肺癌细胞外泌体miR-24-3p调控CD8^(+)T细胞抗肿瘤的功能及机制研究

目的:探究肺癌细胞外泌体miR-24-3p调控CD8^(+)T细胞抗肿瘤的功能及机制。方法:将16HBE exo、A549 exo、H522 exo、H460 exo、miR-NC exo、miR-24-3p exo与CD8^(+)T细胞共孵育(16HBE exo组、A549 exo组、H522 exo组、H460 exo组、miR-NC exo组、miR-24-3p exo组),与PBS共孵育组(PBS组)作为对照,CD8^(+)T与miR-24-3p exo共孵育后转染FGF11质粒(miR-24-3p exo+FGF11组)。CCK8法检测CD8^(+)T细胞的增殖能力。双荧光素酶报告基因实验验证miR-24-3p和FGF11的靶向关系。将各组CD8^(+)T细胞与A549细胞以20∶1的比例共孵育4 h(16HBE exo/CD8^(+)T组、A549 exo/CD8^(+)T组、H522 exo/CD8^(+)T组、H460 exo/CD8^(+)T组、miR-NC exo/CD8^(+)T组、miR-24-3p exo/CD8^(+)T组、PBS/CD8^(+)T组、miR-24-3p exo+FGF11/CD8^(+)T组),Elisa检测共孵育后细胞上清中INF-γ和IL-2的浓度,LDH法检测CD8^(+)T细胞对A549细胞的杀伤能力。结果:相比于PBS组,A549 exo组、H522 exo组、H460 exo组CD8^(+)T细胞增殖能力显著降低(P<0.05)。A549 exo/CD8^(+)T组、H522 exo/CD8^(+)T组、H460 exo/CD8^(+)T组细胞上清中INF-γ和IL-2的浓度显著下降(P<0.001),CD8^(+)T细胞杀伤能力亦显著下降(P<0.001)。双荧光素报告基因检测结果显示FGF11为miR-24-3p的靶基因。miR-24-3p exo组CD8^(+)T细胞增殖能力显著低于miR-NC exo组,miR-24-3p exo+FGF11组CD8^(+)T细胞增殖能力显著高于miR-24-3p exo组(P<0.05)。miR-24-3p exo/CD8^(+)T组细胞上清中INF-γ和IL-2浓度及CD8^(+)T细胞杀伤能力均显著低于miR-NC exo/CD8^(+)T组(P<0.001), miR-24-3p exo+FGF11/CD8^(+)T组细胞上清中INF-γ和IL-2浓度及CD8^(+)T细胞杀伤能力显著高于miR-24-3p exo/CD8^(+)T组(P<0.001)。结论:肺癌细胞外泌体miR-24-3p可通过靶向抑制FGF11而抑制CD8^(+)T细胞的抗肿瘤功能。

食管鳞癌组织中NK细胞和DC浸润与预后的关系

背景与目的自然杀伤(naturalkiller,NK)细胞和树突细胞(dendriticcell,DC)在抗肿瘤免疫中发挥重要作用。热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)也参与抗肿瘤细胞免疫。本研究旨在探讨食管鳞癌组织中NK细胞和DC浸润与预后的关系及其与HSP27、HSP70表达的关系。方法应用免疫组化SP法检测101例食管鳞癌组织中NK细胞和DC的浸润情况。根据临床病理资料和随访结果,对比分析NK细胞和DC在临床病理特征相同、但术后生存时间明显不同的两组病例(长期生存组术后生存5年以上,38例;短期生存组术后1年内死亡,63例)癌组织中的浸润情况。同时,分析NK细胞和DC浸润与HSP27、HSP70表达的关系。结果免疫组织化学染色结果显示101例食管鳞癌组织中每高倍视野(×400)NK细胞平均数为(31.4±19.7)个,其中长期生存组癌组织中每高倍视野NK细胞平均数为(41.9±21.7)个,明显高于短期生存组(25.0±15.4)个(P<0.001)。DC在101例食管鳞癌组织中每高倍视野细胞平均数为(14.8±7.8)个,长期生存组和短期生存组癌组织中每高倍视野DC平均数分别为(15.2±8.6)个和(14.5±7.4)个,t检验显示两组无显著性差异(P>0.05)。NK细胞和DC浸润与肿瘤长度、浸润深度、病理分级、淋巴结转移等临床病理特征均无相关性(P>0.05)。二项分类logistic回归分析显示NK细?

食管鳞状细胞癌患者预后危险因素的分析

目的通过对食管鳞状细胞癌(鳞癌)术后长期生存和短期生存患者临床病理特征的多因素分析,探讨影响食管鳞癌患者预后的危险因素。方法随机选取临床资料和随访资料完整的食管鳞癌手术患者126例,根据随访结果,将其分为长期生存组(≥5年,48例)和短期生存组(≤1年,78例),应用二项分类logistic回归对两组患者的临床病理特征进行多因素分析。结果单因素分析结果两组在肿瘤长度、肿瘤浸润深度、肿瘤病理分级和淋巴结转移方面差别有统计学意义(P<0.01),而在患者年龄、性别、肿瘤位置和食管残端鳞癌检查结果的阴阳性方面差别无统计学意义(P>0.05)。多因素分析显示肿瘤病理分级、淋巴结转移、肿瘤浸润深度和肿瘤长度与食管鳞癌患者预后有关(P<0.05),它们的危险系数分别为2.943,2.641,2.126和1.728。相关分析发现肿瘤长度与肿瘤浸润深度呈正相关(r=0.488,P<0.001),淋巴结转移与肿瘤浸润深度和肿瘤病理分级均呈正相关(r=0.216,P=0.014;r=0.238,P=0.007)。患者年龄、性别、肿瘤部位和食管残端癌残留阴阳性与食管鳞癌患者预后无关(P>0.05)。结论食管鳞癌患者预后的主要影响因素为肿瘤病理分级、淋巴结转移、肿瘤浸润深度和肿瘤长度;肿瘤病理分级为强危险因素,肿瘤长度为低危险因素;患者年龄、性别、肿瘤位置和食管残端癌残留阴阳性为非危险因素。

热休克蛋白27基因在食管鳞状上皮癌变过程中的表达

目的:研究食管鳞癌、癌旁及正常食管粘膜中热休克蛋白27(HSP27)基因的表达。方法:采用RTPCR方法,定量检测26例食管鳞癌、癌旁及正常食管粘膜中HSP27基因表达水平。结果:以HSP27/GAPDHmRNA灰度比值表示HSP27基因的相对表达量。食管鳞癌、癌旁(不典型增生)和正常食管粘膜中的HSP27/GAPDH灰度比值分别为0.81±0.27、0.90±0.24和1.22±0.39。HSP27基因表达水平在食管鳞癌和不典型增生食管粘膜中的表达量明显低于正常食管粘膜(P<0.05),而HSP27基因在食管鳞癌和不典型增生食管粘膜中的表达量差别无显著性(P>0.05)。食管鳞癌、不典型增生食管粘膜及正常食管粘膜中的HSP27基因表达在不同患者年龄、性别和淋巴结转移之间均无显著性差异(P>0.05)。结论:HSP27基因在食管鳞癌和不典型增生食管粘膜中表达与正常食管粘膜相比明显降低,提示HSP27基因在食管鳞癌的发生、发展过程中有不同程度的表达缺失。因此,提高HSP27基因在食管鳞癌中的表达将来可能会成为一种非常有效的生物学治疗手段。

贲门癌患者围手术期上消化道动力学观察

目的观察贲门癌对食管运动功能的影响以及手术后残余食管、残胃的运动功能改变。方法 用低顺应性三腔聚乙烯液压毛细管灌注导管对22例正常人和31例中晚期贲门癌患者进行了食管压力测定。所有受检者均仰卧位,每次吞咽5ml水,采用定点牵拉法。计算机自动计算出各部位的静息压、收缩压、收缩及松弛时间、传播速度。结果贲门癌患者手术前与正常人的各项指标(除下括约肌外)相比较,贲门癌患者食管下段收缩时间明显长于正常人。贲门癌患者手术前后的数据比较:①手术后上括约肌收缩压明显高于手术前。②手术后食管上段静息压和收缩压均明显高于手术前。③手术后食管中段收缩压明显低于手术前。④手术后胃的压力明显低于手术前。⑤手术后食管中段静息压明显低于胃的压力。结论①贲门癌这一疾病并未改变食管运动功能。②手术后近期吻合口处有一高压带,可起到阻止胃腔正压向食管腔传递的压力屏障作用。③手术使食管中段收缩运动功能减弱。④术后反射性引起食管上段收缩增强,从功能上讲似能阻止可能发生的食管咽返流。

食管鳞状细胞癌热休克蛋白27、70表达及临床意义

目的:探讨食管鳞状细胞癌热休克蛋白27、70(HSP27、70)表达及临床意义。方法:应用SP免疫组化方法,检测101例食管鳞状细胞癌组织中HSP27、70的表达。根据临床病理资料和随访结果,对比分析HSP27和HSP70在临床病理特征相同、但术后生存时间明显不同的两组病例(长期生存组38例:术后生存5年以上;短期生存组63例:术后1年内死亡)中的表达情况,判定HSP27、70的表达与食管鳞状细胞癌临床病理特征及预后的关系。结果:HSP27在101例食管鳞状细胞癌中总的阳性表达率为88.1%(89/101),其中长期生存组总的阳性表达率为94.7%,强阳性表达率为81.6%,均明显高于短期生存组(84.1%和54.0%,P<0.05)。HSP70在101例中总的阳性表达率为96.0%(97/101),其中长期生存组总的阳性表达率和强阳性表达率分别为97.4%和68.4%,短期生存组分别为95.2%和76.2%,字2检验显示两组无显著性差异。HSP27和HSP70的表达与临床病理特征不相关(P>0.05)。Logistic回归分析显示HSP27的表达与食管鳞状细胞癌预后有关(P<0.01),而HSP70的表达与食管鳞状细胞癌预后无关(P>0.05)。结论:HSP27是食管鳞状细胞癌预后的独立因素,可作为判断食管鳞状细胞癌预后的重要生物指标之一。HSP70的表达与食管鳞状细胞癌预后无关。

肺结核误诊为先天性肺囊肿2例

例１，男性，２５岁。因查体发现右肺阴影１．５个月入院。１．５个月前胸透发现右肺阴影，经静脉滴注青霉素后，再次胸透仍有阴影，无咳嗽、咯血等症状。Ｘ线胸片：右下肺卵圆形密度增高阴影约３ｃｍ×４ｃｍ，边缘欠整齐，周围有炎性灶。右侧位：阴影位于右下叶后基底段...

食管外病变误诊为食管平滑肌瘤

本文食管外病变指邻近食管并压迫食管使其变形狭窄的病变。我院1983～1992年收治此类病变7例,术前全部误诊为食管平滑肌瘤,经手术及病理证实其中5例为纵隔淋巴结结核,

食管癌切除术后呼吸功能衰竭的危险因素研究

目的探讨食管癌切除术后呼吸功能衰竭的危险因素。方法选择2007—2010年在我院胸外科行食管癌切除术后发生呼吸功能衰竭患者193例为观察组,未发生呼吸功能衰竭患者219例为对照组。食管癌切除术后呼吸功能衰竭的危险因素分析采用单因素分析和多因素Logistic回归分析。结果单因素分析结果显示,两组患者性别,吸烟史,术前高血压、冠心病、糖尿病、贫血、肺结核合并率,肿瘤直径,TNM分期间差异均无统计学意义(P>0.05);两组患者年龄、术前慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并率、肺功能、手术切口数量、吻合部位、手术时间、术中液体输入量、严重并发症发生率、二次手术率间差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,高龄〔OR=1.582,95%CI(1.019,2.457),P=0.041〕、中重度肺功能障碍〔OR=2.539,95%CI(1.056,6.107),P=0.037〕、2个手术切口〔OR=6.524,95%CI(2.603,16.350),P=0.000〕或3个手术切口〔OR=8.028,95%CI(1.534,42.002),P=0.014〕、手术时间长〔OR=1.650,95%CI(1.041,2.616),P=0.033〕、合并严重并发症〔OR=2.189,95%CI(1.048,4.571),P=0.037〕、二次手术〔OR=5.631,95%CI(1.096,28.935),P=0.039〕进入回归方程。结论高龄、术前中重度肺功能障碍、手术切口数量多、手术时间长、合并严重并发症、二次手术为食管癌切除术后呼吸功能衰竭的危险因素,临床上对于此类患者应予以重视。

食管鳞状细胞癌中MT3基因CpG岛甲基化及其临床意义

目的 探讨食管癌中 MT3基因 Cp G岛甲基化的情况及其临床意义。方法 选取切除的食管鳞癌标本4 7例 ,提取肿瘤、上切缘、下切缘及转移淋巴结的标本蜡块 DNA,经重亚硫酸化处理后 ,进行 COBRA分析 ,所得结果与各临床病理参数及随访资料进行比较。结果 全组有 10例 (2 1.3% )肿瘤组织发现 MT3基因甲基化 ,其中 1例呈原位癌样改变的上切缘也检测到甲基化。全组 35枚转移淋巴结中共发现 15枚 (4 2 .9% )甲基化 ,与肿瘤组织相比 ,差异有显著性 (P=0 .0 37,χ2 =4 .35 5 )。原发肿瘤存在甲基化 10例患者中 ,每例有 (5 .7± 3.6 0 )枚转移淋巴结。而不存在甲基化的 37例转移淋巴结数为 (3.2± 2 .13)枚 ,两者比较差异有显著性 (P=0 .0 18)。肿瘤组织的甲基化情况与患者的性别、年龄、烟酒嗜好、肿瘤分期及分化程度均无关 (P值均 >0 .0 5 ,χ2 检验 )。结论 MT3基因Cp G岛甲基化与食管鳞癌的淋巴结转移状况关系密切 ,作为一个独立的预后因素 。

甲醛固定石蜡包埋组织中DNA的三种提取方法比较

为了寻找最佳的自普通 10 %甲醛固定石蜡包埋组织中提取DNA的方法 ,取我院 2 0 0 0年手术切除的 10 %甲醛固定石蜡包埋的食管癌标本 10例 ,分别以蛋白酶K消化酚氯仿抽提法 ,蛋白酶K消化氯化钠盐析法和不同pH值下加热提取法提取其DNA ,然后进行电泳和PCR扩增分析。结果显示 ,蛋白酶K消化酚氯仿抽提法 ,蛋白酶K消化氯化钠盐析法所得DNA产量和质量均高于不同pH值下加热提取法。从而认为蛋白酶K消化氯化钠盐析法简便快捷 ,不用接触有毒的化学药品 ,是理想的DNA提纯方法。

食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛甲基化的意义

目的研究食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛甲基化与其mRNA表达的关系。方法选取4种食管癌细胞系OE21,OE19,OE33和TE7,经重亚硫酸钠处理后,采用限制性酶切图谱分析(COBRA)和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,在DNA甲基转移酶抑制剂5氮2’脱氧胞苷(5azaCdR)处理前后,对其MT-3基因CpG岛的甲基化情况及mRNA的表达情况进行对比研究。结果4种食管癌细胞系的MT-3基因均存在不同程度的CpG岛超甲基化。经5azaCdR处理后,超甲基化状态解除,mRNA的表达水平也较处理前明显提高(P=0.002)。结论食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛的超甲基化可抑制其mRNA表达。当其超甲基化解除后,MT3基因的mRNA表达水平也会相应升高。

支气管类癌(附5例报告)

支气管类癌是一种低度恶性肿瘤,比较罕见,国外文献报告占原发性肿瘤的8～10％,国内报告占3.2％。我院自1980年1月至1989年5月收治5例,均经手术病理证实,占同期肺癌手术的0.85％。病例资料例1 周某,女21岁。因反复咳嗽,咯黄痰伴发烧三年,于1980年1月入院。X线检查示左下肺野椭圆形阴影,密度均匀,边缘光滑,侧位与心脏重叠。纤维支气管镜检查舌段开口充血未见赘物。手术所见瘤体位于舌段6×5×3cm大小。

食管壁内含有残余气管支气管软骨之先天性狭窄（附4例报告）

食管壁内含有残余气管支气管软骨之先天性狭窄（附４例报告）０５００１１河北医学院附属第四医院胸外科李保庆，王其彰，曹富民，刘俊峰，王福顺，李文起，田子强河北医学院附属第四医院病理科于风玲食管壁内气管支气管软件残余所致食管狭窄是儿童罕见的先天性食管狭窄之...

贲门癌患者术后呼吸功能衰竭的高危因素研究

目的探讨贲门癌患者术后发生呼吸功能衰竭的高危因素。方法应用χ2检验及二分类Logistic回归分析等统计学方法,对61例术后发生呼吸功能衰竭的贲门癌患者的高危因素进行分析。结果单因素分析结果显示:年龄、术前合并慢性阻塞性肺疾病(COPD)、肺功能〔肺活量(VC)、用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)〕、麻醉气管插管、手术持续时间及术中液体输入量对贲门癌患者术后呼吸功能衰竭发生的影响有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,术前中度及重度肺功能障碍、高龄、术中麻醉单腔气管插管及术中过多液体输入量对贲门癌患者术后呼吸功能衰竭发生的影响有统计学意义,OR值分别为24.892(P=0.000)、14.722(P=0.000)、7.336(P=0.000)、5.786(P=0.009)和4.571(P=0.003)。结论术前中重度肺功能障碍、高龄、术中麻醉单腔气管插管和术中过多液体输入量是贲门癌患者术后发生呼吸功能衰竭的高危因素。

核素显像对贲门失弛症术后食管通过功能的评价

目的：应用核素显像技术，观察贲门失弛症Ｈｅｌｌｅｒ术后病人的食管通过功能。方法：口服含１８５ＭＢｑ９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ桔汁溶液１０ｍｌ，测定５分钟内的食管放射性计数，计算食管清除率。结果：Ｈｅｌｌｅｒ术后病人食管清除率明显优于术前组，但又显著低于正常对照组。结论：Ｈｅｌｌｅｒ手术能够改善贲门失弛症病人的食管通过功能，但不能达到正常人水平。

贲门失弛缓症并发胃食管反流(附1例报告及文献复习)

贲门失弛缓症是食管运动功能障碍性疾病,其特征为食管下括约肌在吞咽时无松弛,吞咽时食管同步收缩,无原发性食管蠕动,因而产生吞咽困难。检查见下括约肌静息压增高,产生胃食管反流是很难的。但有少数病例可发生胃食管反流,发生率很低,我们在术前24小时pH检查6例中证实1例有胃食管反流,现报告如下。 1