ICP-MS法测定长白山天然矿泉水中18种微量元素的含量

目的:检测长白山天然矿泉水中锂、铍、铝、钒、锰、钴、镍、铜、锗、砷、硒、铷、钼、银、锡、铯、锑和钡18种微量元素的含量,为评价长白山天然矿泉水质量提供参考。方法:采集吉林省长白山靖宇县五龙泉、神龙泉、银龙泉和林海泉4处天然矿泉水,水样经酸化后直接采用电感耦合等离子体-质谱(ICP-MS)法进行检测。结果:被测元素的检出限为0.005～0.573μg.L-1,除硒元素外,其他元素相对标准偏差为0.1%～4.5%,回收率为81%～116%;4处矿泉水中的18种微量元素含量均符合GB 8537-2008饮用天然矿泉水卫生标准。结论:ICP-MS方法检出限低,具有良好的准确度和精密度,适用于多种元素快速检测;长白山靖宇县4处天然矿泉水中18种微量元素含量均符合国家饮用天然矿泉水卫生标准。

副溶血性弧菌高免卵黄抗体的制备和不同提纯方法效果的比较

目的:通过比较聚乙二醇(PEG)沉淀法、氯仿抽提法和氯仿/PEG法3种卵黄抗体(IgY)提纯方法的提纯效果,为批量提纯高质量IgY提供依据。方法:制备副溶血性弧菌灭活疫苗,采用肌肉多点注射法免疫高产蛋鸡,收集鸡蛋,分别采用PEG沉淀法、氯仿抽提法和氯仿/PEG法对鸡蛋中的IgY进行提纯,比较3种提纯方法获得的IgY的蛋白质量浓度、抗体效价和纯度,结合操作过程、成本效益及安全性对3种提纯方法进行综合分析比较。结果:3种方法所提纯的IgY中,蛋白质量浓度从高到低依次为氯仿抽提法、氯仿/PEG法、PEG法;抗体效价相差不大,氯仿抽提法稍高;抗体纯度由高到低依次为PEG法、氯仿/PEG法、氯仿抽提法。PEG法安全性较好,但提取效率相对较低,成本投入较高;氯仿抽提法能够高效地从卵黄中获得IgY,但提取物中掺杂了大量的杂质蛋白;氯仿/PEG法提纯效率高,抗体纯度好,成本效益相对较高。结论:PEG法适用于实验室中少量IgY的提取;氯仿/PEG法的提取效率高,抗体纯度好,可用于批量提取高质量的IgY。

含多酸化合物新型洗手液抗甲型流感病毒效果及毒性评价

目的:配制含有多酸化合物的新型洗手液,并探讨其在人手部抗流感病毒的效果和安全性。方法:采用MDCK细胞流感病毒模型研究2种多酸化合物K10Na[(VO)3(SbW9O33)2]·26H2O(PM-1001)和K15[Pr(BW11O39)2]·28H2O(Pr-B)的体外抗病毒作用,选择3个适宜的多酸剂量配制成含高、中、低剂量多酸洗手液;依据美国标准方法进行洗手液抗病毒效果评价,含2种多酸化合物的洗手液各有5名志愿者参与实验,将每名志愿者的10个手指随机分成5组,在手指上涂0.02mL组织培养半数感染剂量(TCID50)为107.5/0.1mL的病毒悬液后,分别在加病毒后、病毒液晾干后和用不同洗手液处理后收集病毒,采用MDCK细胞培养法测定病毒滴度;检测流感病毒在手部晾干30和60min后的浓度和活力变化;选择含高浓度PM-1001的洗手液,按照《消毒技术规范》(2008版)利用昆明小鼠和白色家兔进行毒性评价。结果:PM-1001和Pr-B抗流感病毒的治疗指数(TI)分别为82.68和69.13;对照组的病毒浓度为104.33±0.66 TCID50/0.1mL,各洗手液处理组组织培养法均未检测到病毒,各洗手液处理组病毒浓度均低于对照组(P<0.001),30和60min收集的病毒浓度分别为103.98±0.42 TCID50/0.1mL和103.83±0.35 TCID50/0.1mL,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);含高浓度PM-1001的洗手液对昆明小鼠的经口毒性实验半数致死浓度(LD50)大于5 000mg·kg-1(体质量),对家兔完整皮肤刺激指数为0.33,对3只家兔眼刺激的平均评分分别为0、0.67和0.33。结论:含多酸化合物的新型洗手液可有效抑制手部甲型流感病毒,属实际无毒级的物质,对家兔完整皮肤和眼无刺激性。

复方万年青胶囊联合氟尿嘧啶注射液(5-FU)对胃癌荷瘤小鼠的免疫调节作用及其抗癌机制研究

目的探讨复方万年青胶囊联合氟尿嘧啶注射液(5-FU)对胃癌荷瘤小鼠NF-kb p65/p38水平的影响及其免疫调节作用,为明确药效机制提供实验依据。方法①建立BALB/c小鼠胃癌皮下移植肿瘤模型,除空白组外,将成瘤小鼠随机平分为6组,即模型对照组、5-FU对照组(70mg/kg)、复方万年青胶囊1倍临床剂量对照组(0.5g/kg)、复方万年青胶囊3倍临床剂量对照组(1.5g/kg)、复方万年青胶囊1倍临床剂量+5-FU联合组(0.5g/kg+70mg/kg)、复方万年青胶囊3倍临床剂量+5-FU联合组(1.5g/kg+70mg/kg),检测荷瘤小鼠治疗后NK细胞活性及血清酶学的变化;②Western Blot法检测荷瘤小鼠瘤体组织中NF-kb p65及p38蛋白表达情况。结果①复方万年青胶囊3倍临床剂量+5-FU联合组荷瘤小鼠血清中IgM、IgG、TNF-α活性不同程度降低(P<0.05,P<0.001),复方万年青胶囊1倍临床剂量+5-FU联合组荷瘤小鼠血清中IgM、IgG明显降低(P<0.01);与5-FU对照组比较,复方万年青胶囊3倍临床剂量+5-FU联合组荷瘤小鼠血清中IgG活性明显降低(P<0.01),复方万年青胶囊1倍临床剂量+5-FU联合组荷瘤小鼠血清中IgG活性极明显降低(P<0.001)。各实验组小鼠NK细胞杀伤率分别为81.5%、41.1%、159.6%、96.2%、86.3%、120.6%和194.2%。②5-FU对照组与复方万年青胶囊1倍、3倍临床剂量+5-FU联合组能够下调NF-kb p65/p38水平。结论复方万年青胶囊联合5-FU可通过增强NK细胞杀伤活性的途径来提高机体免疫力,其抗癌机制可能通过降低NF-kb p65/p38水平,抑制Bcl-2活化,从而抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡的发生。

丹七片对气滞、气虚以及寒凝血瘀模型大鼠的治疗作用研究

目的通过相关指标的检测,探究丹七片对气滞血瘀、气虚血瘀以及寒凝血瘀模型大鼠的治疗作用。方法采用钳尾刺激联合肾上腺素皮下注射法、游泳力竭法和冰浴联合肾上腺素联合腹腔注射法,分别构建气滞、气虚以及寒凝血瘀模型。给予不同剂量丹七片治疗干预后,腹主动脉取血,进行血液流变学检测;通过酶联免疫吸附法,进行CK、CK-MB、Na+-K+-ATP等五项相关血清生化学指标检测。结果与空白对照组比较,模型对照组三种血瘀模型的各项指标均有显著升高或降低。与模型对照组比较,三种血瘀模型丹七片高剂量组的各项指标均有明显升高或降低,且具有统计学差异(P<0.05,P<0.01,P<0.001);丹七片中、低剂量组CK、CK-MB等主要指标有明显升高或降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论丹七片对气滞、气虚以及寒凝血瘀模型大鼠的相关指标具有调节作用,使其恢复或接近正常水平,从而达到治疗目的。

养脾丸对脾虚证大鼠模型胃肠及免疫功能的影响

目的通过建立脾虚证大鼠模型,研究养脾丸对模型大鼠胃肠及免疫功能的影响。方法:a.采用灌胃大黄+游泳力竭+隔天禁食建立大鼠脾虚模型,给予不同剂量养脾丸治疗后,检测血浆胃动素(MTL)、血管活性肠肽(VIP)、血清胃泌素(GAS)、血清D-木糖(D-xylose)等相关指标;b.采用100%大黄煎剂灌胃的方法建立小鼠脾虚模型,经不同剂量养脾丸灌胃给药后,检测血清中IgM和IgG含量。结果:a.与空白对照组比较,模型组各指标含量明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),与模型组比较,各给药组可使胃动素、胃泌素等相关主要指标的含量增加(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。b.与空白组比较,脾虚证小鼠廓清指数、吞噬指数以及血清IgG明显降低(P<0.05、P<0.001);与模型组比较,各给药组均可明显提高小鼠廓清指数(P<0.001);养脾丸中、低剂量组可明显提高吞噬指数(P<0.05);四君子颗粒组、养脾丸中、低剂量组可明显提高小鼠血清IgM含量(P<0.05、P<0.01);养脾丸中剂量组还可明显提高血清中IgG含量(P<0.01)。结论:养脾丸具有调节脾虚证所致胃肠激素分泌失调、提高机体免疫功能的作用。

标准化六味地黄胶囊药效学研究

目的:开展标准化六味地黄胶囊药效学研究,并与六味地黄胶囊比较其滋补肾阴的作用.方法:利用氢化可的松注射液建立大鼠肾阴虚模型,研究标准化六味地黄胶囊对下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)、性腺(HPGA)轴的作用;观察标准化六味地黄胶囊对肾阴虚小鼠体液、细胞和非特异性免疫的作用.结果:①标准化六味地黄胶囊高剂量组血清中cAMP、ACTH、Cor.、MDA含量降低(P<0.05,P<0.01),cGMP、T、SOD含量升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001);中剂量组血清中cAMP、ACTH、Cor.、MDA含量有所降低(P<0.05,P<0.01),cGMP、T、SOD含量升高(P<0.05,P<0.001);低剂量组血清中cGMP含量升高(P<0.05),Cor.含量降低(P<0.05);杞菊地黄胶囊血清中cAMP、ACTH、Cor.、MDA含量降低(P<0.05,P<0.001),cGMP、T、SOD含量升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001),标准化六味地黄胶囊中剂量组作用优于六味地黄胶囊.②标准化六味地黄胶囊高、中剂量组血清中IgG和IgM含量降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),小鼠廓清指数K、吞噬指数α有所增加(P<0.01,P<0.001);T淋巴细胞刺激指数显著增加,分别为158.2%、126.4%,标准化六味地黄胶囊中剂量组与杞菊地黄胶囊作用相当,优于六味地黄胶囊.结论:标准化六味地黄胶囊能改善肾阴虚证,调节HPA、HPGA轴及免疫功能紊乱,且作用优于六味地黄胶囊.

复方万年青胶囊与顺铂注射液联用对肝癌荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的 探讨复方万年青胶囊与顺铂注射液联用对肝癌(H;)荷瘤小鼠免疫功能调节作用。方法 建立BALB/c小鼠肝癌移植肿瘤模型,除空白组24只以外,144只成瘤小鼠随机平分为6组,即模型组,化疗对照组(顺铂注射液治疗7mg/kg)、复方万年青胶囊1倍临床剂量对照组(0.5g/kg)、复方万年青胶囊3倍临床剂量对照组(1.5g/kg)、复方万年青胶囊1倍临床剂量+顺铂注射液联用组(0.5g/kg+7mg/kg)、复方万年青胶囊3倍临床剂量+顺铂注射液联用组(1.5g/kg+7mg/kg),观察治疗后荷瘤小鼠体重变化,检测荷瘤小鼠治疗后脾脏指数、抑瘤率、吞噬指数α、NK细胞活性及血清酶学的变化。结果 复方万年青胶囊联合顺铂注射液有增强化疗药物抑制肿瘤生长的作用趋势。根据Webb氏分数乘积法计算,复方万年青胶囊3倍临床剂量+顺铂注射液联用组理论相加效应为50.4%,实际为71.7%,复方万年青胶囊1倍临床剂量+顺铂注射液联用组理论相加效应为47.2%,实际为64.7%,说明具有协同作用。同时,复方万年青胶囊可改善化疗药物对脾脏指数降低的作用(P<0.001),显著提高H;荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能(P<0.01)。荷瘤小鼠NK细胞杀伤率提高到102%,高于其他给药组。结论 复方万年青胶囊联合顺铂注射液可通过调节H;荷瘤小鼠的免疫功能,达到一定的肿瘤抑制和增效减毒作用。

鹿茸口服液中5-羟甲基糠醛限量控制方法的研究

目的建立鹿茸口服液中5-羟甲基糠醛限量的高效液相检测方法。方法采用Kromasil-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(20∶80);检测波长为240nm;柱温为30℃;体积流量1.0ml/min;进样量10μl。结果5-羟甲基糠醛质量浓度在0.0014~0.2838μg范围内呈良好的线性关系(r=1,n=5);精密度、重复性试验结果的RSD均小于2.0%(n=6),平均加样回收率为99.6%,RSD为0.27%(n=6)。结论该方法可用于鹿茸口服液中5-羟甲基糠醛的限量控制。