检验医学高职高专教育教学改革与实践

根据检验医学专科教育目前存在的主要问题，按照检验医学专科教育培养目标的定位以及与之相适应的人才需求，我们遵循教育规律，重新设计了人才培养方案，积极探索新的人才培养模式。形成与新的培养模式相适应的理论教学体系，强化实践、突出技能，真正培养出能够下得去、留得住、用得上的基层应用型人才。

NIV毒素和硒对软骨细胞IL-1β、TNF-α分泌的影响

目的:通过测定NIV毒素和硒作用下软骨细胞IL-1β、TNF-α含量的变化,从细胞因子角度探讨大骨节病发病机制。方法:在体外单层和立体培养的人胚软骨细胞中加入NIV毒素和硒,构建软骨损伤模型,收集软骨组织、细胞和细胞培养液,用光学显微镜观察体外构建组织的形态;用分光光度法测定软骨细胞DNA含量;用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测细胞培养液中IL-1β、TNF-α的水平。结果:形态学观察发现NIV毒素能抑制软骨细胞生长,局部出现点片状坏死;毒素加硒后,上述损伤变化减弱。NIV毒素作用下软骨细胞DNA的合成受到抑制,但培养液中IL-1β、TNF-α含量显著升高,毒素加硒与毒素组变化趋势一致,但数值略下降。结论:NIV毒素能诱导软骨细胞IL-1β与TNF-α的分泌,这可能是造成软骨细胞损伤的原因之一。

三氧化二砷对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法利用MTS/PMS法检测As2O3对SMMC-7721细胞增殖的影响;划痕愈合和侵袭实验检测As2O3对SMMC-7721细胞迁移与侵袭能力的影响;实时定量PCR、Western印迹检测As2O3作用SMMC-7721细胞后MMP-9的表达。结果 2.0μmol/L的As2O3对肿瘤细胞增殖有抑制作用;划痕实验结果显示,2.0μmol/LAs2 O3处理SMMC-7721细胞12和24 h后,较未处理组划痕距离明显增加(P<0.05),表明As2 O3可抑制SMMC-7721细胞迁移。Transwell实验结果显示,2.0μmol/LAs2O3处理SMMC-7721细胞12 h和24 h后,穿膜细胞数较未处理组明显减少(P<0.05),表明As2O3可抑制SMMC-7721细胞侵袭能力。实时定量PCR和Western印迹结果显示,以2.0μmol/L As2O3处理SMMC-7721细胞后,MMP-9 mRNA和蛋白表达均明显下调(P<0.05)。结论 As2O3可通过抑制肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭,抑制肿瘤的转移。

全反式维甲酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,阐明其分子机制。方法:将处于对数生长期的SMMC-7721细胞分为空白对照组和10、20、40μmol.L-1 ATRA组。利用MTS/PMS法检测SMMC-7721细胞的增殖能力,划痕愈合和侵袭实验检测SMMC-7721细胞的迁移与侵袭能力,Real-time PCR和Western blotting法检测SMMC-7721细胞中MMP-9mRNA和蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,20和40μmol.L-1 ATRA组SMMC-7721细胞增殖率明显降低(P<0.01)。划痕实验,20和40μmol.L-1 ATRA组SMMC-7721细胞处理24h后划痕距离较空白对照组明显增加(P<0.05);Transwell实验,与空白对照组比较,10、20和40μmol.L-1 ATRA组SMMC-7721细胞处理24h后穿膜细胞数量明显减少(P<0.05);Real-time PCR分析和Western blotting检测,与空白对照组比较,20和40μmol.L-1 ATRA组SMMC-7721细胞处理24h后,MMP-9mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:ATRA可抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移与侵袭能力,其机制可能与下调MMP-9有关。

香菇C_(91-3)菌丝发酵液中蛋白的分离纯化及其抗肿瘤机理研究

目的研究香菇C91-3菌丝体发酵液中的粗蛋白LFP91-3的分离纯化方法,提取具有抗肿瘤活性的蛋白组分,并初步鉴定其药效及特性。方法 LFP91-3经盐析、透析、Sephadex G-100凝胶过滤层析分离。用考马斯亮蓝法测定各管收集液中的蛋白浓度,依此绘制洗脱曲线,按曲线对收集液分组;用MTT比色法分别测定各组蛋白收集液对肿瘤细胞的生长抑制作用。对抑瘤率最大的一组各管收集液分别做SDS-PAGE电泳银染,取电泳条带相对较单一的峰尖部数管收集液合并,即为本实验的提取蛋白,以MTT比色法测定其对肿瘤细胞的生长抑制作用。用考马斯亮蓝法和硫酸-苯酚定糖法测定提取蛋白中蛋白和糖的比例。流式细胞仪检测提取蛋白诱导肿瘤细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率;透射电镜观察经该蛋白作用的肿瘤细胞的凋亡形态。结果 LFP91-3经分离纯化,可得Ⅰ～Ⅳ共4组蛋白峰,且第3组的收集液抑瘤率最高。SDS-PAGE电泳结果显示第3峰顶部23～26管收集液主要含有19 kDa左右的蛋白,其他分子量的蛋白含量极低。测得该蛋白中蛋白和糖比例约为3∶1。MTT法显示提取蛋白在体外能明显抑制鼠肉瘤细胞株S180细胞的生长。流式细胞仪检测结果表明提取蛋白能在体外诱导S180细胞凋亡。透射电镜下,经提取蛋白作用的S180细胞,呈明显的凋亡形态。结论粗蛋白LFP91-3经盐析、透析、Sephadex G-100凝胶过滤层析分离共得到4组蛋白,第3组对S180细胞的抑制作用最强,其中第23～26管收集液主要含有分子量为19 kDa左右的蛋白,而且含有糖成分,提示可能为糖蛋白。该提取蛋白对S180细胞的生长具有较强的抑制作用,此作用与诱导肿瘤细胞凋亡有关。

《微生物学检验》综合设计性实验的探索及实施

目的探讨在《微生物学检验》实验教学中开展综合设计性实验对培养学生综合能力的影响。方法在我院2004年级医学检验专业专科学生《微生物学检验》实验教学中开展了综合设计性实验。结果学生创新思维、综合设计能力及动手能力都得到了很大的提高。结论《微生物学检验》综合设计性实验对激发学生的学习兴趣、改善课堂授课氛围、提高学生实践性和创造性等起到了很大的促进作用。

临床微生物学检验实验教学的探讨

临床微生物学检验是医学检验专业的主干课程之一,具有很强的实践性和技术性[1]。临床微生物检验的主要任务是感染性疾病病原体的诊断、指导临床合理使用抗菌药物及对院内感染进行监控[2]。近年来随着新的病原体的不断出现、现有病原体的变异及耐药性逐渐增加、条件致病菌感染率不断上升等都给临床微生物检验带来极大挑战[3],因此对微生物检验工作者的要求也更加严格,而实验教学则是提升操作者能力的重要组成部分[4]。

基于典型病例检验报告单的CBL教学法在临床免疫学检验理论教学中的应用及效果评价

目的针对临床免疫学检验理论课,探索高效的、具有专业特色的教学方法及其评估体系。方法以本校检验本科2011级和2012级共321人为研究对象,随机分为两组:一组采用传统模式的教学法为传统组,两年级合计120人;另一组采用基于典型病例检验报告单的案例教学法(Case-Based Learning,CBL)为CBL组,合计201人。由同一教师授课,结束后通过调查问卷分别进行学生和教师评价。通过理论卷面考核成绩比较来评价两组的教学效果的差异。结果学生评价结果显示:92.5%的学生认为,很有必要开展该教学法,并且85.6%以上的学生认为CBL教学对本课程的学习带来很多益处,如可加深对知识的理解和记忆,提升趣味性,拓宽知识面等。教师评价结果显示:96.2%的教师认为CBL教学能提高本课程的教学效果;92.0%以上的教师认为CBL教学能有效增强学生的沟通及团队协作能力以及分析和解决实际问题的能力。卷面考核结果显示,CBL组卷面成绩均值显著高于传统组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CBL教学法能使学生更有效的掌握课程知识,提高了学生学习的主动性和分析问题的能力。

三氧化二砷抑制人肝癌SMMC-772细胞侵袭及其机制

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对人肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:划痕愈合和侵袭实验检测As2O3对SMMC-7721细胞迁移与侵袭能力的影响;Real-time PCR、Western blot法检测As2O3作用SMMC-7721细胞后CD147、MMP-2的表达。结果:划痕实验结果显示,2.0μmol/L As2O3处理SMMC-7721细胞12 h和24 h后,较未处理组划痕距离明显增加(P<0.05),表明As2O3可抑制SMMC-7721细胞迁移。Transwell实验结果显示,2.0μmol/L As2O3处理SMMC-7721细胞12 h和24 h后,穿膜细胞数较未处理组明显减少(P<0.05),表明As2O3可抑制SMMC-7721细胞侵袭能力。Real-time PCR结果显示,以2.0μmol/L As2O3处理SMMC-7721细胞6、12、24 h后,CD147和MMP-2 mRNA表达均明显下调(P<0.05)。Western blot结果显示,2.0μmol/L As2O3处理SMMC-7721细胞12、24、48h后,CD147和MMP-2蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论:As2O3可抑制人肝癌SMMC-7721细胞迁移与侵袭能力,其机制可能与下调CD147和MMP-2有关。

NIV毒素和硒对软骨蛋白聚糖代谢的作用

目的研究大骨节病有关病因因素NIV毒素和硒对软骨细胞外基质蛋白聚糖代谢的损伤和保护作用;探索其引起软骨细胞变性坏死的机制。方法在体外单层培养的人胚软骨细胞中加入NIV毒素和硒,5d后收集软骨细胞和细胞培养液,利用半定量RT-PCR方法检测蛋白聚糖核心蛋白mRNA在软骨细胞中的转录情况;利用咔唑-硫酸法检测软骨细胞培养液中葡萄糖醛酸水平。结果NIV毒素使软骨细胞中蛋白聚糖核心蛋白mRNA水平明显下降,毒素培养液中葡萄糖醛酸的浓度明显增加。毒素加硒组与毒素组变化趋势一致,但数值略下降。组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论NIV毒素能从转录水平抑制软骨细胞蛋白聚糖的合成,加速蛋白聚糖降解,造成基质中蛋白聚糖代谢紊乱,关节软骨受到损伤。补硒可以在一定程度上拮抗NIV毒素对软骨细胞的毒性作用,但保护作用有限,不能从根本上防止损伤的发生。

NIV毒素对软骨细胞透明质酸代谢的影响

目的研究大骨节病可疑致病因子NIV毒素和保护因子硒对体外培养软骨细胞透明质酸代谢的影响,为阐明NIV毒素损伤软骨细胞的机制提供实验依据。方法本实验以体外培养的人胚软骨细胞、培养液为研究对象,利用RT-PCR方法检测透明质酸合成酶-2 mRNA在软骨细胞中的转录情况;利用放射免疫沉淀技术检测细胞培养液中透明质酸含量。结果NIV毒素作用下软骨细胞中透明质酸合成酶-2 mRNA水平升高,毒素加硒组与毒素组基因表达水平无显著性变化。NIV毒素组培养液中透明质酸的含量显著增加。毒素加硒组与毒素组变化趋势一致,但数值略下降。结论NIV毒素对于软骨细胞的透明质酸代谢具有明显的干扰作用,进而引起软骨细胞外基质蛋白聚糖等组分代谢紊乱;补硒能够拮抗NIV对软骨细胞的损伤,但作用有限。

全反式维甲酸对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭能力的影响

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对人肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法划痕愈合和侵袭试验检测ATRA对SMMC-7721细胞迁移与侵袭能力的影响;Real-time PCR、Western blot检测ATRA作用SMMC-7721细胞后CD147、MMP-2的表达。结果 (1)划痕试验结果显示,以10、20、40μmol.L-1ATRA处理SMMC-7721细胞24 h后,较未处理组划痕距离明显增加(P<0.05),表明ATRA可抑制SMMC-7721细胞迁移。(2)Transwell试验结果显示,10、20、40μmol.L-1ATRA处理SMMC-7721细胞24 h后,穿膜细胞数较未处理组明显减少(P<0.05),表明ATRA可抑制SMMC-7721细胞侵袭能力。(3)Real-time PCR结果显示,以10、20、40μmol.L-1ATRA处理SMMC-7721细胞24 h后,CD147和MMP-2的mRNA表达与未处理组比较均明显下调(P<0.05)。(4)Western blot结果表明,10、20、40μmol.L-1ATRA处理SMMC-7721细胞24 h后,CD147和MMP-2蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论 ATRA可抑制人肝癌SMMC-7721细胞迁移与侵袭能力,其机制可能与下调CD147和MMP-2有关。

医学检验实验教学管理体系的改革与研究模式

本文从实验教学计划的制定、教学内容要求、综合设计性实验的开展、实验考核等多方面进行了改革与研究的尝试,并形成一定的模式。

射频消融术治疗功血对卵巢功能影响的临床研究

目的:探讨射频消融术治疗功血(RFA)对卵巢功能的影响。方法:选择30例无生育要求的功血患者为研究对象,对其进行子宫内膜射频消融术。分别在治疗前1个月、治疗前20min、治疗后1个月采取外周静脉血2ml,利用酶免法测定雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)水平。结果:3个时期的E2、P、T水平,治疗前1个月和治疗前20min无显著性差异(P>0.05),治疗前20min和治疗后1个月也无显著性差异(P>0.05)。结论:RFA对卵巢功能无明显影响。

提高血液学检验实验教学质量的探索与体会

血液学检验作为医学检验专业本科生的主干课程之一,其实验课在教学中占有重要的地位,通过对教学内容、教学手段、教学模式、考核制度等方面的探索,总结了一些心得体会,以期为我国临床检验教学事业提供一些参考意见。

NIV毒素和硒对软骨细胞CD_(44)代谢的影响

目的进一步探讨大骨节病(KBD)的发病机制。方法取4月龄引产胎儿软骨细胞原代分离、培养并随机分为四组。对照组不处理,加硒组加入硒浓度为0.1 mg/L,雪腐镰刀菌烯醇毒素(NIV)组加入NIV毒素使终质量浓度为0.1 mg/L,联合组加硒和NIV毒素,浓度同上。RT-PCR法检测各组CD44 mRNA在软骨细胞中的表达;流式细胞仪检测各组软骨细胞表面CD44蛋白的表达;酶联免疫吸附法检测细胞培养液中可溶性CD44(sCD44)水平。结果 NIV组、联合组软骨细胞CD44 mRNA及蛋白表达水平均明显高于对照组和加硒组(P均<0.05)。与NIV组比较,联合组CD44表达有所降低,但不明显。NIV组细胞培养液中溶解的sCD44水平最高,其次为联合组,对照组水平最低。结论 NIV毒素和硒能影响软骨细胞CD44的代谢,这可能是造成软骨细胞损伤的机制。

以学生为主体的综合设计性实验教学实践初探

实验教学是培养学生动手能力、分析解决问题能力、科研思维能力和创新精神的重要手段。综合实验旨在培养学生综合应用能力,加强理论与实践的联系。设计性实验从学生自己查阅文献资料、设计实验方案到独立完成实验过程、撰写论文,提高了学生善于思考、独立解决问题的科研能力。

在微生物学检验实验教学中开展兴趣小组活动

通过开展微生物学兴趣小组活动,以学生为主体,提高学生的学习积极性,充分发挥学生的主动性,对于培养学生的动手、动脑能力,提高微生物学检验综合素质,是一个有效的方法。

《临床血液学与血液学检验》双语教学的思考

为培养具有较高水平英语交流能力的医学人才,通过理解双语教学的真正内涵,探索适合的双语教学模式,加强师资队伍建设,采用多种教学方法和手段,以使临床血液学和血液学检验双语教学能顺利开展。

ICU患者使用口腔护理液的研究现状

近年来，由于临床上大量广谱抗菌药物、多种抗菌药物在预防和治疗方面的联合使用，加上免疫抑制剂、细胞毒药物的更新换代等，细菌的耐药性有增无减，新的耐药菌株层出不穷，导致医院感染的发生率居高不下。研究显示：口咽部的某些致病菌与呼吸机相关性肺炎（ventilator associated pneumonia，VAP）关系密切[1]。良好的口腔护理可以降低口咽部致病菌的聚集，改善口腔环境[2]。选择合适而且有效的口腔护理液，对于减少ICU患者口腔致病菌聚集、降低口腔感染率，同时防止肺部感染、控制医院感染具有重要意义，并能够减少抗菌药物的用量，防止耐药菌的增加[3]。如何提高ICU患者的口腔护理质量是护理学界和口腔医学界的前沿课题之一[4]。笔者将ICU患者使用口腔护理液的现状综述如下。