雷公藤红素改善缺血性脑损伤机制的蛋白质组学及代谢组学研究

目的采用代谢组学及蛋白质组学技术研究雷公藤红素对缺血性脑损伤保护作用的相关机制。方法建立ICR小鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。将建模成功的小鼠分为对照组及雷公藤红素治疗组,收集脑损伤组织进行代谢组学分析。采用LPS处理BV2小胶质细胞诱导体外脑损伤模型。经雷公藤红素处理后收集细胞样本进行代谢组学及蛋白组学分析。结果与正常组相比,模型组中有22个显著富集于天冬氨酸盐代谢、苯丙氨酸和酪氨酸代谢、嘌呤代谢、尿素循环等的代谢物发生显著改变;雷公藤红素处理后大多数异常的代谢物得到了回调。LPS处理后,BV2小胶质细胞中有131个生物标志物发生显著改变,这些代谢物显著富集于精氨酸和脯氨酸代谢、苹果酸-天门冬酸穿梭、天冬氨酸代谢等。给药后大多数异常的代谢物得到了回调,其中43个代谢物达显著性差异。蛋白质组共鉴定到7590个蛋白,其中LPS处理诱导393个蛋白发生差异表达。而与LPS组相比,雷公藤红素处理后126个蛋白发生显著差异表达。功能富集分析发现,这些差异蛋白与免疫进程、炎症反应及其相关信号通路。结论体内及体外脑损伤模型可导致脑组织及细胞参与天冬氨酸代谢、嘌呤代谢等的代谢物以及参与炎症反应的信号通路发生变化,雷公藤红素可回调部分代谢物及差异蛋白的变化。

雷公藤红素通过NF-κB阻断尿酸钠晶体诱导的痛风性关节炎大鼠炎性分子表达

目的 观察雷公藤红素对急性痛风性关节炎大鼠的治疗作用及可能机制。方法 采用微晶型尿酸钠(monosodium urate monohydrate crystal, MSU)关节腔内注射诱导SD大鼠急性痛风性关节炎,同时用雷公藤红素(1 mg/kg)进行干预,测定关节肿胀度、关节浸出液中炎症因子、细胞因子的转录和蛋白水平,并进行病理学检查,同时观察雷公藤红素对关节滑膜和软骨组织NF-κB表达和活化的影响,并进行统计学分析。实验分为4组:对照组、雷公藤红素组、MSU诱导的模型组和雷公藤红素干预组(MSU+雷公藤红素),每组4只大鼠。结果 与对照组相比,尿酸钠晶体模型组大鼠踝关节明显肿胀,两组差异有统计学意义(P<0.01)。雷公藤红素干预组与模型组相比,没有观察到雷公藤红素对尿酸钠晶体导致的足肿胀有抑制作用(P>0.05)。雷公藤红素能抑制尿酸钠导致的模型鼠炎性介质IL-8、COX-2和NO的释放,并能抑制IL-8的mRNA转录。雷公藤红素能显著抑制尿酸钠导致的模型鼠关节滑膜和软骨组织的NF-κB表达和活化。结论 雷公藤红素在体内能抑制MSU导致的炎性介质IL-8、COX-2和NO的释放,这种抑制效果与其能抑制MSU导致的NF-κB表达和活化有关。雷公藤红素作为治疗急性痛风性关节炎的候选新药,值得进一步研究。

血清标记物对胃食管反流病抑郁患者抑郁程度的预测作用

目的分析血清标记物对胃食管反流病(GERD)患者抑郁程度的预测作用。方法选取2020年1月至2022年9月上海市浦东新区公利医院收治的96例GERD患者作为GERD组,另选取同期来我院体检的32例健康人员作为对照组。GERD组患者采用汉密顿抑郁量表(HAMD)进行检查,根据抑郁程度不同分为无抑郁、轻度、中度、重度四组。比较两组受检者及不同程度抑郁GERD患者的下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)指标、神经营养指标、免疫炎症指标、代谢指标以及维生素D(VD)水平,患者抑郁程度的影响因素采用多元线性回归分析,指标预测价值采用受试者工作特征曲线(ROC)评价。结果GERD组患者的皮质醇(Cor)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平分别为(101.66±25.77)μg/L、(4.18±1.94)mg/L、(13.28±3.43)pg/mL、(22.02±6.83)ng/L,明显高于对照组的(70.23±9.76)μg/L、(1.87±0.31)mg/L、(9.65±1.66)pg/mL、(13.97±2.68)ng/L,差异均有统计学意义(P<0.05);GERD组患者的VD、脂肪因子瘦素(LEP)、精氨酸加压素(AVP)、脑源性神经营养因子(BDNF)、血管内皮生长因子(VEGF)水平分别为(18.63±8.60)ng/mL、(4.58±2.10)μg/L、(98.59±10.42)mg/L、(13.90±7.72)ng/mL、(556.14±102.32)ng/L,明显低于对照组的(33.21±8.41)ng/mL、(7.13±4.98)μg/L、(250.44±23.75)mg/L、(27.54±4.03)ng/mL、(619.43±78.46)ng/L,差异均有统计学意义(P<0.05);Cor、CRP、TNF-α、IL-1β水平随着患者抑郁程度加重而逐渐升高,而VD、LEP、AVP、BDNF、VEGF水平随着患者抑郁程度加重而逐渐降低,差异均有统计学意义(P<0.05);经多元线性回归分析结果显示,Cor、CRP、LEP、BDNF、VEGF、TNF-α均为GRED患者抑郁程度的影响因素(P<0.05);经ROC分析结果显示,BDNF、CRP预测GERD患者抑郁的曲线下面积(AUC)值较高,分别为0.925、0.881,其中BDNF敏感度最高为98.77%,CRP特异度最高为93.33%。结论GERD抑郁患者CRP、BDNF与患者抑郁程度密切相关,并且联合用于预测GERD患者抑郁状态有较高价值,可为临床提供参考。

NAC对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞Tau蛋白过度磷酸化影响的研究

目的探讨N-乙酰基半胱氨酸(NAC)对β淀粉样蛋白片段25-35(Aβ25-35)诱导SH-SY5Y细胞Tau蛋白过度磷酸化的影响。方法用凝聚态Aβ25-35刺激SH-SY5Y细胞,建立Tau蛋白过度磷酸化的细胞模型。分为空白组、对照组和试验组。空白组为未刺激的细胞,对照组给予20μmol·L^(-1)的Aβ25-35作用6 h,试验组先给予10 mmol·L^(-1)的NAC作用24 h,然后给予20μmol·L^(-1)的Aβ25-35共同作用6 h。通过蛋白免疫印迹法检测CDK 5的两个亚基CDK5和P35/P25的蛋白水平,以及Tau蛋白在Thr 212和Ser396位点的磷酸化水平;采用荧光酶标法检测氧自由基(ROS)。对三组细胞的CDK5和P35/P25的蛋白水平、Thr 212和Ser396位点的磷酸化水平和ROS进行比较。结果三组细胞ROS荧光值比较结果显示,空白组ROS荧光值为231±19,对照组为359±23,试验组为264±32。空白组最低,对照组最高,试验组ROS荧光值明显高于空白组(P<0.05),但低于对照组(P<0.05)。空白组Tau蛋白在T212和S396磷酸化水平分别为1.03±0.09、1.04±0.05,对照组分别为1.63±0.54、1.72±0.34,试验组分别为1.31±0.09、1.21±0.05,空白组最低,对照组最高,试验组细胞明显高于空白组(P<0.05),但低于对照组(P<0.05)。空白组CDK5、P35分别为1.00±0.06、1.00±0.18,对照组分别为0.75±0.14、1.12±0.13,试验组分别为0.19±0.21、0.99±0.09。空白组、对照组与试验组CDK5、P35相比较无显著差异(P>0.05)。空白组P25水平为1.10±0.16、对照组为1.69±0.20,试验组为1.19±0.03,空白组最低,对照组最高,试验组P25值低于对照组,P25值高于空白组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 NAC可以降低Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞Tau蛋白磷酸化水平。

雷公藤红素对β淀粉样蛋白诱导SH-SY5Y细胞Tau蛋白异常磷酸化影响的研究

目的观察雷公藤红素对β淀粉样蛋白1-42导致SH-SY5Y细胞Tau蛋白异常磷酸化的影响及其可能机制。方法用Aβ_(1-42)刺激SH-SY5Y细胞,建立Tau蛋白异常磷酸化的细胞模型。加入雷公藤红素干预,Western印迹法检测Aβ_(1-42)导致Tau蛋白异常磷酸化的变化,同时检测p-NF-κB表达情况;siRNA法下调TLR4表达,Western印迹法检测Aβ_(1-42)导致的Tau蛋白异常磷酸化的变化情况;同时观察下调TLR4后,Aβ_(1-42)刺激对p-NF-κB表达的影响。结果 Aβ_(1-42)刺激SH-SY5Y细胞,导致Tau蛋白Ser199/202、Ser396位点的磷酸化水平增加,而雷公藤红素能降低这两个位点磷酸化水平;Aβ_(1-42)导致细胞p-NF-κB表达增加,雷公藤红素干预后p-NF-κB表达下调,且NF-κB抑制剂BAY11-7082同样能降低Aβ_(1-42)导致的Tau蛋白异常磷酸化;下调TLR4表达,Aβ_(1-42)导致的Tau蛋白异常磷酸化及p-NF-κB表达下降。结论雷公藤红素降低Aβ_(1-42)导致的SH-SY5Y细胞Tau蛋白异常磷酸化可能与其抑制TLR4/NF-κB通路活性有关。

共伴侣分子Cdc37从人热休克蛋白90复合体解离中ATP的作用机制

目的探讨ATP导致共伴侣分子细胞分裂周期蛋白37(Cdc37)从人热休克蛋白90(HSP90)复合体解离的可能机制,为抗肿瘤新药研发提供理论依据。方法用免疫共沉淀法(IP)捕获人组织淋巴瘤细胞(U937细胞)中HSP90复合体后,进行以下实验:(1)用流式细胞术(FCM)检测经过ADP、17-烯丙基胺格尔德霉素(17-AAG)、亚胺二磷酸腺苷(AMPPNP)、ATP处理后HSP90复合体中的Cdc37含量,并分别与经二甲基亚砜(DMSO)处理的对照组进行比较,研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是单纯由ATP结合导致还是依赖ATP水解;(2)用FCM检测对照组及ATP处理后复合体中Cdc37和其他共伴侣分子中S期激酶关联蛋白1 G2等位基因抑制因子(Sgt1)、HSP70相互作用蛋白(HIP)、FK-506结合蛋白(FKBP5)、应激诱导蛋白1(STIP1)、热休克蛋白90腺苷三磷酸酶同系物1激活剂(AHSA1)的变化情况,并用IP-westernblot(IP-WB)进行验证,研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是否伴随其他共伴侣分子解离;(3)用IP-WB检测对照组及ATP处理组复合体中HSP90、Cdc37及共伴侣分子Sgt1的磷酸化水平;用FCM检测对照组、ATP组及蛋白激酶抑制剂组复合体中的Cdc37及Sgt1的含量。研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是否伴随HSP90、Cdc37及其他共伴侣分子磷酸化。结果与对照组相比,ATP处理后HSP90复合体中Cdc37含量显著下降,而ADP、AMPPNP及17-AAG处理对Cdc37无影响;HSP90复合体中加入ATP导致复合体中Cdc37解离,伴随复合体共伴侣分子Sgt1含量降低;HSP90复合体中加入ATP后,复合体中Cdc37、Sgt1磷酸化水平显著增加。而在HSP90复合体中加入蛋白激酶抑制剂后,会阻断ATP导致的Cdc37及Sgt1与复合体解离。结论HSP90复合体中ATP导致Cdc37解离的可能机理是:(1)ATP结合HSP90导致该复合体构象改变;(2)ATP导致Sgt1与该复合体解离,且在这个过程中伴随Cdc37与Sgt1的磷酸化增加。特异性抑制Cdc37和HSP90结合,是抗肿瘤新药研究的方向之一,研究Cdc37与HSP90解离机制是此类药物开发的基础。

使用GMA及PAS-Ⅲ2种添加液冷藏保存血小板的体外研究

目的比较2种不同添加液对4℃冷藏血小板的体外形态、活力和活化程度等指标的差异,分析特定的添加液对4℃冷藏血小板的保护作用。方法取8份单采血小板,将其一分为二,各保留35%血浆,分别添加葡萄糖甘露醇腺嘌呤血细胞保存添加液(GMA)和血小板保存添加液Ⅲ(PAS-Ⅲ)2种不同保存添加液,置4℃条件下保存,于5d后取样测定有关指标。结果在保存5d期间,GMA-PCs的低渗休克反应明显高于PAS-Ⅲ-PCs;而P-选择素的表达则显著低于后者;另外,前者IL-6的产生亦显著低于后者;2组PCs的血小板形变能力、GPⅠbα表达、乳酸生成无显著性差异。结论在4℃冷藏条件下采用血小板保存添加液替代血浆保存单采血小板,对保持血小板体外质量,GMA优于PAS-Ⅲ。

胰岛素强化治疗对严重创伤中性粒细胞凋亡和炎症反应的影响

目的探讨胰岛素强化治疗（ⅡT）对严重创伤中性粒细胞凋亡和炎症反应的作用和机制。方法将41例严重创伤伴有应激性高血糖患者随机分为常规治疗（CT）组（n=21）和ⅡT组（n=20）。CT组：除了创伤常规治疗（包括抗休克、复苏、止血、手术、机械通气等）外，还应用静脉注射常规胰岛素将血糖控制在10．0-11．1mmol／L。ⅡT组：除了创伤常规治疗外，应用ⅡT将血糖严格控制在4．4-6．1mmol／L。分别比较两组治疗前，治疗后48h、72h和1周血浆TNF-α、IL-10、外周血中性粒细胞（PMN）凋亡率、全身炎症反应综合征（SIRS）评分。细胞因子采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测。PMN凋亡应用流式细胞技术检测。结果ⅡT组血浆TNF-α、IL-10及SIRS评分分别较CT组低，ⅡT组外周PMN凋亡率较CT组高。结论ⅡT可通过促进严重创伤时PMN凋亡，降低血浆TNF—α、IL-10水平，降低过度炎症反应，改善严重创伤患者的预后。

雷公藤红素抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移及上皮间质转化

目的研究雷公藤红素在鼻咽癌细胞增殖、迁移及上皮间质转化中的作用。方法使用终浓度为1.8μmol/L的雷公藤红素处理人鼻咽癌HNE1、CNE2细胞,并设二甲基亚砜(DMSO)对照组。用CCK-8法检测HNE1、CNE2细胞的增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,细胞克隆形成实验检测细胞的克隆形成数,细胞黏附与分离实验检测细胞的黏附、分离能力,蛋白质印迹法检测细胞上皮间质转化蛋白(E-钙黏蛋白、β-连环蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白)的表达。结果与DMSO对照组比较,采用1.8μmol/L雷公藤红素处理24、48、72 h后,HNE1细胞的增殖能力均降低(P均<0.05),处理48、72 h后,CNE2细胞的增殖能力均降低(P均<0.05);处理48 h后,HNE1、CNE2细胞的迁移能力均下降(P均<0.05);处理2周后,HNE1、CNE2细胞的克隆形成数均减少(P均<0.05);处理1 h后,HNE1、CNE2细胞的黏附率降低(P<0.05);处理24 h后,HNE1、CNE2细胞的分离率降低(P<0.05);处理6 h后,HNE1、CNE2细胞中E-钙黏蛋白、β-连环蛋白的表达升高(P<0.05),N-钙黏蛋白、波形蛋白的表达降低(P均<0.05)。结论雷公藤红素可抑制鼻咽癌HNE1、CNE2细胞的增殖、迁移及上皮间质转化。

雷公藤红素诱导未折叠蛋白反应信号通路中真核细胞翻译起始因子2α活化抑制多发性骨髓瘤细胞生长

目的研究雷公藤红素抑制多发性骨髓瘤细胞增殖与未折叠蛋白反应(UPR)的关系和分子机制,为多发性骨髓瘤的治疗提供新的药物靶点。方法 4种多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226、U266、SKO、KMS-11,经不同浓度雷公藤红素(增殖实验0.0~10.0μmol/L、凋亡实验0.0~4.0μmol/L、周期阻滞实验0.0~1.5μmol/L)处理不同时间(增殖实验1~3 d、凋亡实验1 d、周期阻滞实验1 d)后,检测细胞增殖、凋亡、周期阻滞情况;用蛋白质印迹法检测肌醇需求酶1(IRE1)、蛋白激酶样内质网激酶(PERK)和活化转录因子6(ATF6)3条UPR信号通路中主要分子的表达,包括葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、ATF6、PERK、真核细胞翻译起始因子2α(eIF2α)、磷酸化eIF2α(p-eIF2α)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、IRE1、磷酸化IRE1(p-IRE1)。用慢病毒包被的含短发夹RNA(shRNA)载体对eIF2α表达进行干扰,观察雷公藤红素对干扰eIF2α表达后的RPMI 8226细胞UPR信号分子表达、凋亡和细胞周期的影响。结果雷公藤红素以剂量和时间依赖方式抑制4种多发性骨髓瘤细胞增殖、诱导凋亡、使细胞周期阻滞在G0/G1期,其中RPMI8226细胞对雷公藤红素最敏感。在RPMI8226细胞,雷公藤红素处理浓度在0.5~2.0μmol/L作用30 min^24 h时均能使UPR的PERK通路中p-eIF2α表达水平升高(P<0.05或P<0.01),其下游CHOP表达也相应增加(P<0.05或P<0.01),而对其他2条通路ATF6和IRE1影响不明显。用慢病毒干扰eIF2α表达后,雷公藤红素上调CHOP表达、诱导凋亡和周期阻滞的作用均减弱或消失。结论雷公藤红素能抑制多种多发性骨髓瘤细胞增殖,活化UPR的PERK信号通路中eIF2α分子可能是其作用机制之一。

雷公藤红素对非小细胞肺癌细胞株H1975的增殖抑制及其相关机制研究

目的研究雷公藤红素对非小细胞肺癌细胞株H1975的增殖抑制作用及相关机制。方法以不同浓度雷公藤红素(0.1、0.25、0.5、1.0、2.0μmol/L)分别作用于H1975细胞12 h或24 h,CCK-8法检测细胞增殖活性;小室侵袭法检测细胞的侵袭能力;Western blot法检测雷公藤红素对H1975细胞EGFR信号通路蛋白及其下游基因表达水平的调控作用;裸鼠成瘤体内验证雷公藤红素对H1975细胞增殖的抑制作用。结果雷公藤红素对H1975细胞增殖有较明显的抑制作用,且这种抑制作用呈浓度和时间依赖性;雷公藤红素能够显著抑制H1975细胞的侵袭能力;雷公藤红素对EGFR通路蛋白及其下游基因表达水平均有不同程度的抑制作用。结论雷公藤红素通过同时抑制EGFR及其下游信号通路蛋白的表达抑制H1975细胞的增殖与侵袭能力。

雷公藤红素对ATRA诱导白血病细胞分化成熟的影响

目的观察雷公藤红素对ATRA诱导白血病细胞分化成熟的影响。方法用细胞形态学、生化指标、分子标志等指标,观察雷公藤红素和/或ATRA不同处理组NB4分化情况。结果与对照组相比,ATRA诱导后,NB4细胞呈现中性粒细胞分叶核形态;NBT还原能力明显增加;分化抗原CD13和CD33表达下降,而CD11b和CD15表达增加。雷公藤红素与ATRA联合应用,结果与ATRA处理组相似。结论雷公藤红素不影响ATRA诱导NB4细胞分化成熟作用,提示雷公藤红素作为分化综合征的治疗和预防药物值得进一步研究。

白细胞介素-32与大鼠克雷伯杆菌肺炎关系的研究

目的：观察白细胞介素-32（IL-32）在大鼠克雷伯杆菌肺炎中的变化，并探讨其意义。方法选择72只SD大鼠，按随机数字表法分为对照组、模型组和实验组，再按实验4 h和1、3、5 d分为4个亚组，每组6只。采用经气管注入0.3 mL细菌混悬液的方法建立大鼠克雷伯杆菌肺炎模型，实验组大鼠制模前腹腔注射IL-32抑制剂蛋白酶活化受体2（PAR2）；于制模后不同时间点尾静脉取血观察各组大鼠血清IL-32、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-6、IL-8水平的变化；取肺组织行苏木素-伊红（HE）染色，光镜下观察肺组织的病理学改变。结果与对照组比较，模型组IL-32、TNF-α、IL-8、IL-6随时间延长均逐渐升高，3 d时达峰值〔IL-32（ng/L）：84.40±28.24比18.57±3.86，t＝5.544，P＝0.002；TNF-α（ng/L）：79.27±14.64比17.82±3.86， t＝9.994，P＝0.000；IL-8（ng/L）：55.85±10.90比16.66±3.76，t＝8.544，P＝0.000；IL-6（ng/L）：56.65±2.57比28.48±2.11，t＝19.693，P＝0.000〕；PAR2预处理可使上述各指标均明显降低，3 d时与模型组比较差异有统计学意义〔IL-32（ng/L）：54.13±6.68比84.40±28.24，t＝2.560，P＝0.046；TNF-α（ng/L）：49.12±3.56比79.27±14.64，t＝4.901，P＝0.003；IL-8（ng/L）：22.95±2.52比55.85±10.90，t＝7.204，P＝0.000；IL-6（ng/L）：36.49±2.63比56.65±2.57，t＝13.443，P＝0.000〕。光镜下观察，实验组大鼠肺组织炎症改变较模型组有所减轻。结论 IL-32作为一种前炎症反应细胞因子，可诱导TNF-α、IL-6和IL-8的产生，抑制IL-32产生对克雷伯杆菌肺炎病情的进展有一定的作用。

不同比例血浆对GMA添加液4℃保存血小板体外质量的影响

目的分析低温液态条件下血浆对保存于葡萄糖甘露醇腺嘌呤(GMA)血细胞添加液中血小板体外质量的影响。方法取白膜法制备的浓缩血小板(PCs)7单位。每单位等分成3份,分离部分血浆后,按比例加入GMA血细胞添加液,制成10%血浆-PCs、35%血浆-PCs和100%血浆-PCs,置4℃冷藏5d。检测0d和5d的血小板计数、pH、平均血小板体积(MPV)、血小板低渗休克反应(HSR)、血小板形变能力(ESC)、P-选择素(P-selectin)、磷脂酰丝氨酸(PS)、血小板表面糖蛋白GPIbα以及乳酸和RANTES(Regulated On Activation,Normal,T-cell Expressed,and Secreted)的生成。结果4℃冷藏5d后,35%血浆-PCs与100%血浆-PCs比较,血小板计数、pH、MPV、HSR、P-selectin、GPIbα和PS以及乳酸和RANTES的差异无显著性(P>0.05);而10%血浆-PCs与35%血浆-PCs和100%血浆-PCs比较,P-selectin和PS表达的增加,差异有显著性(P<0.05),而HSR下降,但差异无显著性(P=0.09);10%血浆-PCs与100%血浆-PCs比较,血小板计数下降,乳酸的生成增加,差异有显著性(P<0.05)。结论用GMA保存液4℃保存血小板时,35%ACD血浆可维持冷藏血小板的膜的完整性、正常代谢和功能。

胃癌外周血调节性T细胞表达与预后的关系

目的:探讨胃癌患者外周血中CD4+CD25+、CD4+FOXP3+、CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞的表达状态与临床病理特征及预后关系。方法:采用流式细胞术检测35例胃癌患者及17例健康对照者外周血中CD4+CD25+、CD4+FOXP3+、CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞占CD4+T细胞的比率及细胞数目;收集胃癌患者临床病理资料并进行术后随访,分析调节性T细胞表达状态与临床病理特征及无瘤生存率之间的关系。结果:胃癌患者外周血中CD4+CD25+、CD4+FOXP3+及CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞占CD4+T细胞比率与健康对照者间有显著差异(P<0.01),CD4+FOXP3+及CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞数目与健康对照间差异有统计意义(P<0.05)。CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞占CD4+T细胞的比率[(2.57±1.50)%]高于对照组[(0.68±0.67)%],并与TNM分期及肿瘤大小有明显相关(P<0.01)。CD4+FOXP3+、CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞占CD4+T细胞的比率与无瘤生存率相关,有显著差异(P<0.01),CD4+FOXP3+及CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞数目与无瘤生存率相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CD4+FOXP3+及CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞可能在胃癌免疫耐受中发挥重要作用,检测其比率及数目对于判断胃癌的病期及预后有一定价值。

胰岛素强化治疗对严重创伤预后影响及其机制的探讨

目的:探讨胰岛素强化治疗(IIT)对严重创伤预后影响及其机制。方法:将41例严重创伤伴应急性高血糖患者随机分为常规治疗(CT)组(n=21)和IIT组(n=20),两组均予以创伤常规治疗,CT组静脉注射常规胰岛素(RI)将血糖控制在10-11.1mmol/L;IIT组将血糖控制在4.4-6.1mmol/L。比较两组治疗前、治疗后24h、48 h、72 h、1周血浆TNF-α、IL-10、外周血多形核中性粒细胞(PMNs)凋亡率,APACHⅡ评分,住院期间病死率。结果:IIT组治疗后24 h、48 h、72 h、1周血浆TNF-α、IL-10水平,1周时APACHⅡ评分、住院期间病死率均明显低于CT组(P均<0.05);ⅡT组治疗后48 h、72 h及1周时外周PMNs凋亡率显著高于CT组(P均<0.01)。结论:IIT可改善严重创伤病人的预后,其作用机制除了降低应激性高血糖的直接毒性作用外,还可能通过促进严重创伤后PMNs凋亡,降低血浆促炎细胞因子,调节过度的炎症反应。

TLR4/MD2/NF-κB信号通路与疾病的研究进展

TLR4/MD2/NF-κB是细胞内一条重要的信号通路,该通路主要参与脂多糖和软脂酸等刺激信号的识别及转导,既往认为该通路主要与感染性炎症有关;近年研究表明,它与肿瘤、自身免疫性疾病、代谢性疾病等密切相关,靶向TLR4/MD2成为治疗这些疾病的新策略。本文就TLR4/MD2/NF-κB信号通路转导及相关疾病研究进展进行阐述。

戏曲小剧场,探索戏曲演艺空间新形态——以“当代小剧场戏曲艺术节”为例

小剧场是催生高度戏剧文明和培育戏剧观众的阵地,当前小剧场对中国当代演艺生态的繁荣和发展起着不可替代的作用。戏剧是人类文明重要的艺术形式,戏曲是中国戏剧的精髓。当前,戏曲正面临不容忽视的严峻的生存发展与振兴问题。而从2014年开始举办的首届中国当代小剧场戏曲艺术节,为处于探索期的当代中国小剧场戏曲演艺空间探索了新形态。本文以"当代小剧场戏曲艺术节"为案例,分析戏曲小剧场,当代小剧场戏曲的作品,艺术节的产业运营模式及节庆文化品牌的打造,进而探索戏曲演艺空间的新形态。

周末的情绪

“天都这么黑了。”刚参加完好友的周末生日Party,我的心都快飞起来了,刚才那一幕幕热闹的景象不时在我眼前掠过,我一面哼着歌一面加快了蹬车的速度。快到家时,猜想着柔弱的妈妈是否已进入了梦乡。推开门。

缺血性脑卒中患者恢复稳定期外周血单个核细胞中差异表达基因的生物信息学研究

目的分析缺血性脑卒中(IS)患者恢复稳定期外周血单个核细胞(PBMCs)中的差异表达基因,为探讨脑卒中恢复稳定期的遗传病理机制提供生物信息学线索。方法选择GEO数据库中GDS4521芯片数据,该芯片以年龄、性别相匹配的20例IS恢复稳定期(脑卒中发生至少6个月以上)患者和20例未发生过脑卒中者作为研究对象,收集其PBMCs进行基因芯片检测,利用GEO2R、DAVID、g:profiler和String等工具,筛选和分析差异表达基因功能富集和相关信号通路情况。结果脑卒中恢复稳定期组与对照组相比,在PBMCs中发现37个基因表达明显变化,其中34个上升,3个下降。GO分析表明,这些差异表达基因在生物过程方面,以炎性反应、中性粒细胞趋化相关基因为最多;在分子功能方面,以趋化因子活性相关基因为最多。KEGG信号通路分析表明,位于TNF信号通路中的差异表达基因数量最多。相互作用网络图揭示,这些差异基因主要以与炎性反应相关的两个网络为主。结论 IS发生超过6个月后仍有多种功能蛋白和信号通路可能发生改变,特别是与炎性反应相关的蛋白和信号通路,提示炎性反应在IS的恢复稳定期仍可能对疾病的预后和再发起作用。