市售发酵食品中乳酸菌的耐药性评估及传播风险研究

为评估发酵食品中乳酸菌的耐药性及其传播风险,作者对市售酸奶和泡菜中的乳酸菌进行分离鉴定。以纸片扩散法鉴定其耐药表型,分析多重耐药情况,PCR鉴定其耐药基因型。从40份样品中共分离得到包括9种不同种属在内的62株乳酸菌,其中酸奶源乳酸菌均为多重耐药菌,对卡那霉素等5种抗生素的耐药率均高于泡菜源菌株,而泡菜源乳酸菌对庆大霉素和链霉素的耐药率均在40%以上。耐药基因型鉴定结果表明,tetM的检出率最高,为16.12%,酸奶样品分离株中有5种基因的检出率高于泡菜样品。2株酸奶源菌株中四环素耐药基因tetM可通过质粒接合作用转移到受体菌EC600中。作者对市售发酵食品乳酸菌进行了耐药性评估与传播风险研究,为保障发酵食品安全提供理论依据。

浙江省肉鸡源耐药大肠杆菌耐药表型及耐药基因型的分析

从湖州、嘉兴、绍兴3市12家肉鸡养殖场采集粪便、土壤、污水共720份样品,经16s rRNA测序鉴定,K-B法测定耐药表型,PCR法鉴定耐药基因型与整合子,并通过共现网络分析大肠杆菌耐药性传播风险。分离得到的234株大肠杆菌对头孢唑啉、阿奇霉素、四环素与磺胺类抗生素有较高的耐药率,且嘉兴市分离株对其中17种抗生素的耐药率均高于其他两市。基因型鉴定结果表明,234株大肠杆菌中,aadA1的检出率最高为88.89%,其次分别为tet(A)、sul1、blaTEM,而在29种耐药基因中,嘉兴市分离株中有18种基因的检出率高于其他两市。Ⅰ型整合酶3市分离株中的检出率分别为28.38%(湖州),40.96%(嘉兴),32.47%(绍兴)。结果表明:嘉兴市分离株有相对较高的耐药率与耐药基因检出率,共现网络分析显示在嘉兴市大肠杆菌中qnrB与mph(A)、fosA与blaTEM、fosA与sul1、sul2与aadA1有较高的共传播风险。本研究调查了浙江省湖州、嘉兴、绍兴3市肉鸡养殖环境的耐药情况与传播风险,为保障动物性食品安全与特定耐药基因的重点监测提供理论依据。

志贺氏菌CRISPR位点的比较基因组学及与质粒数量的相关性分析

成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)在多数细菌和古生菌中广泛存在,该遗传结构可以有效防御外源DNA(如质粒、噬菌体等)的侵袭,从而降低外源基因的水平转移。本文的研究对象为志贺氏菌属中的鲍氏志贺氏菌、痢疾志贺氏菌、宋内氏志贺氏菌以及福氏志贺氏菌等40株菌。研究不同志贺氏菌种中CRISPR位点的结构差异,其与可移动质粒之间的关联。采用生物信息学的方法比较间隔序列与插入序列的同源性,判断CRISPR位点与RNA二级结构稳定性的关系。结果:40株志贺氏菌中均含CRISPR结构,共有241个CRISPR位点和6个确定位点。本研究发现cas3基因和重复序列均不可作为这4类细菌的分类依据。结论:CRISPR位点的数量和间隔区数量之间在统计学上无关。耐药基因、间隔序列整合子等移动遗传原件具有一定的同源性,表明志贺氏菌在进化过程中不断受到外源基因的侵袭。

减毒沙门氏菌为载体在Vero细胞中表达弓形虫SAG1基因

将PCR扩增获得的弓形虫SAG1基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建成pcDNA3-SAG1真核表达质粒,高压电转化入dam和phoP基因双突变的减毒沙门氏菌(ZJ111株)中,并直接转染Vero细胞,胰酶消化、收集细胞,SDS-PAGE和western blot可检测到30ku左右的蛋白条带和印迹带。结果表明减毒沙门氏菌能将外源基因呈递给Vero细胞并进行表达。

基于“知识、能力、素养”深度融合的人才培养教学模式探索

该文基于食品专业实验应用性强、教学要求高的特点,针对食品学院专业课程教学存在的问题,从优化与丰富实验教学内容和类型、融合多种教学方式如Blackboard网络课堂、激发学生实验学习兴趣、突出学生实际操作能力考核和实现实验教学的有效延伸等方面,进行了有益的探索,致力于开发基于“知识、能力、素养”深度融合的人才培养模式。

刚地弓形虫Rop18基因的原核表达及鉴定

利用PCR技术从弓形虫RH株基因组中扩增出Rop18基因片段,克隆入pET-30a载体,将重组质粒转化入大肠杆菌Top10中,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与参考序列(登录号:JX045329.1)比对发现,核苷酸同源性为99.6%。将阳性重组质粒转化入大肠杆菌BL21中,表达产物经SDS-PAGE检测结果显示,Rop18基因在大肠杆菌中成功表达;融合蛋白的分子质量在66.2ku左右,Western blotting显示其能被兔抗弓形虫免疫血清识别。结果表明,弓形虫RH株Rop18基因可以在原核表达系统中高效表达,该重组蛋白具有免疫原性,有望作为弓形虫疫苗候选抗原。

基于能力培养的“食品卫生学实验”教学改革

实验教学是高校教师授课的基本手段,不仅能够加强教学环节,更为重要的是能够培养并提高学生科学的思维方式与实践能力。本课程改革可以改变传统实验教学局限于单纯掌握操作技术、依附于理论以及验证原理等情况,改革并充实了实验教学内容,为学生开拓了探索和创新的思维空间,提供了自主、开放的实验环境。它将科学研究渗入到实验教学,着力培养了学生的创新能力、实践能力、创新精神和创新意识。

基于能力培养的“动植物检验检疫”创新实验平台建设

创新实验平台是以学生为主体,在教师的指导下直接参与实验研究的一项实验实践教学改革活动。创新实验研究平台建设在充分认识并落实实验教学在学校教学工作和人才培养中的重要地位基础上,将从根本上改变传统的实验教学过度依附于验证教学,进而形成实验实践教学与课堂理论教学相互协调发展的氛围和课程体系。鉴于此,本文结合"动植物检验检疫"这一食安系特色专业,浅谈基于能力培养的创新平台建设,旨在成功培养创新人才的教学体系形成与发展。

弓形虫半巢式PCR检测方法的建立

根据GenBank上公布的弓形虫RH株的P30基因(X14080)设计了3条特异性引物P1、P2和P3,建立了半巢式PCR检测体系,并将P1和P3的扩增产物克隆到pUCm-T载体上进行测序。结果表明,该体系能够扩增出约250 bp的片段,P1和P3能扩增出约500 bp的片段,克隆到pUCm-T载体上的504 bp片段与P30基因(X14080)的序列同源性为99.8%。该PCR检测体系特异性强,在健康猪血液、猪链球菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌和猪圆环病毒DNA上未扩增出条带;敏感性高,最低检测为18 fg。该检测体系的成功构建为猪弓形虫的检测和流行病学调查提供了有力的技术支持。

鸡柔嫩艾美尔球虫ZJ株3-1E基因的原核表达及鉴定

本实验对E.tenellaZJ株的3-1E基因进行了克隆和表达。根据已报道的柔嫩艾美尔球虫3-1E基因序列设计引物,以孢子化卵囊总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增得到一条特异片段,将扩增产物克隆至pUCM-T,转化感受态菌DH5α,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与参考序列比较,核苷酸同源性为99.5%。然后将重组质粒和表达载体pET-30a分别以EcoRⅠ、SalⅠ酶切后构建重组表达载体pET-30a-3-1E,并将其转化入大肠杆菌BL21中,提取质粒经酶切和PCR鉴定正确后,用IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Westernblot检测显示,3-1E基因在大肠杆菌中成功表达;融合蛋白的分子量约为27ku,诱导6h的蛋白表达量可达到47.024%。

《高级生物化学》课程中思政案例库的建设及案例式教学的应用

为强化研究生的道路自信、加深社会主义现代化强国和实现中国梦的教育,在研究生的专业课程《高级生物化学》中嵌入科学、合理、贴切的思政教育文化,并以此建立相应的课程思政案例库,并采用案例式教学模式展开教学。经过一个学期的授课,发现该授课方式能够较好地增强研究生的思政教育,并提升了学生的期末测验成绩。因此,这可能是一种新的授课模式,不仅能够推动理工科类研究生在思政文化的建设,而且可以促进学生扎实掌握专业课的知识内容。

翻转课堂教学模式在食品类专业中的应用及有效性

翻转课堂是信息化快速发展的新型教学授课模式,可能为传统高等教育在发展过程中出现一些瓶颈现象提供新的思路和解决方法。目前翻转课堂在食品类专业领域的研究较少。本文分析了翻转课堂在高等教育过程中的构成要素,并在《食品营养生物学》和《生物化学》两门课程中开展翻转课堂授课模式,发现它具有更好的教学效果。说明将翻转课堂引入食品类专业中的教学,有助于充分发挥学习主体——学生的学习积极性和主动性,提高他们的自主学习能力,而且还有助于提高教师的教学满意度。

食品专业教学国际化的路径——以核心课导入专业英语教学为例

针对食品专业教学国际化问题,从核心课导入专业英语的角度,提出了食品专业教学国际化的路径:大力引进教辅人才和完善教师自身素质,建立一流的师资力量;更新教学内容、教学方式和评价方法,提高授课模式国际化水平;通过境内外合作授课、学生互换和申请食品专业认证,建设一流的食品专业。专业核心课英语教学的实施和推进旨在利用国际优质教育资源,提升我国教学水平和学生对专业先进知识的掌握能力。

猪附红细胞体体外培养体系的初步探讨

为了建立稳定可靠、简单易行、成本低廉的猪附红细胞体体外培养方法,从RPMI-1640、D-MEM、M-199 3种培养液中筛选出效果最好的基础培养基。在筛选出的基础培养基中分别添加20%、30%、40%的猪血清,筛选出培养效果最好的血清浓度。结果表明:以RPMI-1640基础培养基中添加40%的猪血清,在37℃5%的CO2环境下体外培养效果最好。该培养方法的建立,可为猪附红细胞体生物学特性以及药物防治等奠定基础。

MOOC环境下混合式教学在《食品安全与品质控制原理》课程中的应用研究

传统的教学模式使学生越发失去积极性,教学内容也已无法适应新时代学生素质培养的要求。而基于MOOC环境的混合式教学模式,为工科食品类专业的核心课程《食品安全与品质控制原理》提供了优质资源和个性化培养需求。本文概述了传统教学模式与MOOC模式的优缺点,重点阐述线上MOOC网络教学结合线下传统教学的混合模式实施方式。

线上线下混合模式的食品专业核心课程教学质量提升探讨

互联网+应用于高等教育是推动新时代教育信息化的重要方式。本文分析了线上线下混合式教学模式在当下教育中的优势地位,指出了目前该模式中普遍存在的问题,同时针对食品专业核心课程的线上线下混合教学质量提升,提出了课程体系“模块化”、课程内容“前沿化”、授课语言“双语化”、授课方式“丰富化”以及评价方式“多元化”等“五化”的改革方案。

基于学习质量保障体系(AOL)的《食品品质学》教学改革路径

高等学校的教学改革,改到深处是课程的改革,而高等教育的专业课程教学质量保障对于高等人才的培养至关重要。学习质量保障体系(Assurance ofLearning,AOL)是一种非常有效的检验教师教学质量和学生学习成效的检测体系,目标是评估课程开设和教学实践结果是否符合人才发展目标的要求,宗旨是通过学生学习效果的评估说明人才培养质量最终是否达到其所设定的目标,并运用评估数据制订教与学的改进方案。本文以食品质量与安全专业的核心基础课程《食品品质学》为例,基于AOL体系设置四大教学目标及其子目标,并使目标与教学内容、教学方法、考查类型相匹配,建立相应的课程评判标准与改进策略,使教学相长,保证教学水平与学习效果的共同进步和良性发展,培养专业能力与职业道德兼备的高素质食品专业人才。

食品质量与安全专业人才的社会责任意识培养

鉴于当下食品安全问题频发、从业人员责任意识薄弱、教与学之间矛盾重重等现象,提出针对高校食品质量与安全专业人才社会责任意识培养的对策:架构承前启后、1+1+X、微课等模式的教学设计,构建研究式教学、实验点缀、启发性案例等教学手段,并通过减压式全过程考核、问卷式课后反馈,从而提高本科教学效果。

浅谈开放交流和安全科学并重的高校实验环境创建

本文从创建开放交流的大环境和营造安全科学的小环境两个角度,探讨实验室建设的具体改进方案。实验室平台通过面向所有本科学生、研究生开放,以及加强每个科研团队之间交流合作,创造一个和谐的大环境;同时从细节出发,规范实验仪器的正确操作和完善人员管理两方面,探讨如何营造安全科学的实验室小环境,以完善实验室管理、促进专业发展以及教师和学生的共同进步。

霉菌毒素在肉鸡体内的残留及其控制研究

为研究霉菌毒素在肉鸡体内的残留情况,并对3种霉菌毒素吸附剂的控制吸附效果评价,选用210羽三黄鸡,随机分成7组,每组3个重复,每个重复10羽。试验鸡分为试验组Ⅰ(霉菌毒素含量AFB124.71 ng/g;OTA 12.3 ng/g;ZEA 274.62 ng/g),试验组Ⅱ(AFB141.18 ng/g;OTA 20.57 ng/g;ZEA 457.7 ng/g),其他各组分别为对照组和试验组添加霉菌毒素吸附剂A与吸附剂B,试验期21 d。结果表明,霉菌毒素严重影响肉鸡的生长性能,添加吸附剂有效改善肉鸡的生长性能。试验组Ⅰ肉鸡肝内AFB1、OTA、ZEA的残留量分别为(5.07±0.21)ng/g、(1.17±0.06)ng/g、(16.57±1.00)ng/g,肾脏为(2.57±0.25)ng/g、(2.83±0.25)ng/g、(12.17±1.73)ng/g;试验组Ⅱ肝内残留分别为(7.80±0.36)ng/g、(1.83±0.35)ng/g、(20.60±0.90)ng/g,肾脏为(3.90±0.20)ng/g、(4.50±0.75)ng/g、(18.33±0.85)ng/g。添加霉菌毒素吸附剂后,均可有效减低体内残留;AFB1、OTA、ZEA在肝中的含量分别下降了40.64%、8.74%、15.87%,肾中则降低了24.90%、18.73%、30.98%,而从粪便中排出量分别提高了93.41%、40.24%、72.58%。