圈养灵长类动物肝炎病毒血清流行病学的调查

研究旨在了解南宁市动物园圈养非人灵长类动物人类肝炎病毒感染情况,采用间接酶联免疫法或发光免疫法对园内17种非人灵长类动物血清样本中甲型肝炎病毒(HAV)、丙型肝炎病毒(HCV)、丁型肝炎病毒(HDV)、戊型肝炎病毒(HEV)抗体以及乙型肝炎病毒(HBV)两对半检测。结果显示,所有血清样本中HAV、HCV、HEV和HDV抗体的检测结果均为阴性。除戴帽长臂猿、其他类长臂猿外,其余15种灵长类动物的乙肝两对半检测结果均为全阴性。乙肝两对半检测结果中,1,3,5项阳性11例,占总样本数的6.47%,其中戴帽长臂猿10例,其他类长臂猿1例;2,4,5项阳性6例,占总样本数的3.53%,其中戴帽长臂猿4例,其他类长臂猿2例;乙肝表面抗体(HBsAb)阳性5例,占总样本数的2.96%,其中其他类长臂猿4例,戴帽长臂猿1例。研究表明,长臂猿动物可以感染或携带HBV,试验未检出HAV、HCV、HDV、HEV阳性个体。

降尿酸活性发酵乳杆菌F40-4在酸乳发酵中的应用

高尿酸血症是嘌呤代谢紊乱、血尿酸浓度持续增高引起组织损伤的一种异质性疾病,严重的情况下有可能引发痛风等症状,益生菌具有潜在的缓解或治疗作用。该研究的目的是探究前期筛选得到的1株具有降尿酸活性的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)F40-4在酸乳发酵中的应用潜力。结果显示,L.fermentum F40-4对酸乳发酵剂主体菌株嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌的生长没有显著影响;与对照组相比,L.fermentum F40-4对发酵过程中酸乳的pH、酸度指标影响不大,L.fermentum F40-4和发酵剂1∶1接种发酵可延缓酸乳在冷藏过程中的pH下降进程并减少乳清析出;风味分析结果表明,L.fermentum F40-4酸乳的挥发性风味化合物更加丰富,主要含有酯类、醛类、醇类、酮类、酸类、烃类,其中酯类和醛类含量最高。该研究表明,L.fermentum F40-4可作为辅助发酵菌株用于酸乳的发酵,为进一步开发具有降尿酸功效的益生菌酸乳提供了理论依据。

抗菌肽在调节免疫和维持肠道健康中的作用

抗菌肽是生物体产生的一类具有抗菌作用的活性肽,具有安全、不易产生耐药性等优点。抗菌肽不仅可以抑制腐败菌和致病菌的生长,还有助于提高机体免疫力和改善肠道健康,广泛应用于医药、食品、农业等多个领域。肠道除了发挥消化吸收作用外,还是机体最大的免疫器官,对维持人体健康发挥着至关重要的作用。近年来,抗菌肽在调节免疫和维持肠道健康中的作用备受关注。本文综述了抗菌肽在调节免疫和维持肠道健康中的作用,提出了抗菌肽的研究发展新方向,为拓宽抗菌肽的研究与应用领域,发掘抗菌肽的健康功效提供参考。

降尿酸益生菌的筛选及其在酸奶中的应用研究

高尿酸血症是一种嘌呤代谢紊乱疾病,表现为血清尿酸浓度异常升高。利用益生菌降尿酸正逐渐成为治疗高尿酸血症的新策略。以尿酸降解率为指标,筛选得到3株具有高效降尿酸能力的乳酸菌,分别为副干酪乳杆菌X11、植物乳杆菌Q7和发酵乳杆菌F40-4。对3株菌的生长特性、产酸特性、疏水性、自聚性、耐酸、耐胆盐、胃肠液耐受性等特性进行了评价,然后研究了3株菌对嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌生长的影响,优化确定最佳发酵温度和发酵配比,研制具有降尿酸功能的酸奶。结果表明:副干酪乳杆菌X11、植物乳杆菌Q7和发酵乳杆菌F40-4均在10 h后进入生长稳定期,pH稳定在4.20左右。植物乳杆菌Q7在疏水性、耐酸性、胃肠道耐受性等方面的性能最好,对嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌的生长抑制影响最小;副干酪乳杆菌X11的自聚性、耐胆盐能力最佳。综合分析发酵制得酸奶的pH、可滴定酸度、总活菌数、析水率、质构、感官评价等指标,确定植物乳杆菌Q7可作为辅助发酵剂用于降尿酸益生菌酸奶的研究与开发。

广西地区猪瘟流行毒株E2基因的序列测定与分析

【目的】了解广西地区流行猪瘟病毒（CSFV）E2基因的变异规律与趋势,及其与疫苗毒株基因的差异性,为制定猪瘟防控措施提供科学依据。【方法】对广西地区流行CSFV毒株的E2基因进行克隆及序列测定,并与兔化弱毒（HCLV）、石门（Shimen）毒株的E2基因进行同源性比对分析,绘制遗传进化树。【结果】广西地区流行CSFV毒株与HCLV株、Shimen株的核苷酸序列同源性为81.9%～83.3%和81.1%～82.4%,推导氨基酸序列同源性为89.3%～90.6%和87.9%～89.5%;不同广西地区流行毒株间的核苷酸序列及其推导氨基酸序列同源性分别为90.8%～99.5%和94.1%～99.5%,且均属于S2基因群的S2.1亚群,其中广西玉林株GXYL1、GXYL2、GXYL3、GXYL4、GXYL5均属于S2.1b子群,而广西贺州株GXHZ1、GXHZ2与广西北海株GXBH1、GXBH2株属于S2.1c子群。与HCLV株、Shimen株的E2基因编码氨基酸序列相比,9株广西地区流行CSFV毒株共有49处氨基酸发生变异,其中与抗原特性有关的变异有5处,分别为G713E、T724Y、E727H、I732S和S734R位点。【结论】广西地区流行CSFV毒株随时间推移的变异不明显,但其遗传变异总趋势朝着偏离疫苗株的方向发展。

猪瘟病毒广西流行毒株E0基因的克隆与分析

应用RT-PCR方法对猪瘟病毒E0基因进行扩增、克隆及测序,用DNA Star分析软件对6株毒株与猪瘟兔化弱毒苗（HCLV）、石门（Shimen）株、Paderborn株、GXWZ02株的相应片段进行比较分析,构建了CSFV遗传进化树。序列分析表明,广西流行株与HCLV株、Shimen株、Paderborn株、GXWZ02株之间核苷酸的同源性分别为80.8%-81.5%、82.8%-83.3%、93.1%-94.2%、93.7%-94.2%,推导的氨基酸同源性分别为88.3%-89.7%、89.7%-91.1%、96.2%-97.7%、97.7%-99.1%;6株广西CSFV流行毒株与国内外已发表的14株病毒相应序列进行比较,构建遗传进化树,结果表明所比较的20株毒株分为2个基因群,广西流行毒株均属于基因群Ⅱ。本研究成功地对广西流行猪瘟病毒株的E0基因进行了测序分析,表明近年来广西流行毒株未发生较大的变异,但病毒株有远离疫苗株发展的趋势。

黄金蟒口腔炎绿脓假单胞菌的分离鉴定及耐药性分析

为找寻黄金蟒口腔炎的致病原因,对本园饲养患口腔炎黄金蟒的口腔脓性分泌物进行病原菌分离、鉴定和耐药性分析。通过对分离菌的形态学观察、涂片染色镜检、16SrRNA基因序列分析鉴定,表明该病原菌为绿脓假单胞菌。药敏结果显示该分离菌对诺氟沙星、左氟沙星、哌拉西林高度敏感;对阿奇霉素、头孢哌酮、氧氟沙星、头孢曲松、环丙沙星中度敏感;对头孢他啶、头孢克洛、庆大霉素、阿米卡星、阿莫西林、头孢噻肟耐药。根据本次试验结果,选用高敏药很快治愈该患蛇的口腔炎,也可为今后治疗此类疫病提供参考。

草莓防腐保鲜可食用膜的制备与研究

以乳清浓缩蛋白为基质、黄原胶作为增稠剂、甘油作为增塑剂制备可食用膜,包裹在新鲜草莓表面,以期达到防腐保鲜的目的。同时,探讨了乳清浓缩蛋白浓度、黄原胶添加量和膜液pH值对蛋白膜性能的影响。在单因素试验的基础上,优化制备可食用膜的原料配比和工艺参数,得出最佳工艺条件为乳清浓缩蛋白12%、黄原胶添加量0.3%、pH=7。此时,可食用膜具有膜厚度低、透湿系数低及溶解率适中的特点。

道路桥梁设计中的隐患及解决措施

我国国民的生活水平正在不断提高,相应的对生活品质的追求也逐渐提高。我国城市化的发展速度在不断提升的生活水平推动下逐渐加深,这其中,人们对道路桥梁设计中存在的隐患,提出了众多的改善措施。对于道路桥梁的设计而言,安全性和耐久性是重中之重,因此,将道路桥梁设计中存在的隐患逐一解决,不仅能够第一时间反映出道路桥梁工程项目的管理效果,也能够最大程度保证道路桥梁工程按照既定时间完成,因此,本文主要围绕我国道路桥梁设计过程中,存在的问题以及针对这些问题采取的有效解决办法,展开全面的论述,为今后专业人士进行相关研究提供参考。

以乙型肝炎病毒核心蛋白为载体的PRRSV病毒样颗粒疫苗的构建

为采用乙型肝炎病毒核心蛋白(HBc)为载体,构建含美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5糖基化蛋白抗原表位的HBc-GP5病毒样颗粒(VLPs)疫苗,对HBc序列进行密码子优化,将其克隆至pET-28a(+)载体中,获得质粒pEO-NEW。在HBc刺突顶端的免疫显性区插入优化后的GP5序列,获得重组表达质粒pEO-LEORF5,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG 22℃诱导表达。利用SDS-PAGE和Western-blot验证融合蛋白pEO-LEORF5的表达。超声破碎后利用蔗糖密度梯度离心对融合蛋白进行纯化,最后用透射电镜观察VLPs的形成情况。结果表明,重组表达质粒pEO-LEORF5构建正确。表达的融合蛋白的分子质量为32ku,以包涵体和可溶性两种形式表达。经浓缩纯化后融合蛋白纯度可达67%,且能自主装配为VLPs。本试验成功构建出新型HBc-GP5VLPs候选疫苗,为研发新型PRRS疫苗提供了新思路。

磁共振扩散加权成像评价肝泡型包虫病微囊泡的活性

目的研究磁共振扩撒加权成像（DWI）对肝泡型包虫病（HAE）微囊泡活性特征的评价。方法对51例HAE患者的64个病灶进行Kodama分型,测量1~3型病灶中微囊、边缘带、实性成分、液化坏死及正常肝组织的表观扩散系数（ADC）值;搜集30例肝细胞肝癌（HCC）病例,测其实质部分ADC值。将微囊ADC值与各组分别对比。结果 64个病灶中,2个1型,23个2型,30个3型,5个4型,4个5型。测得ADC值分别为：微囊（0.79±0.15）×10^（-3）mm^2/s、边缘带（1.12±0.09）×10^（-3）mm^2/s、实性成分（1.98±0.16）×10^（-3）mm^2/s、液化坏死成分（2.66±0.17）×10^（-3）mm^2/s及正常肝组织（1.45±0.06）×10^（-3）mm^2/s,HCC（0.95±0.12）×10^（-3）mm^2/s。微囊泡ADC值与边缘带、正常肝组织、实性成分及液化坏死ADC值相比,差异均有统计学意义（P〈0.05）。与HCC ADC值相比,无统计学差别（P〉0.05）。结论 DWI可一定程度反映HAE微囊泡的活性。

表达基因Ⅶ型新城疫病毒F蛋白的重组鸡痘病毒的构建和筛选

为了构建并筛选表达新城疫病毒(NDV)F蛋白的重组鸡痘病毒(rFPV-F),通过PCR扩增F基因,克隆至pMD18-T Simple载体,进行DNA序列分析和遗传进化关系分析。将测序正确的F基因克隆至笔者所在实验室自行构建的新型鸡痘病毒穿梭载体pTS2GFPV150中,获得重组质粒pTS2GFPV150-F。然后将其与鸡痘病毒FPV282E4株共转染鸡胚成纤维细胞进行同源重组,挑取表达增强型绿色荧光蛋白的噬斑,经多轮筛选获得重组病毒rFPV-F,应用PCR、RT-PCR、Western-blot等方法对重组鸡痘病毒进行鉴定。结果显示,成功获得NDV F基因及重组F基因的鸡痘病毒rFPV-F,并证实F基因已被整合到鸡痘病毒基因组中,且在感染细胞内被成功表达。本研究成功获得了1株表达NDV F基因的重组鸡痘病毒,为下一步开展动物体内免疫研究奠定了基础。

三种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法的建立

为建立可同时检测新疆出血热病毒(CCHFV)、裂谷热病毒(RVFV)、拉沙病毒(LSV)的荧光基因芯片,分别针对CCHFV和RVFV的S基因、LSV的NP基因,应用生物学软件设计了3对引物与6条探针。运用多重PCR扩增和标记目的片段,将其与基因芯片杂交,最后扫描分析结果。分别对杂交温度与杂交时间进行条件优化,最后对基因芯片的特异性、敏感性和重复性进行评估。结果显示,设计的所有探针都可以与目的片段特异性杂交,探针1a与1b可检测到CCHFV,探针2a与2b可检测到RVFV,探针3a与3b可检测到LSV。相比多重PCR,荧光基因芯片检测CCHFV的灵敏度提高了10倍,检测RVFV的灵敏度提高了100倍,检测LSV的灵敏度提高了100倍。结果表明,本试验建立的同时检测3种出血热病毒的荧光基因芯片检测方法特异性高、敏感性强,可用于这3种病毒的快速检测与甄别。

Even-order high-harmonic generation from solids in velocity gauge

We present a velocity-gauge model for the generation of even-order high harmonics, and reveal that the even-order harmonics originate from the multiple-step transitions among the energy bands in momentum space, while the odd-order harmonics are mainly from direct transitions. The lower valence band is found vital for the generation of even harmonics. Relative intensity of even-order harmonics versus the odd orders is calculated and shows a growing trend as the laser field amplitude increases.

多联重组痘苗病毒的构建及鉴定

构建含有埃博拉出血热病毒(Ebola hemorrhagic fever virus,EHFV)小片段分泌蛋白S基因、马尔堡出血热病毒(Marburg hemorrhagic fever virus,MHFV)GP基因、辛诺柏病毒(Sin Nombre virus,SNV)G2糖蛋白基因及非洲欧尼恩病毒(Africa O’nyong nyong virus,O’NNV)E2蛋白基因的重组痘苗病毒。设计含EGFP筛选标记和4种外源基因的穿梭质粒,并利用同源重组技术、荧光筛选技术和Cre/LoxP敲除系统,最终获得四联重组痘苗病毒。使用PCR方法鉴定重组痘苗病毒及其遗传稳定性;用透射电镜观察病毒形态。结果显示:所构建的多联重组痘苗病毒rVTT-J^-4^+具有良好的遗传稳定性,并且具备痘苗病毒的完整形态。结果表明:成功构建了含有4种外源基因的重组痘苗病毒rVTT-J^-4^+,为后续多联疫苗的研究奠定了基础。