致病性不同的两种流感病毒NS1蛋白对人源细胞IFN-β转录抑制的比较

A型流感病毒编码的NS1蛋白是病毒关键的致病因子,可以通过多种机制拮抗宿主抗病毒反应.病毒感染过程中,NS1通过抑制NF-κB和IRF3两种转录因子的活性,下调IFN-β转录水平以阻断其诱导的信号通路.实验选取病毒母本致病性不同的两种NS1蛋白(NS1-a,NS1-h),通过RT-PCR、报告基因和VSV病毒滴度等实验证明高致病性禽流感病毒NS1-a与普通人流感病毒NS1-h相比,表现出较强的抑制IFN-β转录能力,并有效帮助VSV病毒复制.此差异源于NS1-a更加有效抑制NF-κB活性以及IRF3激活后的入核行为,与IFN诱导的ISG转录无关.所得结果为阐释流感病毒致病性与NS1的密切关系提供线索.

用分子对接搭建激酶-抑制剂复合物的三维结构

由于蛋白激酶的异常激活导致了许多疾病,激酶抑制剂成为当今医药领域的研究热点.鉴于分子对接在药物设计中取得的成功,该技术被应用于激酶抑制剂的设计.应用分子对接软件包Autodock4对已知三维结构的激酶-抑制剂复合物进行模拟对接,对接所得抑制剂构象与晶体结构非常一致.进一步利用对应激酶在其他体系中的结构与抑制剂进行对接,也获得了与晶体结构一致的抑制剂构象,再现了抑制剂和蛋白间重要的相互作用,从而阐明了利用Autodock4探索激酶-抑制剂结合模式的可行性.

津白Ⅱ小鼠体内筛选乳腺癌特异性结合噬菌体融合肽

目的:利用噬菌体随机肽库,筛选特异性靶向乳腺癌的肽段,为乳腺癌的定位诊断和靶向治疗提供理论依据。方法:建立津白Ⅱ(TAⅡ)小鼠自发乳腺癌模型,并在小鼠体内对噬菌体十二随机肽库进行4轮筛选,回收肿瘤和对照组织(肝)的噬菌体并计数,同时用免疫组织化学染色法,鉴定噬菌体展示肽的特异性。结果:筛选出自发乳腺癌特异性结合的噬菌体,其结合乳腺癌细胞的能力为对照组织的14倍,随机挑选克隆测序鉴定,结果表明十二肽ASANPF-PTKALL出现次数最多,免疫组化染色进一步证明该噬菌体能特异结合于乳腺癌细胞。结论:4次小鼠体内筛选得到的短肽ASANPFPTKALL能够特异结合于乳腺癌组织,为下一步的定位诊断和靶向治疗研究奠定了基础。

Vavl小干扰RNA载体系统的构建及应用

Vav1蛋白是特异于造血细胞表达的鸟苷酸转换因子,它参与了多种免疫细胞如T细胞,B细胞,巨噬细胞,自然杀伤性细胞等的胞内信号转导,发挥着重要作用.小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)是近年来广泛使用的一种降低/消除细胞内蛋白表达的技术.基于这一技术,建立了Vav1干扰RNA载体系统,此系统能够有效的降低白血病细胞系Jurkat细胞内Vav1蛋白的表达,并且使用方便成本低廉.这一系统的成功建立使在多种免疫细胞系中对Vav1的功能进行比较研究成为了可能.