O139霍乱弧菌LPS基因在大肠杆菌中的克隆和表达

利用粘粒载体 pCOS5构建了国内分离的O139霍乱弧菌的基因组文库 ,并从文库中筛选获得可以表达O139霍乱弧菌脂多糖的重组克隆株E .coliJM10 9(pMG310 )。重组粘粒 pMG310经酶切分析 ,所克隆的外源DNA片段大小为 37kb。实验证明 :重组克隆株E .coliJM10 9(pMG310 )

O_(139)霍乱弧菌LPS基因和O抗原基因在大肠杆菌中的克隆表达及O抗原基因结构的初步研究

本研究采用构建基因文库的方法,构建了O139霍乱弧菌的粘粒基因组文库及重组粘粒的亚克隆文库。另外构建了质粒基因组文库。从文库中筛选到可以表达O139霍乱弧菌LPS和O抗原的重组克隆,经鉴定重组克隆表达的LPS和O抗原不但具有与O139霍乱弧菌的LPS和O抗原具有相同的反应原性,而且还具有相同的免疫原性。O抗原基因的部分测序分析表明,O139霍乱弧菌的抗原基因与O1群霍乱弧菌的O抗原基因不同源。

尿素不同施用量对菠菜硝酸盐积累及产量的影响

以菠菜品种超越608为试材,研究尿素不同施用量(0、56、112、168、224 kg/hm2)对其体内硝酸盐积累及产量的影响。结果表明,菠菜体内硝酸盐含量和全氮含量均随着生育期的延长呈现先增高后降低的趋势;随着尿素施用量的增加,菠菜的根系活力和硝酸盐含量均增加;当尿素施用量为112 kg/hm2时,产量高且采收时硝酸盐含量不超标。

霍乱弧菌O139脂多糖基因的克隆表达

霍乱弧菌脂多糖作为一种保护性抗原,其抗血清可以抑制霍乱弧菌在小肠粘膜上的粘附并且可以破坏霍乱弧菌,因此在研制霍乱疫苗时可以作为一种有用的成分。同时,脂多糖作为基因代谢的二级产物,是由多基因协同作用经酶促合成的。这些基因以串联体的形式集中在一起,这为我们的克隆表达提供了便利条件。 本研究首先用粘粒pCOS5构建了O139霍乱弧菌基因组粘粒文库。

O139霍乱弧菌O-抗原基因的克隆及表达

霍乱弧菌脂多糖已经被公认为是一种保护性抗原。它是由三部分组成:O-抗原、核心多糖和磷脂A。其O-抗原具有特异的免疫原性及抗原性,霍乱弧菌的抗血清与脂多糖的抗原抗体反应是针对其O-抗原部分。因此,克隆表达O-抗原基因更便于我们进行基因的操作和构建多价疫苗,它比克隆脂多糖基因更具有实际应用价值。 本研究在建立O139霍乱弧菌质粒基因组文库的基础上。

O_(139)霍乱弧菌内毒素LPS基因在大肠杆菌中的克隆表达

通过玻片凝集法从Ｏ１３９霍乱弧菌基因文库中筛选出可以表达Ｏ１３９霍乱弧菌脂多糖和Ｏ抗原的重组克隆大肠杆菌ＪＭ１０９（ｐＭＧ３１０），ＤＨ５α（ｐＭＧ３２０）和ＤＨ５α（ｐＭＧ３２１）。经免疫学方法鉴定三个重组克隆表达的脂多糖或Ｏ－抗原具有与Ｏ１３９霍乱弧菌脂多糖和Ｏ抗原相同的反应原性和免疫原性，并且三个重组克隆间的反应原性及免疫原性几乎无差别。限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ酶切重组粒ｐＭＧ３２０和ｐＭＧ３２１发现，两个Ｏ抗原基因大小相差近１ｋｂ。

O_(139)霍乱弧菌质粒基因组文库的建立及O-抗原基因的筛选

合成O 抗原的基因是串联在一起的一个基因簇 ,提取O1 39霍乱弧菌基因组DNA ,限制性内切酶EcoRⅠ酶切 ,电泳回收 4～ 2 0kb的DNA片段 ,构建质粒基因组文库。随机筛选重组克隆 ,获得一株可与O1 39霍乱弧菌抗血清发生凝集反应的重组克隆 ,命名为大肠杆菌DH5α(pMG32 0 )。经鉴定分析重组克隆所表达的O 抗原具有良好的免疫原性及反应原性。酶切分析质粒 pMG32 0 ,推知其O 抗原基因大小约 4 6kb。这为今后O1 39霍乱疫苗的研制及O1 39霍乱弧菌O 抗原基因的结构和功能研究提供了条件。

温室不同结构内墙体对其温效应的影响

以温室内墙体比表面积一致的凸式墙体(T)和凹式墙体(A)作为处理,以常规平面墙体作为对照(CK),研究温室不同结构内墙体对其温效应的影响。结果表明:采用凸式墙体或凹式墙体均可提高温室的温效应,使温室内地温、月平均日温、月平均夜温、月平均最低气温以及一天内的气温明显提高。随着墙体深度的增加,墙体的最低温度增加而最高温度降低,其中凸式墙体处理的12cm、18cm、24cm墙体深度最低温度和最高温度均表现最大,而平面墙体最小,显著低于凸式或凹式墙体。采用凸式墙体(T)或凹式墙体(A)均可有效提高温室的蓄热能力,其中凸式墙体(T)白天吸热最多、夜间放热最多,具有更好的蓄热性能。

肿瘤免疫治疗的一种新技术——肽脉冲

肿瘤免疫治疗的一种新技术——肽脉冲曲殿波刘传暄综述马清钧审校（军事医学科学院生物工程研究所北京１００８５０）前言利用疫苗来治疗肿瘤的想法由来以久，甚至可以追溯到２００年前［１］。本世纪５０年代，研究人员发现移植过肿瘤组织的动物在进行肿瘤移植时就可以产...

寒地水稻秸秆还田技术要点分析

秸秆还田作为一项培肥地力的增产措施,在农业生产中得到越来越广泛的应用,不但减轻了秸秆焚烧造成的环境污染,还使土壤的结构得到改善,达到增产增收的目的。鉴于此,可在寒地水稻种植中,对秸秆还田技术进行应用。基于此点,文章从寒地水稻秸秆还田技术要点分析入手,论述了寒地水稻秸秆还田的效果,期望能够对秸秆还田技术的推广有所帮助。

水稻苗床应用基质育秧效果研究

对应用基质在水稻苗床上育秧效果进行试验。结果发现:使用基质育秧的水稻秧苗素质较差,不如常规壮秧剂育秧。转入本田后基质育秧的水稻667m2产574.7kg,比常规壮秧剂育秧产量降低3.7%。

寒地水稻的侧深施肥技术研究

水稻是一种喜肥的粮食作物,确保肥量充足是实现水稻优质、高产种植目标的关键。侧深施肥技术比常规的施肥方法效果更佳。因此,可在寒地水稻栽培中,对侧深施肥技术进行合理运用。基于此点,文章从侧深施肥及其优点分析入手,详细论述了寒地水稻侧深施肥技术要点。

覆膜水稻示范总结

本试验于创业农场第八管理区12号地进行,试验结果表明:覆膜水稻和常规对照处理晚4d。覆膜水稻的伤苗高于常规对照,覆膜水稻的伤苗率比常规对照高2.13个百分点。覆膜水稻的株高要低于常规对照处理低1.3cm。覆之纸膜处理的平方米穗数要低于常规对照处理2穗,覆黑色。覆膜水稻的穗粒数要均低于常规对照处理1.8粒。覆膜水稻的实粒数低于常规对照处理1.2粒。覆黑色膜水稻的结实率高于常规对照处理1.5%。覆纸膜水稻的净增效益为414元/亩。覆黑色膜水稻的净增效益为557元/667m2。

海田有机无机复合肥侧深施肥效果研究

通过大区对比试验研究表明,海田(16:9:10)在各个性状及产量上都优于两个对照,呈现增产效果。而海田(18:7:10)较常规施肥增产,但较三大肥侧施减产。有待于继续试验研究。