菌株,通过静态杀菌曲线考察在阳离子调节MH肉汤、人工痰液培养基中多黏菌素E对鲍曼不动杆菌的杀菌效果,并建立模型预测细菌生长及多黏菌素E在不同浓度下的杀菌作用。结果人工痰液培养基中1×MIC的多黏菌素E对鲍曼不动杆菌的杀菌效果与阳离子调节MH肉汤相当,相较于0 h,24 h的菌落数对数值不变或下降1 lgCFU/mL。体外药动学/药效学模型显示,相较于阳离子调节MH肉汤,在人工痰液培养基中鲍曼不动杆菌(AB170428和AB070311)存在生长滞后及药物作用滞后现象,生长速率常数更高(0.733 h^(-1)对0.957 h^(-1);0.534 h^(-1)对0.951 h^(-1))。2×MIC的多黏菌素E可以达到24 h持续抑制细菌生长的作用,但人工痰液培养基中的杀菌效果弱于阳离子调节MH肉汤。结论相较于阳离子调节MH肉汤,人工痰液培养基中鲍曼不动杆菌前期生长速率较缓慢,培养基的不同使多黏菌素E对鲍曼不动杆菌杀菌作用的强弱不同。

多黏菌素类药物诱导神经毒性的机制研究进展

20世纪70年代,多黏菌素类药物因其严重的肾毒性和神经毒性,逐渐在临床上少用或不用,截止2016年国内尚无全身使用的该类药物。革兰阴性耐药菌检出率的剧增导致重症感染患者面临无药可用的局面,而多黏菌素类药物对上述耐药菌具有良好的抗菌活性,因此被重新用于临床[1]。

细胞凋亡在药物诱导的急性肾小管坏死中的作用

急性肾损伤(AKI)是由各种原因引起的短时间内肾功能快速减退所导致的临床综合征,主要表现为肾小球滤过率下降,伴有氮质产物如肌酐、尿素氮等的升高。AKI在住院患者中发生率约为20%[1],药物所诱导的AKI占其中的20%~40%,在老年患者中甚至可达60%[2],且主要的临床表现为急性肾小管坏死(ATN),即肾小管上皮细胞损伤的一种AKI。常引起ATN的药物包括顺铂、氨基糖苷类、万古霉素、多黏菌素类等。

液相色谱串联质谱测定大鼠血浆中多黏菌素E甲磺酸钠及多黏菌素E方法的建立及应用

目的建立液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆中多黏菌素E甲磺酸钠(CMS)及其活性成分多黏菌素E并进行应用。方法通过多黏菌素E主成分E1及E2浓度之和间接得到多黏菌素E的浓度。在大鼠血浆样品中加入硫酸对CMS进行水解,通过测定水解后与水解前血浆样品中多黏菌素E的浓度差间接测定CMS浓度。采用固相萃取法对样品进行预处理。色谱柱选择Phonomenex Kinetex XB-C18柱,质谱采用电喷雾电离源(ESI源)及多反应监测(multi-reaction monitoring,MRM)模式。其中待测物质多黏菌素E1、多黏菌素E2、内标多黏菌素B1的离子通道分别为m/z390.7→101.3、m/z 386.0→101.2、m/z 402.3→101.2。结果多黏菌素E1及E2的测定不受大鼠血浆中内源物质的影响,且分别在0.187~6.24 mg/L、0.0370~1.23 mg/L内线性良好,批内与批间精密度良好,变异系数均<15%。多黏菌素E1、E2准确度范围分别为100.1%~113.3%和94.9%~107.3%。多黏菌素E1、E2的提取回收率分别为21.8%、22.0%。CMS血浆样品室温下放置100 min稳定,多黏菌素E血浆样品室温下放置120 min稳定,以上样品均可在-20℃放置7 d,-70℃放置28 d,预处理后样品在自动进样器中放置24 h,在-20℃及-70℃下反复冻融3次后均稳定。对CMS样品进行1∶10(v/v)的稀释不影响该方法的检测。该方法对于CMS的水解稳定性良好,批内及批间平均水解率分别为73.9%、71.9%。结论该研究建立了一种灵敏、准确、采样量小的LC-MS/MS方法,通过测定水解后的多黏菌素E1及E2,间接测定大鼠血浆中CMS及其多黏菌素E的浓度。在降低采样量的同时也提高了检测灵敏度,该方法适用于大鼠CMS的PK研究。

液相色谱串联质谱法测定人血浆中多黏菌素B及在治疗药物监测中的应用

目的建立简单快速的人血浆中多黏菌素B浓度测定的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法用于治疗药物监测。方法采用AB SCIEX HPLC-API4500QTRAP进行测定,色谱柱为PhonomenexKinetex XB-C18柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm),以0.2%甲酸-乙腈∶0.2%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,分析时间为3.5 min。多黏菌素B1、B2和内标多黏菌素E2的离子对分别为m/z 602.6→m/z 241.1、m/z 595.5→m/z 227.1和m/z 578.5→m/z 101.2。血样采用蛋白沉淀处理后进样。结果多黏菌素B1在0.05~10 mg/L浓度范围内线性良好(R~2>0.98),批内、批间精密度均≤14.0%,准确度在100.9%~110.8%范围内,健康者及患者的血浆、溶血、脂血及患者血清样品内标归一化基质效应因子分别为92.6%~103.0%、102.4%~112.6%、99.9%~104.7%及97.1%~106.3%,回收率为79.1%~80.6%;多黏菌素B2在0.00550~1.10 mg/L浓度范围内线性关系良好,批内、批间精密度均≤14.8%,准确度在97.6%~100.7%范围内,健康者及患者的血浆、溶血、脂血及患者血清样品内标归一化基质效应因子分别为73.6%~94.6%、85.6%~120.6%、89.7%~103.4%及82.6%~93.4%,回收率为83.2%~87.8%。结论该研究建立了一种简单、快速、灵敏度高和准确性好的LC-MS/MS法,用于人血浆中多黏菌素B中主要成分B1和B2浓度的测定,可为该药治疗药物监测提供简单、可靠的检测方法。