葡萄糖异构酶的研究——酶的分离提纯

葡萄糖异构酶细胞经丙酮处理,缓冲液抽提。DEAE—纤维素离子交挟柱层析和Sephadex G—200凝胶柱层析等方法得到分离井纯化。该法与超声破碎法相比,比活提高3.3倍,活力收率为74%,得到了高纯度异构酶,经Sephadex G—200凝胶柱层析获得较高收率的电泳纯制品。

核磁共振法研究β-环糊精及其衍生物对苯丙氨酸的包和过程

本文采用~1H和^(13)C核磁共振方法,依据化学位移的改变量,系统地研究了β-环糊精及其琥珀酰化衍生物对苯丙氨酸的包和能力以及包和过程运动状态。结果表明苯丙氨酸以苯基为前导经β-环糊精二级羟基口与其发生包和反应;琥珀酰化不但提高β-环糊精对苯丙氨酸的结合能力,而且完全改变了包和过程的结合方式,使得苯丙氨酸以α碳为前导经二级羟基口与β-环糊精产生包和。

制备性配位交换树脂的合成

为满足中性氨基酸制备性层析的要求,本研究合成出三种具有不同配位基团的含铜配位交换层析树脂,其担体材料分别为Sephadex G-25,多孔玻璃和聚苯乙烯磺酸树脂。由于在合成过程中采用了新的合成路线和添加适量的有机溶剂,促进了有机反应物在水中的溶解度,提高单位柱载量达33%,并且有良好的稳定性和机械强度,满足了制备性层析要求。