复合铁皮石斛多糖的胶原/壳聚糖支架对脊髓损伤大鼠的修复作用

目的观察胶原/壳聚糖/铁皮石斛多糖支架对脊髓损伤大鼠的修复作用。方法体外实验采用不同质量浓度铁皮石斛多糖干预骨髓间充质干细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况;在神经分化诱导的基础上,以不同质量浓度铁皮石斛多糖干预骨髓间充质干细胞,RT-qPCR法检测神经元分化相关基因的表达,同时进行吉姆萨染色与免疫荧光染色。体内实验将48只大鼠随机分为假手术组、模型组、胶原/壳聚糖支架组、铁皮石斛多糖支架组,每组12只,术后12周,评估大鼠后肢运动功能,对脊髓损伤区进行HE染色、免疫组化染色。结果一定质量浓度范围内的铁皮石斛多糖可促进骨髓间充质干细胞的增殖,促进神经元分化相关基因Nestin、MAP-2、NSE mRNA表达,抑制GFAP mRNA表达;细胞染色进一步证实铁皮石斛多糖可促进骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞。与胶原/壳聚糖支架比较,胶原/壳聚糖/铁皮石斛多糖支架可进一步恢复脊髓损伤大鼠的后肢运动功能,缩小脊髓损伤空洞面积,增加神经元、神经纤维数量,抑制胶质瘢痕增生。结论复合铁皮石斛多糖的胶原/壳聚糖支架可通过促进神经元的再生、神经的再髓鞘化和轴突的生长,抑制星形胶质细胞瘢痕的产生,促进脊髓损伤后大鼠运动功能的恢复。

IL-24对小鼠黑色素瘤B16细胞的抑制作用

[目的]研究携带IL-24基因的真核表达质粒对小鼠黑色素瘤B16细胞的凋亡和体外增殖的影响.[方法]采用重组DNA技术构建含有IL-24基因的真核表达质粒pEGFP-N1-IL-24,用脂质体法将pEGFP-N1-IL-24转染B16细胞,用荧光显微镜观察其表达,在生物显微镜下观察细胞的形态学变化,用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)法检测细胞凋亡,用MTT比色法检测B16细胞的体外增殖能力.[结果]荧光显微镜下观察到pEGFP-N1-IL-24可在B16细胞中表达;生物显微镜下显示转染IL-24基因的B16细胞皱缩、成团;AO/EB法检测显示转染IL-24的B16细胞核染色质着橘黄色或橙红色,并呈固缩状;MTT比色法显示IL-24明显抑制B16细胞的生长,与对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05).[结论]外源性IL-24基因在体外对小鼠黑色素瘤B16细胞有显著的诱导凋亡和抑制增殖的作用.

免疫炎症指标对医院获得性多药耐药鲍氏不动杆菌菌血症预后的预测价值

目的 分析免疫炎症指标对医院获得性多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAB)菌血症预后的诊断价值.方法 选取2019年1月-2021年12月于承德地区住院治疗的106例医院获得性MDRAB菌血症患者作为研究对象,根据发病后28 d死亡情况将患者分为死亡组(49例)和存活组(57例).对两组患者的临床特征及外周血白细胞计数(WBC)、红细胞沉降率(ESR)、CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)及血清C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平进行对比.采用受试者工作特征(ROC)曲线对免疫炎症指标预测患者预后的价值进行分析.结果 死亡组患者合并终末期肾病、接受侵入性操作、应用糖皮质激素、合并感染性休克的比例及发病时急性生理与慢性健康Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分均高于存活组(P<0.05);死亡组患者外周血CD_(8)^(+)和血清PCT均高于存活组(P<0.05),外周血CD_(4)^(+)和CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)均低于存活组(P<0.05).外周血CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)预测患者预后的ROC曲线下面积(AUC)最高(P<0.05),其次为血清PCT(P<0.05).结论 医院获得性MDRAB菌血症患者的免疫炎症指标与其死亡风险具有关联性,特别是外周血CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)和PCT对预后预测有较高的价值.

辣椒素通过p38 MAPK/COX-2信号通路对局灶性脑缺血大鼠认知功能的影响

目的:探讨辣椒素对脑缺血再灌注大鼠认知功能障碍的影响及可能的作用机制。方法:SD雄性大鼠随机选取12只作为假手术组,其余大鼠采用线栓法复制大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。将建模成功的大鼠分为模型组、SB203580[p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂,1 mg·kg^(-1)]组、辣椒素低、高剂量(50、100 mg·kg^(-1))组、anisomycin(p38 MAPK激动剂,2 mg·kg^(-1))+辣椒素(100 mg·kg^(-1))组,每组12只。再灌注及给药结束后对大鼠进行神经功能缺陷评分;Morris水迷宫和新型物体识别实验检测大鼠学习和认知能力;苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织海马区病理学变化;免疫荧光法检测海马组织小胶质细胞的活化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测脑组织白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))炎性因子的水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)、p38 MAPK、磷酸化(p)-p38 MAPK、环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分、逃避潜伏期、海马CA1区钙结合蛋白-1(Iba-1)阳性表达的小胶质细胞数量、脑组织IL-1β、TNF-α、PGE_(2)水平、海马组织p-p38 MAPK/p38MAPK、COX-2的表达显著升高(P<0.01);穿越平台位置次数、新颖物体辨别指数(DI)、海马组织TRPV1的表达显著减少(P<0.01),且海马神经细胞数量减少,大量炎性细胞浸润;与模型组比较,辣椒素低、高剂量组神经功能缺损评分、逃避潜伏期、海马CA1区Iba-1阳性表达的小胶质细胞数量、脑组织IL-1β、TNF-α、PGE_(2)水平、海马组织p-p38 MAPK/p38 MAPK、COX-2的表达明显降低(P<0.05,P<0.01);穿越平台位置次数、DI、TRPV1的表达明显升高(P<0.05,P<0.01),少量炎性细胞浸润,神经细胞数量明显增多;且使用p38 MAPK的激活剂anisomycin可增加COX-2的表达,明显减弱辣椒素对小胶质细胞活化的抑制作用。结论:辣椒素对脑缺血再灌注大鼠的认知功能具有保护作用,其作用机制可能与抑制p38 MAPK/COX-2信号通路的激活,进而抑制小胶质细胞的过度活化有关。

脑脊液鼻漏致颅内感染、脓毒血症一例

患者 男，60岁。主因头痛、头晕，左鼻腔流液约1个月入院。6个月前头部外伤史，1个月前出现间断头痛，头晕，左鼻腔流液，为清亮透明液体，最快可达1滴／s，头痛，头晕3d，左鼻腔流液加重，伴反复高热，最高39．0℃。查体：神清语利，双侧瞳孔正大等圆，光反射灵敏，颈强，四肢自主活动，肌力、肌张力正常、双侧巴氏征阴性。