白芷多糖的提取纯化及其对仓鼠肺细胞生长作用的研究

目的:研究白芷多糖(ADP)的提取纯化及其对中国仓鼠肺细胞(CHL)生长作用的影响.方法:提取ADP,经Sephadex G-50、G-200层析纯化,用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)比色法检测ADP对体外培养的CHL细胞生长增殖的作用.结果:经Sephadex G-50、G-200层析纯化后,分子量范围为1000～200000的ADP在50、100、500μg/m1对CHL细胞的生长增殖均有促进作用.结论:ADP对体外培养的CHL细胞增殖具有促进作用.

口香糖中人参总皂甙样品前处理方法比较研究

用乙醚分散口香糖胶基,温水超声提取,水饱和正丁醇萃取,可见分光光度法对样品进行定量测定。与人参皂甙测定的行业标准方法相比,本方法样品前处理方法更有效,样品测定结果线性好(r=0.9993),平均回收率为99.2%,精密度实验RSD为1.7%(n=6)。本方法可以作为口香糖中人参总皂甙分析测定的简便、快速方法。

白芷多糖的分析

研究了白芷多糖的结构和单糖组成。采用紫外光谱和红外光谱法对白芷多糖进行定性分析。结果表明,白芷多糖具有多糖特征性的紫外和红外吸收峰,其分子中存在酰胺结构;凝胶渗透色谱法测定结果表明,白芷多糖的峰值分子量为88538;采用气相色谱法测定白芷多糖中单糖的种类和构成比例,结果表明,白芷多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖等7种单糖组成,并计算出其中6种单糖的摩尔组成比例。

白芷多糖中单糖组成的气相色谱分析

目的:研究白芷多糖中单糖的种类和组成比例。方法:以三氟乙酸水解白芷多糖,水解产物中加入盐酸羟胺、吡啶和醋酸酐,衍生化反应生成糖腈乙酸酯衍生物,采用气相色谱法测定白芷多糖的单糖组成。用 OV-101毛细管色谱柱(0.22 mm×30 m);进样温度为210℃;检测器温度为240℃;柱温为程序升温:初始柱温110℃,维持5 min,以5℃·min^(-1)的升温速率升高到190℃,维持4 min,以3℃·min^(-1)的升温速率升高到210℃,维持20 min。结果:白芷多糖中含有木糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖和半乳糖等7种单糖成分(有1种未鉴定出的单糖),并测定计算出已知6种单糖鼠李糖-阿拉伯糖-木糖-甘露糖-葡萄糖-半乳糖的摩尔构成比例为1.19:1.19:0.765:1:8.08:3.34。结论:该方法简便、灵敏,可以准确测定出白芷多糖中所含有的各种单糖。

人参多糖注射液及原料药细菌内毒素检查方法学研究

目的建立人参多糖注射液及原料药细菌内毒素检查的方法。方法按《中国药典》2010年版一部附录ⅩⅢD,确定本品细菌内毒素限值,并研究人参多糖注射液及原料药对细菌内毒素检查试验的干扰情况。结果人参多糖注射液在稀释36倍及以下时,对试验无干扰作用,人参多糖在0.08mg·mL-1稀释浓度及以下时对试验无干扰作用,其细菌内毒素限值为每1mg半乳糖醛酸中含内毒素应小于6EU。结论鲎试剂法可用于本品的细菌内毒素检查。

HPLC法测定犬血浆中罗格列酮的浓度

目的:建立HPLC法测定犬血浆中罗格列酮浓度.方法:取犬血浆0.5mL,加内标奎宁,混匀,然后加入3mL乙醚,涡旋振荡、离心,分出有机相,40℃水浴氮气流吹干,用200L流动相溶解残渣,取10L上清液行HPLC分析.流动相为10mmol·L-1KH2PO4-乙腈(60∶40),三乙胺调pH=6.5,流速0.8mL*min-1,色谱柱为NovaPake C18柱(150mm×3.9mm,4.0μm),柱温20℃.荧光激发波长为247nm,荧光发射波长为367nm.结果:犬血浆中杂质不干扰样品的测定,罗格列酮浓度在1.0～1 000.0ng*mL-1范围内线性关系好(r=0.999 9);最低检测浓度为1.0ng*mL-1;方法的平均相对回收率大于90%;平均提取回收率高于80%;日内和日间变异系数均小于12.0%.结论:所建立方法准确可靠,符合生物样品分析要求.

动态浊度法检查注射用血凝酶的细菌内毒素

目的：建立注射用血凝酶细菌内毒素检查法质量标准,并采用动态浊度法对其细菌内毒素检查进行方法学研究。方法：按《中国药典》2010年版二部,计算本品细菌内毒素限值。使用动态浊度法,研究注射用血凝酶对细菌内毒素检查试验的干扰情况,并定量测定样品中细菌内毒素含量。结果：标准曲线回归方程相关系数绝对值为0.9886,标准曲线成立。本品在0.25 KU·ml-1浓度时细菌内毒素回收率在50%~200%范围内,表明此浓度供试品对细菌内毒素检查法无干扰作用。结论：建立了本品细菌内毒素检查法质量标准,本品可采用动态浊度法进行细菌内毒素检查。

小儿牛黄清心散遗传毒性研究

目的评价小儿牛黄清心散的遗传毒性。方法采用鼠伤寒沙门菌回复突变试验(Ames试验)、小鼠骨髓细胞微核试验和细胞染色体畸变试验对小儿牛黄清心散的遗传毒性进行研究。结果小儿牛黄清心散Ames试验中受试物8~5000μg/皿剂量范围内回复突变菌落数均未超过自发回复突变组菌落数的2倍,实验结果为阴性;细胞染色体畸变试验中受试物在250~1000μg/ml剂量范围内与空白对照组比较,染色体畸变率无明显差异(P>0.05),小鼠骨髓细胞微核试验中受试物在500~2000 mg/kg剂量范围内与空白对照组比较,微核率无明显差异(P>0.05),实验结果为阴性。结论在本试验条件下,小儿牛黄清心散未显示遗传毒性。

硝苯地平中杂质的遗传毒性(Q)SAR评价及Ames试验研究

目的对硝苯地平中2个已知杂质进行遗传毒性(致突变性)评价。方法按照ICH M7指导原则的要求,采用基于专家知识规则的Derek和基于统计学的Sarah两类(Q)SAR评价系统,对硝苯地平的2个杂质进行评价和分类。对于(Q)SAR预测结果为阳性的杂质,进一步采用Ames试验进行验证。结果杂质Ⅰ、杂质Ⅱ预测结果为阳性,且分类为3类。杂质Ⅰ、杂质ⅡAmes试验中受试物40~5000μg/皿剂量范围内,在S9存在或不存在情况下,回复突变菌落数均未超过溶剂对照组菌落数的2倍,试验结果为阴性。结论杂质Ⅰ、杂质Ⅱ遗传毒性均为阴性,可以按照非遗传毒性杂质进行控制。

虾青素软胶囊遗传毒性研究

目的研究虾青素软胶囊的遗传毒性。方法采用鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验)、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验等实验方法对虾青素软胶囊的遗传毒性进行研究。结果虾青素软胶囊鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验受试物各剂量组回变菌落数均未超过自发回变组回变菌落数的2倍,结果为阴性;小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验受试物各剂量组与空白对照组比较,微核率及精子畸变率无明显差异(P>0.05),实验结果为阴性。结论在本实验条件下,虾青素无遗传毒性。

微核试验方法的研究进展

微核试验作为遗传毒性的检测方法,广泛应用于药品、化妆品、保健食品等领域的毒性评价,能够灵敏地反映出遗传毒性物质对染色体的损伤。随着检测技术的进步和新方法的应用,对于微核的检测手段也越来越多样。本文着重阐述了目前微核检测的技术方法,以期对现有的微核检测技术的应用提供参考依据。

氟尿嘧啶注射液细菌内毒素检查的研究

目的确立氟尿嘧啶注射液细菌内毒素检查的方法。方法以鲎试剂凝胶法对氟尿嘧啶注射液进行细菌内毒素检测，确定了其内毒素限值和不干扰稀释倍数。结果氟尿嘧啶注射液细菌内毒素限值为0．25EU·mg^-1，样品的有效稀释倍数为12．5～200。结论本实验确立的细菌内毒素检查方法可行。

全蝎保健酒的增强免疫力功能研究

研究全蝎保健酒对小鼠免疫功能的影响。将SPF级ICR雄性小鼠200只随机分为4个实验组,每个实验组动物分为空白对照组、溶媒对照组、低、中、高剂量组(0.85、1.7、5.1 g/kg·bw)5组。空白对照组给予纯化水,溶媒对照组给予15%的酒基,连续灌胃30 d,每日1次。检测全蝎保健酒对刀豆蛋白A(Concanavalin A)诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力、迟发型变态反应、血清溶血素水平、抗体生成细胞数、小鼠碳廓清能力、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力及NK细胞活性等免疫指标的影响。与溶媒对照组比较,全蝎保健酒高剂量组能显著增强小鼠的脾淋巴细胞增殖能力(P<0.05),能明显促进小鼠迟发型变态反应(P<0.05),能显著提高小鼠抗体生成细胞数水平(P<0.05);高、中剂量组可显著增强NK细胞活性(P<0.05);但全蝎酒各剂量组对小鼠胸腺/体重比值、脾脏/体重比值、血清溶血素水平、碳廓清能力及巨噬细胞吞噬鸡红细胞作用无明显影响(P>0.05)。全蝎保健酒具有增强小鼠免疫力的功能。

氧化型染发剂对CHL细胞毒性的研究

随着社会经济的发展以及人们对审美要求的提高,染发剂越来越多走进人们的日常生活中。染发剂是一种特殊用途化妆品,按其来源可分为三大类：金属盐类染发剂、植物性染发剂和氧化型染发剂。氧化型染发剂由于能使头发染成各种颜色且染色持久而颇受欢迎,使用也更为广泛。近年来的研究表明,氧化型染发剂对皮肤组织、造血系统及免疫系统都有不同程度的毒性作用[1-2]。

托品酸的致突变机制研究

目的:研究托品酸的致突变机制。方法:采用鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验,设5 000、2 500、1 250、625μg/皿4个剂量托品酸组、自发回变组、溶剂对照组和阳性对照[非代谢活化条件下:对二甲基氨基苯重氮磺酸钠(Dexon)50μg/皿、注射用丝裂霉素(MMC)0.5μg/皿;代谢活化条件下:2-氨基芴(2-AF)20μg/皿]组,每组6皿,各组在加和不加代谢活化系统S9的条件下,计数组不同致突变类型的氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102的回变菌落数。结果:与溶剂对照组和自发回变组比较,非活化条件下2 500、5 000μg/皿托品酸组和Dexon阳性对照组TA97、TA98、TA100菌株的回变菌落数均明显增加(P<0.01),MMC阳性对照组TA102菌株的回变菌落数明显增加(P<0.01);活化条件下2 500、5 000μg/皿托品酸组TA98菌株的回变菌落数明显增加(P<0.01),2-AF阳性对照组TA97、TA98、TA100、TA102菌株的回变菌落数均明显增加(P<0.01),其余条件的回变菌落数差异无统计学意义。结论:托品酸的致突变作用机制为诱导组氨酸靶基因中鸟嘌呤-胞嘧啶位点碱基置换和移码突变,活化条件的存在会使其诱变性减弱。

蛋白核小球藻遗传毒性研究

小球藻是绿藻门小球藻属普生性单细胞绿藻,常见的种类有蛋白核小球藻、椭圆小球藻、普通小球藻等。自20世纪50年代起,美国、日本、以色列等国已将小球藻作为饲料添加剂。近年来,小球藻在食品领域的应用越来越广泛。现代研究表明,小球藻特别是蛋白核小球藻具有吸附Pb、Cd等重金属、

左羟丙哌嗪和羟苯磺酸钙中2个1类杂质的遗传毒性(Q)SAR评价及质控限度评估

目的:对左羟丙哌嗪和羟苯磺酸钙的已知杂质进行遗传毒性评价,并对现行标准杂质限度的合理性进行评价。方法:按照ICH M7指导原则的要求,采用基于专家知识规则的Derek和基于统计学的Sarah两类(Q)SAR评价系统,对左羟丙哌嗪的3个杂质右羟丙哌嗪、苯基哌嗪、缩水甘油,羟苯磺酸钙及其杂质I(氢醌)进行评价和分类。对于确定为遗传毒性杂质的,根据药物临床用量计算杂质的暴露量,并按照遗传毒性杂质相关指导原则的要求,对其标准限度进行评估。结果:右羟丙哌嗪、苯基哌嗪预测结果为阴性,缩水甘油和氢醌预测结果为阳性,且分类为1类。缩水甘油的标准限度低于可接受安全剂量。氢醌的标准限度过高,存在安全隐患。结论:缩水甘油和氢醌为1类遗传毒性杂质,缩水甘油的标准限度合理,氢醌的标准限度应该进一步严格。

豚鼠不同致敏和激发途径主动全身过敏试验方法的探讨

目的相同剂量卵白蛋白和相同激发时间的条件下,比较豚鼠主动全身过敏反应症状的严重程度与致敏途径和激发途径的关系。方法取300~400 g豚鼠78只,雌雄各半,随机分为13组,每组6只。以0.4%卵白蛋白溶液为受试物,氯化钠注射液为阴性对照,每组动物均隔日致敏1次,连续致敏3次,致敏剂量为0.5 mL(2 mg/只),末次致敏后第14天各组分别进行激发,激发剂量为1.0 mL(4 mg/只)。研究不同致敏途径和激发途径条件下,豚鼠主动全身过敏的发生情况。结果在相同致敏剂量、激发剂量和激发时间的条件下,均以ip致敏的条件下,豚鼠主动全身过敏反应的症状严重程度为iv激发>im激发>ip激发>sc激发,均以im致敏的条件下,症状严重程度为iv激发>ip激发>im激发>sc激发,均以sc致敏的条件下,症状严重程度为iv激发>im激发>ip激发>sc激发,均以iv激发的条件下,症状严重程度为ip致敏>im致敏>sc致敏。结论新药主动全身过敏试验临床前安全性评价研究应注意致敏途径和激发途径。