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题名PAP基因cDNA克隆及烟草转基因研究
被引量:6
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作者
王燕萍
曹俊剑
刘海礁
崔红
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机构
河南农业大学国家烟草栽培生理生化研究基地
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出处
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期130-132,141,共4页
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文摘
以美洲商陆(Phytolacca americanaL.)为材料,利用RT-PCR方法克隆商陆抗病毒蛋白(PAP)的cDNA,并构建双元植物表达载体pBinARpap.用捕获该质粒的根癌农杆菌菌株LBA4404与烟草叶片外植体共培养,并在附加30 mg.L-1Kan的MS+0.1 mg.L-1IAA+1.5 mg.L-1BA的培养基上诱导植株分化,再生芽在附加30 mg.L-1Kan的MS培养基上生根,实现再生植株.Kan阳性植株经PCR-Sourthern检测筛选,得到PCR阳性植株,证明异源PAP基因在烟草基因组中的整合;经过RT-PCR检测,证明PAP基因在RNA转录水平上有表达;攻毒试验表明,转基因烟草植株对供试病毒TMV具有明显抗性.
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关键词
烟草
商陆抗病毒蛋白(PAP)
CDNA克隆
基因转导
烟草花叶病
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Keywords
tobacco
pokeweed antiviral protein(PAP)
cDNA cloning
gene transformation
tobacco mosaic virus
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分类号
S572
[农业科学—烟草工业]
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