玉米秸秆堆腐还田对黑土区土壤性状的影响

本研究针对东北地区秋冬季节气候寒冷特点和秸秆堆腐还田的实际操作需求,开展秸秆堆腐还田试验。在秋季玉米收获之后进行田间堆腐试验,期间连续监测环境温度、降水、秸秆堆温度、秸秆失重率等指标。离田玉米秸秆经过腐熟后作为肥料还田,连续施用3年,检测土壤有机质、碱解氮、速效磷、速效钾、土壤孔隙度、土壤容重等指标。在基本农田和棚室保护地进行为期2年的应用试验。结果表明:120 d秸秆失重率达到31.53%。施用腐熟秸秆3年,土壤有机质提高了4.06~6.31 g/kg、土壤中碱解氮提高了15.08~27.35 mg/kg、速效磷提高了18.11~21.95 mg/kg、速效钾提高63.97~89.93 mg/kg;土壤容重降低了0.10~0.14 g/cm^(3)、土壤田间持水量提高了7.51%~9.24%(V/V)、土壤孔隙度提高了3.69%~5.27%(V/V),且差异显著(P≤0.05)。基本农田和棚室保护地应用试验中,速效养分与有机质有所增长,土壤容重与田间持水量变化显著。逐年施用腐熟秸秆对于提高土壤有机质含量、速效养分具有显著作用。同时,施用腐熟秸秆能够降低土壤容重,提高土壤孔隙度与田间持水量,改善土壤板结问题。腐熟秸秆在改良与保育黑土性质方面具有良好的作用。

鸡源高黏附性乳酸菌的筛选及其发酵条件优化

研究旨在筛选获得高黏附性、益生特性优良、具有高活性的鸡源乳酸菌,为鸡源益生菌制剂的开发奠定基础。从健康散养鸡肠道中分离宿主源乳酸菌,对分离菌株的表面疏水性、自聚力、共聚力等表面黏附特性及体外黏附作用进行研究,筛选高黏附性乳酸菌,评价其益生特性。利用响应面法对高黏附性乳酸菌发酵条件中显著影响因素进行优化,获得其最佳的发酵条件。结果显示,从鸡肠道中分离出1株罗伊氏乳杆菌L6,体外黏附效率可达29.47%,黏附效率显著高于其他乳酸菌分离株,在模拟胃肠液中存活率可达80.11%,对致病性大肠杆菌1.505具有显著的抑菌效果(P<0.05)。对罗伊氏乳杆菌L6发酵条件优化,获得最佳的发酵条件为:初始pH 6.73、酵母浸粉添加量6.63 g/L,葡萄糖添加量28.85 g/L,优化后其有效活菌数量可达8.56×10^(9) CFU/mL。从鸡肠道分离获得的高黏附性的宿主源性乳酸菌罗伊氏乳杆菌L6具有较好的定植优势与益生性能,有助于其在宿主内发挥益生作用。

PEDV乳酸菌工程菌株对小鼠的免疫效果研究

本研究以引起猪流行性腹泻的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)为研究目标,利用含有PEDV S基因的植物乳杆菌活载体菌株LP1522-PEDS口服免疫小鼠,应用ELISA试验检测免疫小鼠粪便中SIgA含量、血清中IgG、IL-4、IL-2和IFN-γ含量,评价乳酸菌重组菌株LP1522-PEDS对小鼠的免疫效果。结果表明,首次免疫后,商品灭活疫苗组和工程菌株免疫组粪便中的SIgA、血清中的IgG、IL-4、IL-2和IFN-γ含量较对照组显著升高(P<0.05)。在免疫42~56 d,灭活疫苗组和重组菌株组抗体水平均达到最大值,抗体和免疫因子水平依次为:商品灭活疫苗组>LP1522-PEDS组>空载组≈对照组。随后商品灭活疫苗组、LP1522-PEDS组抗体和免疫因子水平逐渐下降。免疫70 d,商品灭活疫苗组抗体水平降幅度相对较小,工程菌株免疫组降幅较大。结果表明,小鼠口服携带PEDV S基因的基因工程植物乳杆菌LP1522-PEDS后能够诱导机体产生PEDV免疫应答。

论敦煌写本《心海集》残卷的思想内容与形式特征

敦煌写本S.3016与S.2295所见《心海集》是抄写者为了方便个人记诵而进行的较为随意的传抄,其抄写时间应在中晚唐时期。从内容上看,其中的各个篇目是对南宗禅的佛性观、修行观、解脱观的系统阐发。从形式上看,《心海集》明显受到了汉译佛经偈颂程式化体式的影响,但较为讲求韵律,对程式的运用相对灵活,出现了大量的同义类聚现象。

玉米秸秆堆腐菌株对堆腐过程中生物多样性的影响

以东北地区玉米秸秆为试材,采用实验室模拟器方法开展堆腐试验,从堆腐秸秆中分离筛选适用于不同发酵温度的优势细菌菌株,经过16S法测序比对后,将分离得到的菌株制备成为秸秆腐熟菌株,应用于控温反应器中模拟秸秆腐熟试验,研究了秸秆腐熟菌剂对堆腐过程中微生物多样性与秸秆失重率的影响,以期加快秸秆堆腐效率。结果表明:从玉米秸秆堆腐物中分离菌株制备的腐熟菌株应用于模拟试验后,对秸秆堆腐中微生物群落的变化具有显著影响。梯度升温20 d,混合菌株试验组堆腐玉米秸秆中纤维弧菌属(Cellvibrio)菌群的相对丰度显著高于其它各组,其秸秆失重率为16.03%,CK秸秆失重率为12.41%,二者差异显著(P<0.05)。从玉米秸秆堆腐现场分离菌株制备的腐熟菌株对玉米秸秆模拟堆腐过程中微生物多样性变化具有显著影响,有助于促进秸秆降解。

发酵黄芩药渣对仔猪生长性能、氧化应激及免疫功能的影响

鉴于中药黄芩浸提后的残渣中仍含有功能活性成分,直接丢弃会造成资源浪费,处理不当则污染环境。研究分离得到一株可利用黄芩废渣生长的菌株,鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。利用该菌株发酵黄芩药渣作为饲料添加剂,对断奶仔猪进行饲喂试验,对其日增重、腹泻率、肠道微生物群落、血清免疫指标及药理学毒性指标进行检测。结果表明,饲喂28 d,与对照组相比,发酵黄芩药渣组仔猪日增重显著提高29.38%(P<0.05),仔猪腹泻率显著降低(P<0.05);仔猪肠道中大肠杆菌数量显著减少,乳酸菌数量显著增多(P<0.05);仔猪血清中IgG、IL-4含量均显著提高(P<0.05)。经植物乳杆菌发酵的黄芩药渣作为饲料添加剂能够有效提高仔猪增重,降低仔猪腹泻率,有助于提高仔猪免疫力,调节仔猪肠道微生物菌群。

优化植物乳杆菌发酵黄芩药渣制备饲料添加剂的研究

试验对植物乳杆菌发酵黄芩药渣的发酵工艺展开研究,利用响应面法优化获得最佳发酵工艺条件。通过单因素试验探索药渣含水量、发酵温度、发酵时间、初始pH值、接种量的最适范围。设计Plackett-Burman爬坡试验,筛选关键因素;应用Box-Behnken响应面试验设计优化最佳发酵条件并进行验证分析。结果显示,药渣含水量、初始pH值和发酵温度是影响黄芩药渣发酵工艺的关键因素;以发酵药渣中乳酸菌有效活菌数量为响应值,通过Box-Behnken响应面试验优化,得到发酵黄芩药渣最佳的发酵条件:药渣含水量63%、初始pH值6.3、发酵温度33℃,发酵黄芩药渣中乳酸菌最高活菌数8.32×10;CFU/g。研究表明,利用响应面法优化,可获得植物乳杆菌发酵黄芩药渣的最佳发酵工艺条件。

PGPR植物促生肥在大豆上应用效果研究

目的:探讨PGPR植物促生肥在大豆上的应用效果。方法:采用田间小区随机试验及大区简单对比处理、拌种及作种肥施用方式进行,生育期调查,对产量及产量构成因子进行比较分析。结果:大区对比试验,亩施100ml液体菌剂或1.0kg粉剂拌种,与常规施肥的对照相比,大豆早熟2~3d,根瘤数增加3.0~26.8个/株,百粒重增加0.2~0.8g,产量提高3.2%~12.7%。除1个试验点因低温干旱增产不明显外,其余试验点增产率都超过6%。其中,液体拌种平均增产9%,固体粉末作种肥平均增产9.3%,与小区试验结果基本相吻合。结论:PGPR植物促生肥在大豆上应用效果稳定,增产显著,具有实际推广应用价值。

用于盐碱土壤处理的氧化硫硫杆菌的选育及鉴定

目的:基于氧化硫硫杆菌能够氧化硫产生硫酸的特性,在盐碱土壤治理与改良方面有良好的应用前景。方法:筛选出氧化硫硫杆菌,其代表菌株TT03是细小杆状细菌,依据依据《伯杰氏细菌鉴定手册》第八版中分类,结合16S rDNA序列测定结果。结果:鉴定为嗜酸性氧化硫硫杆菌A.T(Acidithiobacillus thiooxidans)。

外源类黄酮对大豆根瘤菌趋化性与结瘤效果的影响

以慢生型大豆根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)2-39为供试菌株,分别以不同浓度(5,10,15,20,25μg·mL^(-1))的大豆黄素、4-甲基伞形酮、金雀异黄酮、芒柄黄花素为诱导物,利用毛细管培养法对趋化的根瘤菌进行定量测定,研究不同种类和不同浓度的外源类黄酮对大豆根瘤菌趋化性的影响。选取对根瘤菌趋化性影响显著的外源类黄酮与大豆嫩丰16进行盆栽试验,进一步探究外源类黄酮对大豆结瘤效果的影响。结果表明:4种外源性类黄酮中,大豆黄素和金雀异黄酮对根瘤菌的趋化作用显著强于其它试验组,其最适作用浓度为15μg·mL^(-1)。盆栽试验结果显示:外源类黄酮大豆黄素和金雀异黄酮同时加入能够有效促进大豆结瘤。

纤维素酶的固体培养方法

通过对菌株产酶能力的测定 ,确定了绿色木霉 (Tri chodermaviride)HW0 7作为生产菌株。研究了培养基组成、培养条件和培养过程对产酶能力的影响 ,确定了固体培养生产纤维素酶的生产工艺。研究了纤维素酶的酶学特性。在确定工艺条件下 ,曲料的绝干酶活力 (CMC -Na)达 2 6 0 5.1u/g ,产品收率79.0 %。

饲料用酸性蛋白酶研究

从固体发酵角度研究了酸性蛋白酶的生产， 经过初步的菌株筛选，确定黑曲霉 HW22做为生产菌株。进一步的研究得出适宜的培养基组成是麸皮∶豆粕∶菌渣 =3∶ 6∶ 1、添加固体物料 1.0％的尿素、 0.2％磷酸二氢钾，适宜的培养条件是温度 28℃、 pH自然（ pH值 6.5）、物料加水比 1∶ 1.2、物料热处理条件 9.806× 104Pa，培养时间 56h～ 64h。在上述的条件下，曲料的绝干酶活力可达 24 178U/g。 HW22产酸性蛋白酶的最适温度和 pH值分别为 45℃～ 47.5℃和 2.5，此酶在 40℃以下比较稳定，在温度 55℃以上经过 20min处理即造成酶的严重失活，同时此酶在 pH值 2.5～ 3.5的范围内也比较稳定。

碳源对产紫青霉产菊粉酶的影响

试验不同碳源对产紫青霉菊粉酶生产情况的影响。结果表明，果糖、菊糖、菊芋浸汁作为碳源是菊粉酶生产较理想的诱导因子，但过量的果糖会产生阻遏。经菊糖作为主要碳源和唯一碳源筛选的菌株产酶能力可提高６－７倍。同时在发酵前期加入易利用的碳源培养菌体，后期利用菊糖诱导酶的产生，可使酶产量提高２倍。

金属离子对氧化硫硫杆菌生长及产酸的影响

目的:在前期研究中选育出的氧化硫硫杆菌TT03,为了解其对各种金属离子的适应能力而进行了试验。方法:在史塔克培养基中添加规定量的各种金属离子,接种TT03后进行摇动培养,测定培养液中的产酸以代表其实际生长状况。结果:在Co3+、Zn2+为100mg/L而其他微量元素为1 000mg/L时没有产生抑制作用,其中有些微量元素还表现出促进作用;除Pb2+、Cd2+以外,重金属在1 000mg/L下普遍表现出轻微的抑制作用,对产酸没有明显影响;当Pb2+、Cd2+的含量分别在10mg/L、1mg/L时,对TT03产酸没有影响.在试验的金属离子中,Cd2+对TT03产酸的抑制作用最强,在浓度30mg/L时,生长产酸被完全抑制。结论:在正常土壤环境中的金属离子含量,不会对氧化硫硫杆菌TT03的生长和产酸造成致命影响。

黑龙江省微生物肥料现状与问题

黑龙江省利用自身资源和生态优势,大力发展环境友好型农业,积极推广生物肥应用。近些年在推广固氮菌肥、解磷菌肥、生物钾肥、复合微生物接种剂的同时,生物有机肥也得以快速发展。拥有先进技术的国外公司的进入,使得全行业内技术、产品更新,市场竞争更加激烈。提高企业自身科技核心竞争力,完善的微生物肥料质量标准和管理体系等问题亟待解决。

亚麻脱胶菌HW201的培养条件优化

本文研究了用于亚麻脱胶的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HW201的扩大培养方法,研究结果表明,最佳的培养基组成是玉米面1.5%、豆粕粉1.5%、磷酸氢二钾0.4%、碳酸钙0.4%;最佳的培养条件是培养温度36℃、pH6.5~7.5;在生产试验中,菌体的总数达到1014cfu/mL以上;相对于液体菌剂,固体菌剂更有利于产品的贮存。

纤维素酶处理玉米秸秆对NDF与ADF及乳酸菌数量的影响

通过纤维素酶对玉米秸秆的降解,测定不同玉米秸秆样品的失重率、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)及乳酸菌活菌数量的变化,采用SPSS数据分析软件进行数据整理,结果表明,加入纤维素酶后,秸秆的失重率均有提高,NDF和ADF都有显著性﹙P<0.05﹚降低。纤维素酶不同添加量的降解能力不同,NDF最高降低了27.47%,ADF最高降低了14.6%。添加了纤维素酶的样本中,黄贮玉米秸秆的乳酸菌数量提高了1~3个数量级,产生的酸香味对于牲畜的肠道健康及采食具有促进作用,说明黄贮玉米秸秆中加入适量的纤维素酶,可降低粗纤维含量,改善黄贮玉米秸秆的品质,提高有益微生物菌群的数量与活性,缩短了玉米秸秆黄贮的时间。

纤维素分解菌的选育及在粪便堆积发酵中最佳生长条件的研究

对7种样品进行系统分离,初筛获得约20株菌,通过对菌落形态、生长速度的观察以及分解纤维素能力判定,挑选其中3株进行分离纯化得到单个菌株B1、F1、F2。通过对菌株纤维素酶活的测定,确定选择B1、F1菌作为沼渣堆肥发酵的试验生产菌并根据各菌株的菌落特征和形态特征,初步确定B1、F1为木霉(Trichoderma),F2为青霉(Penicillium)。以牛粪为试验对象,研究了复合菌剂在粪便堆积发酵中最佳生长条件,研究表明:物料C/N为35、水分60%、接种量5%、pH8.0的条件下,适合菌剂中的微生物生长繁殖,活菌数达到40.12×108cfu/g。

枯草芽孢杆菌HW201的亚麻生物脱胶条件优化

本项目研究了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HW201在亚麻沤麻过程中应用的基础条件与效果。结果表明,沤麻液中需要补充适量尿素以促进枯草芽孢杆菌HW201的生长和繁殖;纯HW201菌能够在沤麻过程中起到脱胶作用;在试验的沤麻条件中,固液比对沤麻有比较大的影响,降低固液比后沤麻液中的微生物生长更加旺盛;多聚磷酸钠和HW201联合使用,明显缩短了沤麻周期,处理后的麻纤维在化学成分上与传统生产工艺基本一致。