凹凸棒土作为食源性致病菌核酸提取材料的可行性研究

目的研究凹凸棒土作为一种低成本、高效的食源性致病菌核酸提取材料的可行性。方法利用X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)、傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)、Zeta电位分析、扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)和比表面积及孔径分析(brunauer-emmett-teller,BET)对凹土样品进行表征,建立凹土样品对DNA吸附和解吸附的方法和体系,并进行条件优化。利用吸附动力学模型和吸附等温模型考察其对DNA的吸附作用,以金黄色葡萄球菌为核酸提取对象,考察核酸提取的得量、纯度与完整性。结果吸附体系中最适pH为5.0,Na+最适浓度为300 mmol/L,准一级动力学模型和Freundlich模型更好地模拟吸附结果,凹凸棒土对DNA饱和吸附量理论值达到18.8972 ng/μg,选取25 mmol/L三聚磷酸钠为解吸剂,解吸率可达95.80%±0.44%。将凹凸棒土应用于金黄色葡萄球菌核酸的提取可获得完整、得量为(4.74±0.20)μg的基因组DNA。结论凹凸棒土对DNA有较强的吸附效果,且选取合适的解吸剂DNA易洗脱。以凹凸棒土为核酸固相提取材料,有望实现食源性致病菌基因组DNA的低成本、高效提取。