桃、李种间杂交花粉萌发及花粉管行为的观察

选用3个桃[Prunus persica(L)Batsch]品种和4个李(Prunus salicina Lindl.)品种观察了种间杂交时花粉萌发及花粉管的生长状态。结果表明,李的花粉在桃柱头上的萌发及花粉管的生长都受到很大的阻碍,很少有到达花柱基部或子房上端的花粉管;而桃花粉在李柱头上的萌发及花粉管的生长都很正常,与桃品种间杂交没有差异。即桃和李间存在着单侧种间不亲和现象,而这种单侧种间不亲和现象的原因可能是花柱长度及花粉粒体积的差异。

长白山区卫矛科种质资源及鉴别方法

我国有着丰富的卫矛科(Celastraceae)植物资源,可达14属192种。主要分布在长江流域以南各省区。而长白山区野生卫矛科植物是分布在我国的最北线的种质资源,是培育抗寒抗旱卫矛科新品种的珍贵的植物遗传资源,约有3属10种。本研究为了避免发生种质资源的混淆,在查阅大量文献的基础上,结合实际调查情况详细描述了各个种质资源的形态特征、生境、分布、繁殖方法,同时介绍了易混淆树种及鉴别方法。为今后我国北线卫矛科植物的保护、繁育、评价等科研工作提供理论依据。

RAPD标记在桃品种鉴定中的应用

以34个桃品种为试材利用100个随机引物进行PCR的结果,只在23个引物上获得了清晰而具有重复性的多态性DNA带.利用23个随机引物进行RAPD分析的结果共获得了122条多态性DNA带.供试的34个品种中,29个品种可由1个引物的1个或2个多态性DNA带(RAPD标记)与其他的品种相互区别.其中,上海水蜜桃等7个品种可由1个多态性DNA带与其他的品种相互区别,白桃、有明等22个品种可由2个多态性DNA带与其他的品种相互区别.本实验采用的23个引物中A12引物能区分12个桃品种,A17及B20引物各能区分5个品种,D15、C05及C083个引物各能区分3个品种.由此可认为这6个引物可以有效地利用于桃的品种鉴定上.

桃李间交配亲和性

试验采用25个李品种和27个桃品种,共组配141个杂交组合,研究了桃、李间交配亲和性,选出了亲合力高的组合,研究了一些影响亲和性的因素.其结果表明,桃×李间杂交时,授粉后30～35d的座果率比反交高,但果实没过多长时间大部分都落掉了,即桃李间存在着单侧种间不亲和现象.而引起单侧种间不亲和现象的根本原因是母本和父本之间雌蕊长度之差及花粉粒体积之差.

桃属植物随机扩增多态性DNA分析的最适反应条件

以Ｙｕｕｚｏｒａ 桃为试材对桃属植物随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ） 分析的最佳反应条件进行了研究．结果表明桃属植物ＲＡＰＤ分析的最佳反应条件为：总反应混合溶液５ｕＬ 时，添加模板ＤＮＡ１０ ～３０ ｎｇ，Ｔａｑ ＤＮＡ 聚合酶１ ～１ ．５ 个单位，随机引物１０ ～２０ ｐｍｏｌ，ｄＮＴＰ１００ ～２００ ｕＭ，ＭｇＣｌ２ ２ ．０ ～３ ．０ ｍ Ｍ 及５ ｕＬ１０ 倍反应缓冲液条件下扩增５０ ～５５ 个循环，能够获得具有良好的稳定性和重复性的ＤＮＡ扩增产物．ＰＣＲ反应溶液的各组成因素如低于最适浓度范围时会导致扩增带数的减少甚至无带，如高于最适反应浓度范围，则会出现带的弥散或缺失．

桃属植物随机扩增多态性DNA技术在桃品种分类学上的应用

以 34个桃品种为试验材料利用 2 3个随机引物进行桃属植物随机扩增多态性DNA分析结果共获得了 1 2 2条多态性DNA带 .通过聚类分析可把 34个桃品种划分为三个品种群 .第一个品种群包括所有的油桃及Shuangtao ,Fireprince等品种 ;与Hakuto有亲缘关系的 1 8个品种归属第二个品种群 ;而北方系品种Kanto5,Myojo ,Changhowenhwangdo及Saotome等品种被划分为第三个品种群 .本研究利用RAPD技术能够把 34个桃品种分成黄肉系、白肉系及油桃系 .从本研究的结果可以看出利用RAPD技术的分类方法比以往的任何分类方法更准确 ,尤其对长期进行自花受粉 。

中国主要李品种间交配亲和性的研究

本试验选用46个中国李品种,三年共组配108个杂交组合,研究了中国李品种间交配亲和性。试验结果表明:不同杂交组合的亲和性差异很大,108个组合的座果率分布在0～48.20%之间,平均座果率为9.03%。通过研究发现,李自然杂交座果率与作母本时的平均座果率间以及花粉生活力与作父本时的平均座果率间都存在着极显著正相关,相关系数分别为0.7506^(**)和0.7716^(**)。通过本试验筛选出一些亲和力较高的组合,不仅为李树生产提供最适合的授粉树,而且为今后的李树育种提供了选配亲本的理论依据。

无刺红树莓组织培养快速繁殖技术研究

以无刺红树莓带芽茎段和茎尖为外植体,筛选各组织培养阶段高频、稳定的适宜培养基。结果表明:外植体以茎段为佳。分化培养基以1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+活性炭0.1%最好,分化率可达100%;继代增殖培养基以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L最理想,增殖倍数可达7倍;生根培养基以1/2 MS+IBA1.0 mg/L+活性炭1.0 g/L最佳,生根率可达93.33%。生根类型多为皮部生根。采用2步移栽法进行移裁时,第1次移裁以河砂为基质移栽成活率达到98%,第2次移裁成活率100%。

山葡萄SRAP技术体系的建立及其在品种鉴定中的应用

以6个不同的山葡萄品种为材料,对山葡萄SRAP分子标记技术体系进行优化,探讨SRAP标记在山葡萄品种鉴定中的可行性。结果表明:SRAP扩增程序为94℃预变性5 min;前5个循环,94℃变性45 s,35℃退火45 s,72℃延伸90 s;后35个循环,94℃变性45 s,50℃退火45 s,72℃延伸90 s;最后72℃延伸7min。反应体系:25μL总反应体系中含模板DNA 20 ng,dNTP 1.0μL,上下游引物各1μL,rTaq酶0.2μL,10倍Buffer1.0μL,其余用灭菌的ddH2O补充。应用筛选出的16对引物对6个山葡萄品种进行扩增,共扩增出96条条带,其中多态性带占67.71%。每个品种都能找出其特有条带,最少用2对引物就可鉴别6个山葡萄品种。

桃品种种质资源的RAPD分析

用筛选的20个随机引物对42个桃品种(种)进行RAPD扩增,用扩增产生的107条多态性带计算样品间的遗传距离,UPGMA法聚类分析,在遗传距离0.14处可将供试样品划分为四类,认为RAPD标记可用于分析桃种质资源间亲缘关系。在遗传距离0.11处可将水蜜桃、黄肉桃、油桃明显区分开,但存在一定交叉现象,若以肉质类型划分桃品种,还应考虑桃品种的遗传背景。供试样品中珲春桃是优先保存的种质,其次是F ireprince、上海水蜜桃等。根据聚类分析结果和遗传距离,认为珲春桃不是桃和山桃的杂交后代,应为桃的一个变种。

长白山牛皮杜鹃组培快繁及初步驯化栽培研究

以长白山牛皮杜鹃为试材,研究了牛皮杜鹃种胚培养的影响因素,探讨了不同基本培养基、不同激素组合对牛皮杜鹃继代增殖以及壮苗培养的影响,研究牛皮杜鹃的瓶外生根技术,并筛选出了适合牛皮杜鹃炼苗移栽的基质类型以及安全越冬的环境条件。试验结果表明,Read+3.00 mg/L GA3是适合牛皮杜鹃种胚培养的培养基;改良MS+ZT1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L为较适合牛皮杜鹃继代增殖的培养基;最适的壮苗培养基为改良MS+ZT0.2 mg/L+NAA0.5 mg/L;牛皮杜鹃瓶外生根及炼苗移栽较好的方法是将组培苗在纯沙中催根20 d,再将苗移栽至草炭土、腐殖土、河沙体积比为1∶1∶0.5的基质中,瓶外生根率为80%;牛皮杜鹃安全越冬的模式是地窖越冬或将植株基部覆土整株覆雪,以保证不被冬季低温伤害。

TDZ对牛皮杜鹃叶片分化及继代增殖的影响

以牛皮杜鹃组培苗为试材,研究以改良MS为基本培养基,不同质量浓度TDZ、ZT与IBA组合,对叶片愈伤组织诱导及分化、继代增殖的影响。结果表明:TDZ对组培苗叶片愈伤组织诱导及分化的效果显著优于ZT,但在继代培养时增殖效果不如ZT;TDZ 0.3mg/L+IBA 0.5mg/L处理的叶片分化效果最好,分化率高达97.44%;不定芽在改良MS+ZT 0.2mg/L+IBA 0.5mg/L中继代培养后,每瓶分化的不定芽数最多(30.2个)。

桃花粉可育基因连锁的RAPD标记与SCAR标记的转化

桃品种以重阳红(花粉不育)×大久保(花粉可育)的52株F1代群体为试材,应用RAPD技术,结合集群分组分析法(Bulked Segregate Analysis,BSA)构建花粉可育/不育基因池,利用180个随机引物,筛选在花粉可育基因池中稳定扩增的一个RAPD标记OPW03-900。经过重复性验证和群体单株验证,该标记仅在花粉可育个体(重组型除去)中出现,与桃花粉可育/不育位点的连锁距离为5.80cM。将该特异性片段回收、克隆、测序,并设计一对特异SCAR引物,再对F1代个体进行PCR扩增,发现该特异带的位点及重组型个体的数目与RAPD扩增结果一致,片段大小为906bp,命名为SCW03-906,表明RAPD标记已成功转化为与桃花粉可育基因连锁的SCAR标记。该序列已被GenBank收录,登录号为DQ659676。

笃斯越桔研究进展

对笃斯越桔的研究现状进行了综述,系统地介绍了笃斯越桔资源的分布及遗传学研究、生物学特性、栽培与繁殖、采收与加工技术及营养保健成分等方面的研究现状及展望,以期为笃斯越桔相关研究提供参考。

‘苹果梨’离体叶片再生体系的建立

【目的】为了给梨转基因研究提供稳定、高效的离体再生体系,【方法】以‘苹果梨’为试材,NN69作为基本培养基,研究了植物生长调节剂种类、暗培养时间及外植体类型等因素对其再生体系建立的影响,筛选出较适合‘苹果梨’不定芽分化的培养条件。【结果】结果表明,较适合‘苹果梨’分化的外植体为继代4次以上(含4次)的组培苗叶片,适宜分化的培养基为NN69+1.5 mg.L-1TDZ+0.4 mg.L-1NAA,结合20 d的暗培养,再生频率达到71.00%,平均再生芽数为2.21。【结论】影响‘苹果梨’离体叶片再生的最关键因素是外植体的继代次数。

赤霉素对仙客来生长与开花的影响

研究了不同的赤霉素浓度对仙客来生长与开花的影响。结果表明:20mg/kg赤霉素处理的植株比其它处理区植株开花较早,而且整体观赏效果较为理想。即株高和花茎高度适宜,花数增多,花径增大。此项技术应用在生产上,可解决东北地区当前仙客来栽培中存在的花期延迟的问题。

长白山牛皮杜鹃组培苗与野生苗药用成分含量分析

采用HPLC法与紫外分光光度法分别测定了长白山牛皮杜鹃组培苗与野生苗中主要药用成分芦丁与单宁酸的含量。结果表明,芦丁在野生苗两年生老叶中含量最高,为2.54mg/g,野生苗嫩叶含量为1.68mg/g,愈伤组织含量为0.16mg/g,组培苗含量为0.08mg/g,组培叶含量为0.03mg/g,根中未检测到芦丁成分。单宁酸在野生苗老叶中含量最高,为91.54mg/g,野生苗嫩叶含量为45.87mg/g,野生苗根中为24.58mg/g,愈伤组织中含量为13.51mg/g,组培苗中含量为10.32mg/g,组培叶中含量为17.46mg/g。野生苗中芦丁与单宁酸含量均高于组培苗。

三种方法提取不同品种梨叶片总RNA

为筛选出提取梨叶片总RNA的最佳方法,以梨极矮化突变体和苹果梨为材料,采用柱式植物RNAout试剂盒、SDS法和改良CTAB法提取其叶片总RNA并比较提取效果。结果表明,改良CTAB法能有效抑制酚类物质和多糖对总RNA提取的影响,获得纯度高、完整性好的总RNA,其28 S rRNA条带亮度高于18 S rRNA,所提取的RNA适合下一步的研究使用。

降低苹果梨组培过程中外植体褐化的研究

为克服苹果梨组织培养过程中外植体的褐变现象,提高试验材料的成活率,试验以苹果梨1 a生营养枝嫩梢为试材,通过不同培养基配方、不同药剂处理及水培处理,探讨降低苹果梨外植体褐变的影响因素。结果表明:1/3 MS培养基中的外植体成活率较高;液体培养基较固体培养基对降低外植体的褐变的效果好;水培处理可有效降低外植体的褐变率;生长季节取材,随外植体木质化程度的加深,随水培期的延长,外植体的褐变率呈现先降低后上升的趋势,水培4 d处理的外植体成活率最高;最佳取材时期为盛花后期,将材料水培6 d,在1/3 MS+6-BA 1.0mg/L+IBA 0.2 mg/L+Vc 75 mg/L中获得83.3%的外植体成活率。

葡萄花序总RNA提取方法研究

[目的]为筛选出提取葡萄花序总RNA的最佳方法。[方法]以藤稔葡萄花序为试材,针对葡萄花序中多酚、多糖类物质含量较高的特点,比较了CTAB法、SDS/酚法以及经改良的CTAB法对藤稔葡萄花序总RNA的提取效果。[结果]3种方法均能从葡萄花序中提取到总RNA。其中,经改良的CTAB法能有效抑制酚类物质和多糖对总RNA提取的影响,获得纯度高、完整性好的总RNA,其28SrRNA亮度约为18SrRNA的2倍,RT-PCR分析表明:该方法提取的总RNA适合于下一步的研究。[结论]经过改良的CTAB法提取葡萄花序总RNA的效果最佳。